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时间:2018-11-16
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1、桂枝、柴胡与白芍分别配伍的相关药效学研究【摘要】目的研究桂枝、柴胡与白芍分别配伍后的相关药效学作用。方法以酚红比色法观察生理状态下小鼠胃排空、小肠推进功能;放免法测生理状态下小鼠血清内皮素(endothelin,ET);给予小鼠以1.1%冰醋酸腹腔注射致痛、致炎法观察药物的抗炎、镇痛作用。结果与正常组比较,柴芍低剂量组抑制小鼠胃排空、小肠推进功能,差异有统计学意义(P<0.01);柴芍高剂量组抑制小鼠胃排空、小肠推进功能(P<0.001);各药对组对正常小鼠血清ET含量无明显影响(P>0.05)。与模型对
2、照组比较,桂芍低和高剂量组、柴芍低剂量组均能减少小鼠扭体次数,差异有统计学意义(P<0.01);柴芍高剂量组减少小鼠扭体次数,差异有统计学意义(P<0.05);桂芍高剂量组降低小鼠腹腔毛细血管通透性,差异有统计学意义(P<0.05)。结论柴芍配伍后具有解痉作用与镇痛作用;桂芍配伍后具有镇痛、抗炎作用,且桂芍配伍后在镇痛作用方面具有协同作用。【关键词】桂枝;柴胡;白芍;配伍;药效学;小鼠1材料与方法1.1材料1.1.1动物昆明种小鼠250只,普通级,体质量(20±2)g,雌雄各半,由湖南中医学院动物实验中心
3、提供实验动物。1.1.2药物桂枝、柴胡、白芍。全部药材购自湖南中医药大学第一附属医院药房,经湖南中医药大学药植教研室鉴定为正品。硫酸阿托品注射液(无锡市第四制药厂,批号:990102);阿司匹林片(中国上海信谊药厂,批号:990201-193号)。1.1.3仪器FA1004电子分析天平(上海精科天平厂);DD-S型低速离心机(长沙湘仪离心机仪器有限公司);半自动生化光谱分析仪(法国西克曼公司)。1.1.4试剂ET试剂盒(北京科美东雅生物技术有限公司提供,批号20060625);苯酚红,分析纯(广州化学试剂
4、厂,批号:980910);伊文思蓝(上海化学试剂采购供应站分装厂,批号:990807)。1.2方法1.2.1动物分组先按性别和体质量分层,用随机数字表法随机分为25组。每组为10只,各组均为雌雄各半。小鼠胃排空、小肠推进功能实验及小鼠血清ET含量测定共分13组,正常组,桂枝低、高剂量组,白芍低、高剂量组,柴胡低、高剂量组,桂芍低、高剂量组,柴芍低、高剂量组,阿托品组,阿司匹林组,其中阿托品组为胃排空、小肠推进功能的阳性药物对照组,阿司匹林组为血清ET的阳性药物对照组;冰醋酸致炎、致痛小鼠扭体次数、腹腔血管
5、通透性实验共分12组,测生理状态小鼠胃排空、小肠推进功能分组中正常组换为模型对照组,去阿托品组,余组同上。1.2.2药物剂量按体表面积换算,相当于成人(70kg)剂量的5倍为小鼠的低剂量,10倍为高剂量。测生理状态小鼠胃排空、小肠推进功能;生理状态小鼠血清ET;冰醋酸致炎、致痛小鼠扭体次数、腹腔血管通透性的各组小鼠用药量(生药量)均为:桂枝低剂量6.5g/kg、高剂量13g/kg;白芍低剂量6.5g/kg、高剂量13g/kg;柴胡低剂量6.5g/kg、高剂量13g/kg;桂芍低剂量13g/kg、高剂量26
6、g/kg;柴芍低剂量13g/kg、高剂量26g/kg。乙酰水杨酸80mg/100g;阿托品1mg/100g。1.2.3小鼠胃排空、小肠推进功能测定采用酚红定量测定法[2]。各组给药灌胃体积为0.2mL/10g,1次/d,连续灌胃6d,末次给药1h后灌胃0.1%酚红0.8mL/只,给酚红30min后处死动物,取胃及小肠全段,并将小肠全长均分为5段.将胃肠各段放入3mL0.1MNaOH液中消化提取。经24h消化后以1mL20%三氯乙酸沉淀蛋白,经3000r/min离心15min,取上清液1mL,加入3mL0.
7、5MNaOH.混匀后于560nm波长比色,记录OD值。1.2.4ET采用放射免疫法测定各组给药灌胃体积为0.2mL/10g,1次/d,连续灌胃6d后取血,按照试剂盒说明采用放射免疫法测定。1.2.5小鼠扭体次数的观察[3]306各组给药灌胃体积为0.2mL/10g,1次/d,连续灌胃6d,末次给药1h后,腹腔注射1.1%冰醋酸,注射后5~20min内直接观察动物的扭体次数。1.2.6小鼠腹腔血管通透性的测定[3]306各组给药灌胃体积为0.2mL/10g,1次/d,连续灌胃6d,末次给药1h后,腹腔注射1
8、.1%冰醋酸,于注射后30min,每鼠尾静脉注射0.5%伊文思蓝生理盐水溶液0.1mL/10g体质量。20min后脱颈椎处死,轻揉腹部50次后,剪开腹部皮肤肌肉,用5mL生理盐水冲洗腹腔.并收集腹腔液,经3000r/min离心5min取上清液于590nm比色,记录OD值。1.3统计学分析计量资料结果用x±s表示,各组间比较,先进行方差齐性检验,如方差齐用两两比较用LSD检验;如方差不齐,则按秩和H检验。全部数据用SPSS12.
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