大孔树脂对红凤菜总黄酮的吸附分离特性研究

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1、大孔树脂对红凤菜总黄酮的吸附分离特性研究作者：裴咏萍，李维林，张涵庆【摘要】目的筛选适合分离纯化红凤菜总黄酮的大孔吸附树脂。方法以总黄酮含量为指标，比较不同类型大孔树脂在静态和动态情况下对红凤菜总黄酮的吸附和解吸附特性。结果D101和HPD-100大孔吸附树脂对红凤菜总黄酮具有良好的吸附分离性能，吸附快、解吸附容易，性能优于其他树脂。结论D101和HPD-100型大孔树脂对红凤菜总黄酮的分离纯化效果较好。【关键词】红凤菜；总黄酮；大孔树脂；吸附；解吸附ChinaAbstract：ObjectiveToscr

2、eenmacroporousresinsforisolationandpurificationoftotalflavonesfromGynurabicolorDC.(TFG).MethodsThecontentoftotalflavonesicabsorptionanddesorptiontestsacroporousresin．ResultsD101andHPD-100resinshadgoodpropertytoabsorbanddesorbTFG.ConclusionD101andHPD-100res

3、insarebetterforusolationandpurificationofTFG.　　Keyg于25ml容量瓶中，以70%乙醇超声溶解，定容至刻度，得浓度为0.2mg/ml的芦丁标准液。精密移取0.0，0.5，1.0，1.5，2.0，2.5ml芦丁标准液至25ml量瓶中，分别加入0.1mol/LAlCl3·6H2O1.0ml，用70%乙醇定容至刻度，摇匀，放置15min后于411nm处测定吸光度，制备标准曲线。测得的标准方程为：Y=-0.0185+33.875X，R=0.99956，其中Y为吸光度，

4、X为试液中总黄酮含量（μg/ml）。结果表明芦丁在4～20μg/ml的范围内吸光度与浓度呈良好的线性关系。　　2.1.2样品中总黄酮含量的测定精密移取待测样品液1ml于25ml的容量瓶中，加入0.1mol/LAlCl3·6H2O1.0ml，用70%乙醇定容至刻度，摇匀，放置15min后于411nm处测定吸光度，代入标准曲线，计算总黄酮含量。　　2.2红凤菜总黄酮粗提物样品液的制备取红凤菜干品粉末400g，用4800ml70%乙醇热回流提取2h，然后用4000ml70%乙醇热回流提取2h，合并两次提取液，浓缩

5、挥去乙醇，置冰箱中冷却沉淀24h后，5000r/min离心10min，取上清液，以蒸馏水定容至500ml，得红凤菜总黄酮粗提物样品液。经前述方法测定，其总黄酮含量为1.506mg/ml，干燥后测得总黄酮含量为8.61%。　　2.3树脂的预处理大孔树脂用95%乙醇浸泡24h，充分溶胀后，用95%乙醇淋洗至流出液与水混合（1∶3）不呈白色浑浊为止，然后以大量蒸馏水洗尽乙醇，室温晾干，备用。　　2.4大孔树脂静态吸附筛选实验　　2.4.1吸附量的测定精密称量经预处理的D101，NKA，HPD-100，HPD-72

6、2，AB-8，HPD-450，DM130，NKA-9，HPD-600，HPD-417干树脂各1.000g，置三角瓶中，精密移取10.00ml红凤菜总黄酮粗提物样品液，120r/min振荡24h。充分吸附后过滤，按照前述方法测定滤液中的总黄酮含量（以质量浓度表示，下同）。按照下列公式计算各型号树脂在室温下的吸附量及吸附率。　　吸附量（mg/g）=（原液总黄酮含量×原液体积－吸附液总黄酮含量×吸附液体积）/树脂质量吸附率（%）=［（原液总黄酮含量－吸附液总黄酮含量）/原液总黄酮含量］×100%　　2.4.2解吸

7、率的测定取“2.4.1”项中吸附饱和后的树脂，分别精密加入95%乙醇15.00ml解吸附，120r·min-1振荡24h，过滤，按照前述方法测定滤液中的总黄酮含量。按照下列公式计算各型号树脂在室温下的解吸附率。解吸附量（mg/g）=（解吸液总黄酮含量×解吸液体积）/树脂质量解吸率（%）=解吸附量/吸附量×100%　　2.5大孔树脂动态吸附筛选实验　　2.5.1吸附量的测定分别取经预处理的D101，NKA，HPD-100，HPD-722，AB-8，HPD-450，DM130，NKA-9，HPD-600，HPD

8、-417干树脂各3g，湿法装柱（柱体积2ml，大孔树脂床体积4ml），加红凤菜总黄酮粗提物样品液10.00ml于柱顶，以相同流速进行动态吸附，收集流出液，按照前述方法测定其中的总黄酮含量，计算总黄酮质量和树脂的上柱量。然后用蒸馏水清洗树脂床中未被吸附的成分，收集水洗液，按照前述方法测定其中的总黄酮含量，计算总黄酮质量和树脂的吸附量。计算公式如下：　　上柱量（mg/g）=（原液总黄酮含量×原液体积－过柱流出液总黄酮