间期双色双融合荧光原位杂交监测慢性髓系白血病异基因造血干细胞移植后bcr-abl融合基因

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1、间期双色双融合荧光原位杂交监测慢性髓系白血病异基因造血干细胞移植后bcr/abl融合基因作者：钱思轩，李建勇，张闰，洪鸣，仇海荣，李丽，徐卫，盛瑞兰，吴汉新【摘要】本研究探讨bcr/abl双色双融合荧光原位杂交（DD-FISH）的敏感性及临床应用价值。对19例慢性髓细胞白血病（CML）异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后微小残留病灶（MRD）用DD-FISH进行监测，同时与常规细胞遗传学（CC）、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)结果相比较。样本取自骨髓，少数来源于骨髓片或外周血。结果表明：14例CML患者在Allo-HSCT后CC显示持续正常供者核

2、型，RT-PCR转为阴性，移植2月后均为完全供者嵌合（DC），DD-FISH检测结果持续为阴性，平均随访11.25月，MRD无增加。1例CC及RT-PCR阴性，而性染色体FISH为混合嵌合，DD-FISH阳性，监测无MRD增加，临床未治疗，疾病稳定。3例骨髓复发患者的DD-FISH及性染色体FISH均提示MRD明显增加，RT-PCR转为阳性，却只有1例CC异常，供者淋巴细胞输注（DLI）及甲磺酸伊马替尼治疗后均为DC，DD-FISH阴性，RT-PCR阴性。1例骨活检证实髓外复发患者骨髓或外周血样本的DD-FISH、CC及PCR均阴性，供受者完全嵌合。结论：间期

3、双色双融合FISH可应用于CML异基因造血干细胞移植后MRD的监测，其操作简易快速，灵敏度高，且骨髓或外周血均可采用。动态监测能及时发现扩大的白血病细胞克隆。【关键词】荧光原位杂交　　Monitoringofbcr/ablFusionGenebyInterphase-Dual-ColorandDual-FusionFluorescenceinsituHybridizationinCMLafterAllo-HSCT　　AbstractThisstudyedtoinvestigatethesensitivityandclinicalapplicationvalue

4、ofinterphase-dual-coloranddual-fusionfluorescenceinsituhybridization(DD-FISH).Theminimalresidualdisease(MRD)in19patientsyelogenousleukemia(CML)afterallogenEichematopoieticstemcelltransplantation(allo-HSCT)erasechainreaction(RT-PCR).Thesamplesbonemarroearsofbonemarroaintainedcontinuo

5、uspletemolecularremissionaftertransplantation.Inthesepatients，CCassaydisplayednormaldonorkaryotype，resultofRT-PCRerismonthsoftransplantation，resultofDD-FISHeofthefolloonths，MRDdidnotincrease.ResultsofCCandRT-PCRin1patientshoosomeshoixedchimerism，resultofDD-FISHatologicalrelapsedemon

6、stratedobviousincreaseofMRDdetectedbyDD-FISHandsexFISH，resultofRT-PCR，buttheabnormalresultofCCphocyteinfusionandimatinibmesylatetreatment，these3patientsachievedcytogeicremissionagain，resultsofDD-FISH，CCandPCR.DD-FISH，CCandPCRinbonemarroonepatientedullaryrelapserevealednegativeresult

7、s，andthepletechimerismorereliablysensitiveandpracticablemethodformonitoringMRDinpatientsosomesampleandbloodorbonemarroears.Dynamicdetectionofbcr/ablfusiongenelevelbyFISHmaypredictdiseasechangesandguideindividualtherapy.　　Keyg/day1-2月。HLA全相合移植13例，其中2例为非亲缘性；HLA半相合移植6例。外周血移植13例，骨髓+外周血混

8、合移植2例，骨髓移植2例，非清髓移植为