资源描述：
《reck在人喉鳞癌组织中的表达及临床意义》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、RECK在人喉鳞癌组织中的表达及临床意义【摘要】目的通过检测80例人喉鳞癌组织中RECK的表达情况，讨探RECK在喉鳞癌发生发展中的作用。方法用免疫组化法、蛋白印迹分析(edicalUniversity3.DepartmentofHeadandNeckSurgery,LiaoningCancerHospital,Shenyang110000China)Abstract:ObjectiveTodiscussthepotentialroleofRECKinLaryngealsquamouscellc
2、arcinoma(LSCC)bytestingtheexpressionofRECKinhumanLSCC,atotalof80LSCCpatients.Methods(1)RECKexpressioninsurgicallyresectedtissuesamplesoflaryngealcarcinomas(n=80)inedimmunohistochemically;(2)TheexpressionsofRECKerasechainreactions(RT-PCR).ResultsThepo
3、sitiveRECKstainedinthehornypearlandglandulartubecells,butnotinthecarcinomalcells.ConclusionsRECKgenecan?tbeconsideredasakeypointinthepathogenesisofLSCC. Keyouscellcarcinoma(LSCC);RECKgene 喉癌是头颈部第二位原发于上皮的最常见的恶性肿瘤，发病率仅次于鼻咽癌。在过去40年里对喉癌的发病机理的研究已取得许多进步，
4、但喉癌发生的确切机理、侵袭和转移的分子机制还不十分清楚。RECK(reversion-inducing-cysteine-richproteinotifs)基因是近年来发现的新型基质金属蛋白酶抑制剂[1]，目前研究认为作为一种独立的膜锚合基质金属蛋白酶调节因子，RECK基因在多种正常组织中均高表达，而在肿瘤组织中表达量明显下降甚至不表达，且RECK基因表达下降的幅度与肿瘤侵袭转移能力成明显正相关。因此，RECK基因是目前研究较为广泛的一种抑癌基因。 1材料与方法 1.1临床资料 喉癌组织8
5、0例,来源于2005年5月至2007年10月辽宁省肿瘤医院行喉癌手术的切除标本,患者年龄42～81岁,平均60.5岁,均保存有完整的临床和病理资料:I期24例，II期12例，III期22例，IV期17例。每1例石蜡切片皆包括癌组织和其癌旁的正常黏膜组织。 1.2免疫组化染色 山羊抗人多克隆抗体RECK(1∶50倍稀释)购自SantaCruzBiotech，免疫组化SP试剂盒购自福州迈新生物技术有限公司。所有组织均经甲醛固定，常规石蜡包埋，免疫组化SP法染色参照试剂说明书进行，RECK采用高温
6、高压法修复抗原。用已知的阳性切片作阳性对照，PBS代替一抗作阴性对照。(责任编辑：编辑04) 1.3argin-top:0px;margin-right:0px;margin-bottom:10px;margin-left:0px;padding-top:0px;padding-right:0px;padding-bottom:0px;padding-left:0px;line-height:24px;color:rgb(0,0,0);"> 应用RIPA裂解液裂解组织,应用分光光度计测定总蛋
7、白浓度SDS-PAGE凝胶电泳(90V,2h),电转仪电转,(300mA,1.5h,4℃)。将硝酸纤维素膜与适当稀释的第一抗体(1∶200)室温下反应2h,再与用杂交液按比例(1：8000)稀释的二抗杂交2h,ECL反应显色。 1.4RT-PCR法检测组织中RECK基因的mRNA表达 Trizol一步法抽提组织中的总RNA,引物设计见 在本研究中按照不同解剖分区、病理分化程度、有无淋巴结转移将80例喉癌手术标本分类进行研究。通过免疫组化染色发现RECK蛋白表达仅存在于粘膜固有层中的混合腺体
8、的腺上皮细胞和少数高分化鳞癌的角化珠及其周围细胞中，而在中分化癌巢及大部分癌巢的非角化细胞中及正常喉组织中未发现RECK蛋白阳性表达。在不同解剖分区、不同病理分化程度及是否出现淋巴结转移的喉癌组织中RECK蛋白均呈阴性表达。这与TakenakaK[5]1620、李晟磊[9]、姚金光[10]的研究结果不一致。 TakenakaK等研究了171例非小细胞肺癌，RECK蛋白表达阳性率为89.5%,其中有鳞癌63例。本文与TakenakaK等的研究不一致的原因考虑为绝大多数肺癌起源于支气管粘膜上皮，故
