大鼠离体肺再灌注模型的建立和改进

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1、大鼠离体肺再灌注模型的建立和改进作者：魏以桢，吴清玉，史世勇【摘要】目的本实验利用微创方法建立大鼠离体肺灌注模型。方法将一只受体大鼠股动脉、颈静脉插管，引流出静脉血灌注低温保存后的供体肺，氧合后的血液回输入受体大鼠体内。每只受体大鼠建立控制性交叉循环后，灌注一只供体肺1h，取股静脉流出血样测定pH、PO2、PCO2和Hb的变化情况。结果各组间pH、PO2、PCO2和Hb经统计学分析无明显差异（P>0.05）。结论控制性交叉循环下受体大鼠血流动力学稳定，能够较长时间地提供符合生理状态的静脉化全血。可用于供体肺保存及缺血再灌注损伤的研究。【关键词】

2、动物模型肺移植供体缺血再灌注EstablishmentandModificationofIsolatedLungTransplantationandAbstract:OBJECTIVEToestablishandmodifyoftheisolatedlungtransplantationandreperfusionmodelinratsoralarteryandjugularvEinoftherecipientrattoestablishthecontrolledcross-circulatory.Thevenouscannulaonaryarter

3、yoftheexvivolungblockafterpreservationandcoldstoragetoprovideinfloonaryeffluentbloodfromthelungblockoralarteryfordetoxificationanddeoxygenation.Eachsupportratpletoeachlungblockicvenousbloodatstablephysiologicparameterstotheexvivolungblockandthisanimalmodelcanbeusedinresearchofl

4、ungtransplantationandischemic-reperfusioninjury.Keyalmodel;Lungtransplantation;Donor;Ischemic-reperfusioninjury;目前，肺移植已成为一种治疗多种终末期肺部疾患的有效手段。但早期移植物功能障碍(primarygraftfailure，PGF)的发生始终是手术失败的主要原因，与移植后并发症发生率及病死率明显相关［1-2］。PGF病因复杂，降低PGF发生率的努力多集中在延长供体肺保存时间以及减轻供体肺缺血再灌注方面。原位大动物肺移植模型操作复杂，技

5、术要求高，维护成本较高，且失败率高，小动物的体外循环(extracorporealcirculation,ECC)模型较少报道［3-4］。因此，建立一种简单可靠、重复性好、费用低廉的动物模型来评价肺保存及再灌注效果非常必要。本实验利用微创方法建立大鼠离体肺灌注模型，为开展大鼠肺移植手术供体肺保存及术后缺血再灌注损伤等研究提供了一种选择。1材料与方法1.1材料清洁级纯种健康雄性SD大鼠（北京维通利华实验动物技术有限公司提供，实验动物机构许可证号：scxk(京)2002-0003），体重300～350g。1％戊巴比妥钠，1000U/ml肝素化林格氏液，L

6、PD液（lodextran低钾右旋糖酐液）（自配）。呼吸机：DH-150型人工呼吸器（浙江大学医学仪器厂），滚压灌注泵：Stocket-ShileyⅡ型（Stocket德国），恒流泵：HL-1型（上海沪西仪器厂），套管针：14G、16G、18G、22G。1.2供体手术术前6h禁食，自由饮水，称重记录。1%戊巴比妥钠（50mg/kg）腹腔注射，麻醉成功后仰卧固定于特制手术台上。经下肢周围静脉肝素化(1000U/kg体重)，颈部纵行切口，气管切开，以14G套管针行气管插管，打结固定与呼吸机相连，潮气量5ml，频率50次/min，吸呼比1∶2。剪开剑突，正

7、中剪开胸骨，以自动撑开器撑开，打开心包及双侧胸膜，断开呼吸机，自气管插管处分离气管和食道至后纵隔，剪断主动脉弓及上腔静脉，在膈肌水平横断降主动脉和下腔静脉，取出心肺组织。同时助手用肝素注射器收集流入胸腔内的血液，每只鼠可收集10ml左右，存于冰箱待用。即刻切开心脏右室流出道，插入肺动脉插管至肺动脉主干，并固定于灌注装置中，剪开左心耳及左心室以备肺动脉灌洗的引流。将4℃LPD液30ml（100ml/kg）以30cm的高度落差，经肺动脉灌注管灌洗大鼠肺，记录肺动脉灌洗压力和时间到灌洗结束。灌洗时继续保持通气，并检查有无肺损伤和漏气。在吸气末夹住气管，保持

8、肺膨胀状态。将取下的心肺组织，浸没于装有4℃LPD保护液的容器中，外层加盖湿纱布，塑料薄膜覆盖，恒温冰箱4℃