不同来源的粉葛中总黄酮和葛根素的含量测定论文

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1、不同来源的粉葛中总黄酮和葛根素的含量测定论文王春怡杨方明李卫民高英【摘要】目的考察不同来源粉葛中总黄酮、葛根素的含量。方法采用紫外分光光度法（UV）测定总黄酮含量；采用高效液相色谱法（HPLC）测定葛根素含量，kromasilC18色谱柱(4.6mm×250nm，5μm)，流动相为甲醇－水（33：67），流速为1.0ml·min-1，柱温30℃，检测波长为250nm。结果总黄酮含量为0.53%～1.03%，回收率为99.69%.freelsoniiBenth的干燥根，自古与野葛同作中药葛根用，具有解肌退热，生津，透疹，升阳止泻之功效［1］，临床应用广泛。2005年版

2、《中国药典》首次将粉葛作为分列中药材记载。粉葛中的主要生物活性成分有葛根素等异黄酮类化合物［2］，具有降血压、扩张冠状动脉等多种生物活性，同时粉葛又富含淀粉，因此具有较高的医用和食用价值，现已开发出粉葛淀粉系列多种保健食品。目前，粉葛的栽培面积不断扩大，并出现了许多栽培品种，因此不同来源药材之间有效生物活性成分的含量会有较显著的差异，从而影响药材质量。广东、广西为粉葛药材的主要产地，药源丰富，本文采用比色法及高效液相色谱法对广东、广西所产的不同来源的粉葛中总黄酮及葛根素的含量进行了比较，为粉葛药材质量控制提供实验依据。1仪器与材料1.1仪器P680高效液相色谱仪(戴

3、安公司)；satoriusBS110S精密天平；unicuv-2100紫外分光光度计（尤尼柯上海仪器有限公司）。1.2药材粉葛，产地：广东、广西，经广州中医药大学中药鉴定教研室鉴定，均为豆科植物甘葛藤的干燥根。（来源见表1）1.3试药葛根素标准品（中国药品生物碱制品检定所，批号110752-200511）。甲醇（色谱纯，德国Merck公司），乙醇（分析纯，天津大茂化学试剂厂），水为高纯水。2方法与结果2.1UV法测定不同来源粉葛中总黄酮的含量2.1.1溶液的制备对照品溶液的制备：精密称取80℃干燥至恒重的葛根素对照品5.0mg，置25ml容量瓶中，用95％乙醇溶解并

4、稀释至刻度。供试品溶液的制备：取不同来源粉葛粉末（过三号筛）约1.0g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入30％乙醇100ml，称定重量，加热回流30min，放冷，再称定重量，用30％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液1ml置10ml容量瓶中，用30％乙醇定容，即得。检测波长的选择：取对照品溶液1.0ml置10ml的容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀，在200～800nm波长范围内测定葛根素的紫外吸收光谱，结果显示在250nm处有最大吸收。另取供试品溶液在200～800nm波长范围内测定紫外吸收光谱，结果也显示250nm处有最大吸收，所以选择250nm为检测波长。2.

5、1.2线性关系考察精密量取对照品溶液0.2，0.4，0.6，0.8，1.0ml，分别置10ml容量瓶中，并各加95％乙醇至1ml，再加蒸馏水至10ml，摇匀，以1.0ml95％的乙醇加蒸馏水至10ml的溶液为空白对照，于250nm测定吸光度。以葛根素含量为横坐标（X），吸光度为纵坐标(Y)，绘制标准曲线，得回归方程Y=75.45X－0.01，r=0.9999。结果显示，葛根素对照品在0.04～0.2mg内线性关系良好。2.1.3精密度试验取同一浓度的葛根素对照品溶液，重复测定5次，吸光度平均值为0.592，RSD为0.09％，表明仪器精密度良好。2.1.4稳定性试验

6、取同一样品溶液，在0，2，4，12，24h测定，吸光度平均值为0.690，RSD为0.22％，表明本品24h内具有良好的稳定性。2.1.5重复性试验取同一批次的粉葛药材6份，按供试品溶液制备方法制成样品测定，测得样品葛根素含量平均值为0.93％，RSD为0.49%，表明本法具有良好的重复性。2.1.6准确度试验称取6份已知葛根素含量的粉葛药材粉末1.00g，加入对照品约1.0mg，按供试品溶液制备方法制成样品，测得平均回收率为99.69%，RSD为1.8%，表明总黄酮回收率良好。2.1.7样品总黄酮含量测定取各来源的粉葛药材3份，精密称定1.0g，按供试品溶液制备方

7、法制成样品，依法测定。结果表明，广州市清平药材市场所售广东产粉葛总黄酮含量均较高，可达1.03％，平均质量优于广西产粉葛。见表1。2.2HPLC法测定不同来源粉葛中葛根素的含量2.2.1色谱条件色谱柱为kromasilC18色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)；柱温：30℃；流动相：甲醇－水(33：67)；检测波长250nm；流速：1.0ml·min-1；理论板数按葛根素计算不低于4000。见图1,.freelg，置25ml容量瓶中，加30%乙醇至刻度，摇匀，即得0.2mg/ml对照品储备液。供试品溶液的制备：取不同来源粉葛粉末（过3号筛）约0.8g，精密称