反相高效液相色谱法测定不同产地丹参中丹参素的含量-论文.pdf

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1、68一湖北中医杂志2014午9月箜鱼鲞箜塑一反相高效液相色谱法测定不同产地丹参中丹参素的含量吴学骋，舒阳，杨睿，林宁(1．湖北中医药大学药学院2013级硕士研究生，湖北武汉430065；2．武汉市武昌医院，湖北武汉430000；3．华中科技大学校医院，湖北武汉430070；4．湖北中医药大学药学院，湖北武汉430065)通讯作者：林宁，男，湖北中医药大学药学院，教授。‘关键词：反相高效液色谱法；丹参；丹参素中图分类号：R284．1文献标识码：A文章编号：1000—07o4(2014)09—0068—0l丹参是一种双子叶唇形科植物丹参的根及根茎。近

2、年来，并用微滤膜过滤上清，进样量5。广泛应用于心血管疾病的治疗，其具有降血压、降血脂、抗血栓、1．6统计学分析增加冠状动脉血流量及改善血液循环等作用。其主要功能成分计数资料采用(元±s)表示，t检验，运用SPSS19．0软件分是丹参素⋯。本实验采用反相高效液相色谱法测定丹参中丹参析，P<0．05为差异具有统计学意义。素的含量，并比较安徽、江苏、河北、湖北四个不同产地中两年2结果生、三年生及五年生的丹参中丹参素的含量。对比了安徽、江苏、河北、湖北四个不同产地中两年生、三年1材料与方法生及五年生共12种的丹参中丹参素的含量。发现不同产地间丹1．1仪器

3、参素含量存在统计学差异，而不同年份问丹参素含量差异无统美国Waters公司产breeze2HPLC系统，Eppendof立式高速计学意义。比较不同产地和年份的丹参中丹参素含量的差异发离心机，杭州惠尔SZ一93A双蒸水蒸馏器，TN一100B电子天现，安徽、江苏、湖北三地的丹参中丹参素的含量相近，三者无统平。计学差异，而河北丹参中丹参素的含量显著高于其余三产地的1．2药材丹参，差异具有统计学意义(P<0．05)。而相同产地的不同年份来自安徽、江苏、河北、湖北四个不同产地的丹参。丹参间虽均呈现出丹参素含量随年份递增的趋势，但差异均不1．3色谱方法显著(

4、P>0．05)。1．3．1色谱条件心]：色谱条件参考已有文献，色谱柱：Kromasil3讨论—C18：250mill×4，6mm，5um，NO．：C18B021l10；流动相为本研究进一步证实运用RT—HPLC法鉴定丹参中丹参素的1％冰醋酸一甲醇92：8；流动相流速为1．0mI．／min；以280nm光含量快捷、准确、有效。在本研究条件下，丹参素的最低检测限源为检测波长；柱温24℃；分离度：10．35；理论塔板数6390。仅为1I．0ng。且其他组分干扰小，样品提取方法和预处理方法1．3．2线性范围]：参考已有方法测定，得到丹参素在的3．9简单易

5、行，可作为检测丹参药材质量的标准方法。—37．1g／mE范围内的回归方程为Y=一72．91+152．78x，r=0．在对不同产地的丹参进行检测对比中发现，河北产丹参中9998。丹参素的含量显著高于其他产地丹参素含量，因此在使用药材1．3．3精密度实验]：参考已有方法测定，丹参素峰面积积分时对药材的来源应当给予更多的重视。而与传统经验不符的值RSD为0．29％(n=5)。是，虽然随着药材年份的增加丹参素的含量也出现了一定程度1⋯34重复性实验：参考已有方法测定，丹参素峰面积积分的提高，但这种提高并不显著，不同产地的丹参中，两年生和五值RSD为0．4

6、3％(n=5)。年生丹参间丹参素的含量并无统计学差异，但在药材价格上两1．3．5最低检测试验；参考已有方法测定，丹参素最低检测者差异较大。因此建议在丹参的运用中使用稍大剂量的两年生限为11．0ng。丹参替代五年生丹参。1．3．6回收率实验]：参考已有方法测定，丹参素回收率为参考文献：99．41％，RSD为1．31％。[1]赵仁霞．丹参的现代药理研究及临床应用[J]．中国医药指南，j．4丹参素提取方法2011，9(12)：291—292．称取lOg丹参并用粉碎机粉碎，120目筛网过滤，置于烧杯[2]YinkeS，BinkeH，JianguoQ．De

7、terminationofTanshinolandProto—中，加入200mLddH0，浸泡40rain后加热至沸腾。水浴锅中保cateehuieAldehydeinXinningTabletsbyRP—HPLC[J]．ChinesePharmaceuticalAfaits，2012。4：026．持沸腾1．5h后过滤取上清。旋转蒸发至lOOmL。(收稿日期：2014—03—10编辑：邵企红】1．5样品测定取丹参煎液200~L加入3．8mL流动相，涡旋震荡1rain，离心