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时间:2018-07-06
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1、瓜蒌皮中水溶性多糖的提取及含量测定论文【摘要】目的从瓜蒌皮中提取多糖,并测定其含量。方法水提醇沉法提取瓜蒌多糖。以葡萄糖为对照品,硫酸-苯酚法进行含量测定。结果标准曲线回归方程为A=6.8071C+0.0227,r=0.9991,瓜蒌皮中多糖含量为5.43%,平均回收率99.11%。结论瓜蒌皮中多糖含量较高,该方法简便可靠,精密度好。【关键词】瓜蒌皮;多糖;提取;含量测定Abstract:ObjectiveToextractanddeterminethecontentofpolysaccharidesinPericarpiumtrichosanthis.MethodsPoly
2、saccharidesofPericarpiumTrichosanthisentation.Phenol-vitrioliccolorimetryinethecontent.ResultsThestandardcurvetrichosanthisTrichosanthis,andthemethodisprecise,easyandreliable.Keytrichosanthis;Polysaccharide;Extraction;Contentdetermination瓜蒌是我国传统中医用药之一。据《本草纲目》记载.freell容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,避光冷藏。2方
3、法与结果2.1瓜蒌多糖的提取与精制瓜蒌皮粉碎,过20目筛,取200g,用95%乙醇浸泡2d脱脂,药渣加水3000ml,煮沸4h,放置,8层沙布压滤,残渣重复煮沸提取4h,过滤,合并滤液,离心分离,取上清液,60℃减压浓缩至原来体积的1/4,浓缩液加4倍量的乙醇,冰箱放置24h,吸出多糖粗品。用Sevag法,氯仿∶正丁醇(4∶1)脱蛋白,以3000r/min离心20min,除去蛋白质胶状沉淀,重复操作4次,直至紫外测定在260,280nm无蛋白质和核酸的吸收峰。上清液对蒸馏水透析48h,除去氯仿和正丁醇。浓缩透析液至100ml,加95%乙醇320ml醇析多糖,静置24h,过滤,
4、沉淀物60℃减压干燥,得浅黄色瓜蒌多糖(1.8595g)。2.2标准曲线的绘制2.2.1葡萄糖标准溶液的配制精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖对照品50mg,置500ml容量瓶中,加蒸馏水溶解并稀释至刻度,摇匀。2.2.2标准曲线的制备[2]精密吸取上述葡萄糖标准溶液1,2,3,4,5,6,7,8ml,分别置10ml容量瓶中,加水至刻度。精密吸取1ml,加6%苯酚水溶液1.0ml,浓硫酸6ml,静止10min,旋涡混合5min,室温放置20min,于波长490nm处测定吸收度,以1ml蒸馏水按同样显色操作为空白,以多糖毫克数为横坐标,吸收度值为纵坐标,求得标准曲线的回归方程为
5、:A=6.8071C+0.0227,r=0.9991。见图1。图1多糖含量测定标准曲线(略)2.3换算因子的测定精密称取60℃干燥至恒重的瓜蒌多糖13.7mg,置100ml容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。精密吸取1ml,按测定标准曲线同样的方法测得吸收度A为0.487,从回归方程中求出多糖供试品中葡萄糖含量为0.0682mg,按下式计算换算因子f,测得f=2.01f=].北京:学苑出版社,1993:260.[2]张惟杰.糖复合物生化研究技术,第2版[M].杭州:浙江大学出版社,2003:12.
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