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时间:2018-11-16
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1、穿心莲内酯对不同分化胃癌细胞株的体外增殖的影响论文董建华叶再元李曙光陶厚权杨琼【摘要】[目的]明确穿心莲内酯对不同分化胃癌细胞株的体外增殖的影响。[方法]以不同浓度的穿心莲内酯处理低分化(MKN45)、中分化(SGC7901)和高分化(MKN28)胃腺癌细胞株,分别温育24h、48h、72h;采用噻唑蓝比色法检测各和穿心莲内酯对癌细胞的药物半数抑制浓度(IC50),比较穿心莲内酯对不同分化胃癌细胞株的体外增殖抑制作用的异同。[结果]穿心莲内酯对胃癌细胞株MKN45、SGC7901、MKN28的体外增殖均具有显著的抑制作用,并
2、且呈剂量效应和时间效应关系。低分化的MKN45细胞株对穿心莲内酯的敏感性明显高于高分化的MKN28细胞株和中分化的SGC7901细胞株。[结论]穿心莲内酯对不同分化程度的胃腺癌细胞株体外增殖抑制作用不同。【关键词】穿心莲内酯;分化程度;胃癌细胞株;敏感性;MTT法Abstract:[Objective]TodeterminethesensitivityofAndrographolideingastriccancercelllinesinvariousdegreesofdifferentiation.[Methods]Thre
3、egastriccancercelllinesincludingMKN45(1ooderatedegreedifferentiation)andMKN28(highdegreedifferentiation)inedbyMTTtest;putethedatatoarriveatinhibitionratio(IR)and50%inhibitingconcentration(IC50),makethesensitivitydisparityclearbyparethedata.[Results]Andrographolideh
4、adsignificantinhibitioneffectsontheproliferationofMKN45.freele—dependentanddose—dependentoresensitivitytochemotherapythanoderatelydifferentiatedSGC7901.[Conclusion]TheeffectofAndrographolideongastriccancercellsinvariousdegreesofdifferentiationethod穿心莲内酯(Andrographo
5、lide)是爵床科植物穿心莲(Andrographispaniculata(Burm.f.)中提取到的二帖内酯类化合物,分子式是C20H30O5,是中药穿心莲的重要有效成分之一。具有抗菌、抗炎、抗病毒、免疫调节、治疗脑血管疾病、保肝利胆等作用,并具有低毒性、价格便宜的特点。以往研究表明,穿心莲内酯对乳腺癌MCF7细胞、食管癌Ec9706细胞、结肠癌HCT8和HCTl16细胞、前列腺癌PC3等肿瘤细胞,均有体外抗肿瘤作用。穿心莲内酯能抑制多种肿瘤细胞系的增殖[1]。但对胃癌细胞的作用未见报道。本研究通过体外细胞培养采用
6、MTT法明确穿心莲内酯对高分化胃癌细胞株MKN28、中分化胃癌SGC7901、低化胃癌细胞株MKN45的体外增殖的影响,以期揭示穿心莲内酯对不同分化胃癌细胞的作用,为临床治疗胃癌用药提供实验依据。1实验材料1.1主要实验药品穿心莲内酯(中国药品生物制品检定所用二甲基亚砜(DMSO)溶解,配制成100mg/ml的溶液,-20℃保存备用),RPMI1640培养液(美国Gibco公司加入青霉素和链霉素,使其浓度分别为100U/ml和100μg/ml),胎牛血清(北京鼎国生物技术公司56℃灭活30min,-20℃保存备用),0.1
7、MPBS液,胰酶(美国Gibco公司),DMSO(无锡海硕生物有限公司),噻唑蓝(MTT,美国Genvieg/ml)。1.2主要实验仪器96孔培养板(德国Greiner公司),超净工作台(苏州苏净集团安泰公司),二氧化碳孵育箱(德国Thermo公司),自动酶标仪(瑞士Tecan公司)。1.3试验用细胞人高分化胃癌细胞株MKN28、中分化胃癌株SGC7901、低化胃癌细胞株MKN45,均由自上海交通大学消化外科实验中心惠赠。2实验方法2.1细胞培养将3种细胞用含有10%小牛血清的RPMI1640培养液,于37℃、5%CO2的培
8、养箱中培养,每2~3d传代1次,取对数生长期细胞用于实验。2.2实验分组实验分为穿心莲内酯实验组、5氟脲嘧啶(5FU)对照组、阴性对照组、DMSO对照组和空白对照组。其中穿心莲内酯实验组包括7.5μg/ml、15μg/ml、30μg/ml、60μg/ml、120μg/ml共5个浓度组,
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