瓜蒌皮中水溶性多糖的提取及含量测定

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1、瓜蒌皮中水溶性多糖的提取及含量测定【摘要】目的从瓜蒌皮中提取多糖，并测定其含量。方法水提醇沉法提取瓜蒌多糖。以葡萄糖为对照品，硫酸-苯酚法进行含量测定。结果标准曲线回归方程为A=6.8071C+0.0227，r=0.9991，瓜蒌皮中多糖含量为5.43%，平均回收率99.11%。结论瓜蒌皮中多糖含量较高，该方法简便可靠，精密度好。【关键词】瓜蒌皮；多糖；提取；含量测定.L.编辑。Abstract：ObjectiveToextractanddeterminethecontentofpolysaccharidesinPericarpiumtrichosanthis.Methods

2、PolysaccharidesofPericarpiumTrichosanthisentation.Phenol-vitrioliccolorimetryinethecontent.ResultsThestandardcurvetrichosanthisTrichosanthis,andthemethodisprecise,easyandreliable.Keytrichosanthis;Polysaccharide;Extraction;Contentdetermination瓜蒌是我国传统中医用药之一。据《本草纲目》记载，其有润肺、化痰、散结、滑肠作用。现代医学研究表明，

3、瓜蒌提取物有扩张冠状动脉、增加血流量、提高耐缺氧能力、降低血清胆固醇、抗菌、抗癌等多种作用［1］。关于瓜蒌所含挥发油、氨基酸、微量元素、甾醇类和三萜类、油脂等成分的研究已有一些报道，而瓜蒌的多糖成分一直少有研究。本实验对瓜蒌皮中水溶性多糖的提取纯化方法进行了研究，并用硫酸-苯酚法测定了多糖的含量。1仪器与试药紫外分光光度计（岛津UV-2401，日本岛津公司），离心机（LD-2A型，北京医用离心机厂），旋转蒸发仪（ZFQ-85A，上海医疗器械厂），真空干燥箱（DZF-1B，上海跃进医疗器械厂）。瓜蒌皮购于浙江平湖药材公司，试剂均为国产分析纯。6%苯酚溶液的制备：取苯酚100g，

4、加0.1g铝和0.05gNaHCO3，在180～182℃蒸馏，空气冷凝，得白色针状结晶。取重蒸馏后的苯酚15g，精密称定，置250ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，避光冷藏。2方法与结果2.1瓜蒌多糖的提取与精制瓜蒌皮粉碎，过20目筛，取200g，用95%乙醇浸泡2d脱脂，药渣加水3000ml，煮沸4h，放置，8层沙布压滤，残渣重复煮沸提取4h，过滤，合并滤液，离心分离，取上清液，60℃减压浓缩至原来体积的1/4，浓缩液加4倍量的乙醇，冰箱放置24h，吸出多糖粗品。用Sevag法，氯仿∶正丁醇（4∶1）脱蛋白，以3000r/min离心20min，除去蛋白质胶状沉淀，重复操作

5、4次，直至紫外测定在260，280nm无蛋白质和核酸的吸收峰。上清液对蒸馏水透析48h，除去氯仿和正丁醇。浓缩透析液至100ml，加95%乙醇320ml醇析多糖，静置24h，过滤，沉淀物60℃减压干燥，得浅黄色瓜蒌多糖(1.8595g)。2.2标准曲线的绘制2.2.1葡萄糖标准溶液的配制精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖对照品50mg，置500ml容量瓶中，加蒸馏水溶解并稀释至刻度，摇匀。2.2.2标准曲线的制备［2］精密吸取上述葡萄糖标准溶液1，2，3，4，5，6，7，8ml，分别置10ml容量瓶中，加水至刻度。精密吸取1ml，加6%苯酚水溶液1.0ml，浓硫酸6ml，静止

6、10min，旋涡混合5min，室温放置20min，于波长490nm处测定吸收度，以1ml蒸馏水按同样显色操作为空白，以多糖毫克数为横坐标，吸收度值为纵坐标，求得标准曲线的回归方程为：A=6.8071C+0.0227,r=0.9991。见图1。图1多糖含量测定标准曲线（略）2.3换算因子的测定精密称取60℃干燥至恒重的瓜蒌多糖13.7mg，置100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。精密吸取1ml，按测定标准曲线同样的方法测得吸收度A为0.487，从回归方程中求出多糖供试品中葡萄糖含量为0.0682mg，按下式计算换算因子f，测得f=2.01f=W/(C×D)式中］.北京：学苑

7、出版社，1993:260.［2］张惟杰.糖复合物生化研究技术，第2版［M］.杭州：浙江大学出版社，2003:12.