一年生栽植黄芪中黄芪多糖对人外周血t细胞增殖的影响论文

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1、一年生栽植黄芪中黄芪多糖对人外周血T细胞增殖的影响论文张善玉，施溯筠，朴惠顺，金在久【关键词】黄芪多糖；,,人参总皂苷；,,淋巴细胞摘要：目的观察1年生栽植黄芪中黄芪多糖（APS1）及其与人参总皂苷(TG)联用时对人外周T细胞(hPBTCs)的增殖的影响。方法采用MTT比色法检测hPBTCs的增殖。结果APS1在25～100μg/ml范围内，TG在5～20μg/ml范围内均促进hPBTCs的增殖，增殖百分率分别为127.8%～144.6%和113.9%～163.1%，APS1与TG在上述浓度范围内联用时,增殖百分率为309.5%～529.5%。结论APS1明显促进体

2、外培养的hPBTCs增殖，APS1与TG联用可能增加免疫功能,并具有一定的协同作用。关键词：黄芪多糖；人参总皂苷；淋巴细胞EffectofPolysaccharidefromtheAnnualAstragalusontheProliferationofHumanPeripheralTLymphocytesAbstract：ObjectiveTostudytheeffectsofpolysaccharidefromtheannualAstragalus（APS1）andbinationanperipheralTlymphocytes(hPBTCs).MethodsBy

3、MTTcolorimetricanalysis,theproliferationofhPBTCsotedbybothAPS1(25~100μg/ml)andTG.(5~20μg/ml);thepercentageofproliferationulateproliferationofhPBTCsinvitroandthebinationofAPS1andTGcanpromoteimmunefunction.Keyphocyte黄芪多糖(APS)为黄芪的主要有效成分.freelembraneaceusFisch.)；人参总皂苷(吉林省宏久生物技术有限公司)；四甲基偶氮唑

4、盐（MTT）（华美生物工程公司北京分公司）；植物血凝素（PHA）（广州市医药工业研究所）；环磷酰胺（CY）（江苏恒端医药股份有限公司）；二甲基亚砜（DMSO)等其他试剂均为分析纯。2方法2.1APS1提取称取干燥粉碎的1年生载植黄芪药材300g，加水（20，10，10倍），80℃温度条件下提取3次（2，1，1h），过滤，滤液浓缩至约500ml,加95％乙醇至醇度达80％，放置过夜，沉淀加水溶解，过滤，经Sevag法［3］除蛋白7次，用氨水调pH至8，加3％过氧化氢后放置37℃水浴12h,过滤，滤液置透析袋中流水透析12h,液体浓缩再醇沉，放置过夜，沉淀用无水乙醇和丙

5、酮洗涤，干燥，得7.2g类白色粉末状粗多糖（多糖含量为78.3％）。2.2对人外周T细胞增殖反应（MTT法）［4］2.2.1实验分组实验共设10个组，①APS11组：APS125μg/ml；②APS12组：APS150μg/ml；③APS13组：APS1100μg/ml；④TG1组：TG5μg/ml；⑤TG2组：TG10μg/ml；⑥TG3组：APS120μg/ml；⑦联用1组：APS125μg/ml+TG5μg/ml；⑧联用2组：APS150μg/ml+TG10μg/ml；⑨联用3组：APS1100μg/ml+TG20μg/ml；⑩对照组：生理盐水。2.2.2T细

6、胞增殖反应取正常人抗凝外周血30ml，按常规分离淋巴细胞，用完全培养液调整细胞的密度为1×106/ml，台盼蓝染色检测细胞存活率95％。取100μl加入96孔细胞培养板中，加入终浓度为10μg/ml的PHA，并按实验分组加入ASP1，TG溶液或生理盐水（同时每组分别以培养液代替细胞液作为空白对照），每组设3个复孔，置37℃,.freelin，用酶标仪于波长490nm处测定吸光度值，结果以4个复孔的平均吸光度值A490nm（实验组A490nm=A490nm加供试品组－A490nm空白对照）和细胞增殖百分率表示（细胞增殖百分率＝实验组A490nm/对照组A490nm×1

7、00％）。2.3统计分析实验数据以±s表示，用两样本均数比较t检验进行统计学处理。3结果用MTT法测定结果，正常人外周T细胞在PHA激活的条件下，APS1，TG和APS1＋TG各浓度组的淋巴细胞光密度值A490nm与增殖百分率均较生理盐水组有增高的趋势，其中TG的作用随着浓度的提高而增强，APS1的各浓度组均作用较强，但APS1的药效与浓度没有依赖关系。APS1＋TG各浓度组增殖百分率均高于单用APS1或TG组，APS11组、APS12组、TG3组及APS1＋TG各组的A490nm明显高于生理盐水组（P0.05或P0.01），结果见表1。表1APS1和TG联用对