超声波提取甘草黄酮及其抑菌活性研究论文

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1、超声波提取甘草黄酮及其抑菌活性研究论文【摘要】的研究甘草中的黄酮提取方法和抗菌活性。方法利用超声波技术通过正交试验提取甘草中的黄酮，杯碟法对其进行抗菌活性的研究。结果超声波最佳的提取条件为功率385ethodsUsingultrasonictechnology,flavonoidsGlycyrrhizabyorthogonalexperiment,andtheirbacteriostaticactivityethod.ResultsTheoptimumextractiveconditionsforflavonoids

2、e8min.Ultrasonictechnologyhadthehighestextractionrate6.23%.ThesubstanceextractedshoeantibioticactivityagainstStaphylococcusaureus,Bacillussubtil,Escherichiacoli,Aspergillusniger,penicillium,theminimuminhibitoryconcentration(MIC)g/ml,andminimumbactericidalconcen

3、trations(MBC)g/mlrespectively.ConclusionUltrasonictechnologyisaneffectivemethodforextractingflavonoidsfromGlycyrrhiza,l，摇匀备用。1.2.2对比实验煎煮法：称取甘草粉10g，加水200ml，浸泡30min，煮沸后，文火煎60min，过滤，共煎煮两次，合并滤液，定容至100ml，摇匀备用。连续回流提取法：称取甘草粉10g，加80%乙醇200ml，水浴回流80min，过滤，共提取两次，合并滤液，定容至1

4、00ml，摇匀备用。表1因素水平表（略）1.2.3标准曲线的制作称取在105℃下干燥恒重的芦丁对照品10mg，用95%的乙醇溶解，摇匀，定容至10ml使之成为浓度为1mg/ml的芦丁标准品溶液，作为储备液备用。量取上述溶液0，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6ml，分别加水至3ml，加5%的亚硝酸钠溶液0.5ml，放置6min，加10%的硝酸铝溶液0.5ml，摇匀，放置6min，后加5%的氢氧化钠溶液2.5ml，混匀，放置15min后蒸馏水定容10ml，用紫外分光光度计在510nm处测其吸光度，得到回归方

5、程为：A＝9.9339C－0.00173（R2=0.9975）1.2.4甘草黄酮的抑菌实验采用杯碟法测定其抑菌作用，取浓度106～107CFU/ml的各种待试菌悬液0.2ml，与相应灭菌培养基15ml混合制成混菌平板，凝固后，在平板上等距离放入4个灭菌牛津杯，每个菌设置3个重复，一个无菌生理盐水为对照，取0.1ml黄酮提取液加入牛津杯中，细菌37℃、真菌28℃培养18～24h后，移去牛津杯，量取抑菌圈直径，直径越大抗菌活性越强。1.2.5最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)的测定用无菌水将甘草黄酮提取液稀释

6、，终浓度分别为1，0.5，0.25，0.0625，0.0313，0.0078mg/ml。取2ml提取稀释液至15ml培养基，混匀后，倒入平板，凝固后加入100μl106～107CFU/ml的菌液，涂布均匀，放至37℃/28℃培养24h后观察结果。菌落被完全抑制的最高稀释度提取物浓度即MIC。培养48h后，菌落被完全抑制的最高稀释度提取物浓度为MBC。2结果与分析2.1超声波提取法条件的优化利用L9（34）正交试验法优化甘草黄酮提取条件结果见表2，各因素对试验结果影响顺序为ACDB，即超声波功率对黄酮提取率的影响效果最

7、为显著，其次是超声波时间。最佳提取条件为A3B2C2D1，即在功率为385in条件下甘草提取液黄酮含量最高。以该最佳提取条件进行验证实验，甘草黄酮提取率为6.23%，RSD＝0.862%（n＝6），因此该最佳提取条件是可行的。表2正交实验结果（略）2.2提取方法的比较由表3可知，超声波提取方法的提取率明显高于其它两种方法，且提取时间最短，提取溶剂用量最少。表3不同的提取方法与黄酮含量的关系（略）2.3抑菌圈的确定由表4可以看出甘草黄酮提取液对金色葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌、黑曲霉、青霉都有较强的抑菌效果。而且对细菌

8、的抑制效果强于真菌。表4黄酮提取液的抑菌效果（略）2.4最低抑菌浓度和最小杀菌浓度的确定结果见表5。表5甘草黄酮最低抑菌浓度和最小杀菌浓度（略）由表5可知，甘草黄酮对金色葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌、黑曲霉、青霉的最低抑菌浓度分别为0.0625，0.0625，0.0313，0.125，0.25mg/ml；最小杀菌浓度为0.25，0.125，0.