反相高效液相色谱法测定不同地区不同采集期茜草中茜草素的含量

《反相高效液相色谱法测定不同地区不同采集期茜草中茜草素的含量》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、反相高效液相色谱法测定不同地区不同采集期茜草中茜草素的含量【摘要】　　目的采用反相高效液相色谱(RPHPLC)法测定不同地区、不同采集期茜草中大叶茜草素的含量。方法色谱柱LichrosorbC18柱(150mm×4.6mm，5μm)；紫外检测波长250nm；流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液（85∶15），流速0.8ml·min-1，柱温为35℃。结果大叶茜草素在0.021～0.105μg具有良好的线性关系，r=0.9995，平均回收率为99.82％，RSD为0.85％(n=5)。结论该方法简便快捷、精密度高、结果准确。【关键词】茜草；大叶茜草素；反相高效液相色谱　　Abstract：

2、ObjectiveTodevelopanRP-HPLCmethodfordeterminationofthecontentsofmcilugininradixrubiaeofthedifferentresourcesanddifferentcollecttimes．MethodsTheextractsm×4.6mm，5μm)columnethanol-0.1%phosphoricacid(85:15)asmobilephase．Theflol·min-1．Thedetection．Columntempertureethodethodissimple,rapidandaccurate．　

3、　Keycilugin）对照品(中国药品生物制品检定所)，甲醇(色谱纯)，磷酸(分析纯)。茜草(不同采集期夏季、秋季；不同地区采自安徽、江苏、山东)。　　2方法与结果　　2.1色谱条件色谱柱LichrosorbC18柱(150mm×4.6mm，5μm)；紫外检测波长250nm；流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液（85∶15），流速0.8ml·min-1，柱温为35℃。　　2.2对照品溶液的制备　　精密称取大叶茜草素对照品2.1mg，用甲醇溶解，定容于100ml容量瓶中，制得浓度为0.021mg·ml-1的标准储备液。　　2.3供试液的制备　　取样品粉末0.4g，精密称定，置50ml具

4、塞锥形瓶中，加入甲醇25ml，称重，浸泡过夜，超声处理30min，放冷，加甲醇补足失重，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。　　2.4线性关系的考察　　分别精密吸取对照品储备液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0μl，按色谱条件测定峰面积积分值，以浓度为纵坐标，峰面积为横坐标，绘制标准吸收曲线，并用最小二乘法求回归方程，结果见表1，得回归方程为C=1.98×10-5A-2.1388，相关系数r=0.9995。结果表明，大叶茜草素浓度与峰面积在0.021～0.105μg内呈良好的线性关系(其中A表示峰面积)。表1对照品峰面积测定值（略）表2不同产地、不同采集期茜草中茜草素的含量（略）

5、　　2.5精密度实验　　精密吸取同一份供试液，连续进样5次，20μl/次，峰面积的RSD为0.68％，说明仪器和色谱条件均具有良好的精密度。　　2.6重现性实验　　精密称取山东(秋季)茜草样品5份，按样品制备方法制备供试品，进样20μl，测定峰面积，计算的峰面积RSD=1.20％(n=5)，结果显示，该方法具有较好的重现性。　　2.7稳定性实验　　在室温条件下，将样品按测定方法处理后，分别在1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0h每次进样20μl，RSD=0.65％(n=5)。结果表明，该溶液在6h内的含量基本保持不变。　　2.8回收率实验　　回收实验采用加样回收法进行测定，取

6、已知大叶茜草素含量的茜草样品5份，精密称定，分别精密加入大叶茜草对照品230μg，按照供试品溶液制备方法制备，依法测定，测定峰面积计算回收率，结果平均回收率为99.82%，RSD=0.85％。　　2.9样品测定　　收集不同产地、不同采集期的茜草，测定不同产地、不同采集期药材中大叶茜草素的含量。结果见表2。　　3讨论不同产地茜草中大叶茜草素的含量不同，同一产地不同采集期含量也不同，实验证明在相同产地，秋季采集的茜草中大叶茜草素含量较高；不同产地，在山东秋季采集的茜草中大叶茜草素含量最高，可为临床安全用药提供参考。【参考