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时间:2018-11-22
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1、山绿茶不同炮制品中总黄酮的含量测定论文【关键词】山绿茶;,,总黄酮;,,芦丁;,,紫外分光光度法,,摘要:目的建立山绿茶不同炮制品的质量研究方法。方法以芦丁为对照品,采用紫外分光光度法测定山绿茶不同炮制品中总黄酮的含量。结果芦丁浓度在8.112~48.672(μg/ml)之间与吸光度值呈良好的线性关系,回归方程为C=85.2245A+0.6427,r=0.9990。平均回收率为101.24%,RSD=2.73%。结论该测定方法灵敏,简便,重现性好,可用于山绿茶不同炮制品的质量控制。关键词:山绿茶;总黄酮;芦丁;紫外分光光度法DeterminationofTo
2、talFlavonoidsinDifferentProcessedProductsofIlexhainanensisMerrAbstract:ObjectiveToestablishtheevidenceforqualityofdifferentprocessedproductsofIlexhainanensisMerr.MethodsRutinasthestandardandusingultravioletspectrophotometertodeterminethecontentoftotalflavonoidsinIlexhainanensisMerr
3、.ResultsThelinearrelateionshipofrutin8.112(μg/ml)to48.672(μg/ml),C=85.2245A+0.6427,r=0.9990.Theaveragerecoveryethodisaccurate,simpleandreproducible,andcanbeappliedtothequalitycontrolofthedifferentprocessedproductsofIlexhainanensisMerr.Keyg,置25ml量瓶中,加70%乙醇适量,置水浴上微热使溶解,放冷,加70%乙醇至刻度,摇
4、匀。精密量取10ml,置50ml量瓶中,加70%乙醇至刻度,摇匀,即得(每毫升含无水芦丁0.2028mg)。2.2检测波长的测定精密量取上述对照品溶液2ml于25ml量瓶中,加水至6ml,分别加5%亚硝酸钠溶液1ml,摇匀,静置6min,加10%硝酸铝溶液1ml,摇匀,静置6min,加氢氧化钠试液10ml,再加水至刻度,摇匀,放置15min。以相应试剂作空白,照分光光度法[3],在400~800nm测定吸收光谱图,其最大吸收波长为502nm[3]。光谱图见图1。图1芦丁对照品吸收光谱图(略)2.3标准曲线的制备精密吸取对照品溶液1.0,2.0,3.0,4.0
5、,5.0,6.0ml,分别置于25ml量瓶中,各加水至6ml,分别加5%亚硝酸钠溶液1ml,摇匀,静置6min,加10%硝酸铝溶液1ml,摇匀,静置6min,加氢氧化钠试液10ml,再加水至刻度,摇匀,放置15min,照分光光度法[3],在502nm波长处测定吸收度。以浓度(C,μg/ml)为纵坐标,吸收度(A)为横坐标绘制标准曲线,得回归方程为C=85.2245A+0.6427,r=0.9990。结果表明芦丁浓度8.112~48.672μg/ml之间与吸光度值呈良好的线性关系。标准曲线见图2。图2芦丁对照品标准曲线(略)2.4供试品溶液的制备取本品粗粉约0
6、.1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入70%乙醇25ml,称定重量,超声处理1h,放冷,再称定重量,用70%乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液2ml,置25ml量瓶中,照标准曲线制备项下方法,自“加水至6ml”起依法测定吸收度,用回归方程求出供试品溶液中总黄酮的含量(mg),计算,即得。2.5精密度实验取同一供试品溶液重复测定6次,平均吸收度为0.344,RSD为0.27%(n=6),表明精密度良好。2.6稳定性实验对同一份供试品每间隔6min测定吸光度,在30min内平均吸收度为0.302,RSD=1.63%(n=6),说明在30min内显
7、色基本稳定。2.7重复性实验取同一批药材,平行测定6次,平均含量为77.35mg/g,RSD为1.87%,表明重复性良好。结果见表1。表1重复性实验结果(略)2.8加样回收率实验取已测知含量的样品约0.05g,精密称定,分别加入一定量的芦丁对照品,照供试品溶液制备方法处理并测定含量。结果见表2。表2总黄酮回收率测定结果(略)2.9样品测定取药材粉末0.1g,精密称定,照供试品溶液的制备方法处理并测定。结果见表3。3讨论3.1在提取过程中,曾用醋酸乙酯-石油醚30~60℃(3∶1)混合溶液进行超声脱脂处理,发现总黄酮的含量较低,可能在脱脂过程中会提取去部分黄酮
8、类成分,后改用直接进行超声处理总黄酮的提取较完全。表
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