hplc法测定骨质宁搽剂中盐酸小檗碱的含量

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1、HPLC法测定骨质宁搽剂中盐酸小檗碱的含量作者：徐世芳陈爱瑛姜丽霞【摘要】［目的］建立高效液相色谱法测定骨质宁搽剂中盐酸小檗碱(C20H18ClNO4)含量的方法。［方法］C18色谱柱，流动相为乙腈—50mmol·L-1NaH2PO4水溶液（磷酸调PH=2.5）（25∶75），流速1.0mL·min-1,室温,UV348nm检测。［结果］盐酸小檗碱在0.106～0.530μg（n=5）范围内线性关系良好（r=0.9999）；方法精密度RSD为0.7%（n=6）。4批样品盐酸小檗碱的含量分别为19.11、18.81、18.83、18

2、.92mg/100mg。［结论］方法专属性强、简便、准确；为该药提供了切实可行的质控方法。【关键词】骨质宁搽剂;盐酸小檗碱;含量测定;HPLC　　Abstract:［Objective］TodevelopanHPLCmethodforthedeterminationofberberinehydrochlorideinGuZheNingliniment.［Methods］ThechromatographicsystemconsistedofDimonsilC18columnandmobilephaseofacetonitrile—5

3、0mmol·L-1sodiumdihydrogenphosphate(adjustedPHto2.5L·min-1,andthedetective.［Results］Thecalibrationcurveethodpleg/100mg,respectively.［Conclusion］Themethodisselective,simpleandaccurate,andcouldbeusedforthequalitycontrolofthispreparation.　　KeyL；乙腈为色谱纯，水为重蒸水，其它试剂均为分析纯。　　2实

4、验方法　　2.1色谱条件及系统适用性试验　　色谱柱：DimonsilC18，5μm，4.6mm×150mm，室温；流动相：乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钠溶液（用磷酸调节pH至2.5）（25：75）；流速为1.0mL·min-1；理论板数以盐酸小檗碱计算为7000；主峰与前相邻峰的分离度为2.4；UV检测波长为348nm；对照品溶液进样10μL,供试品溶液进样5—10μL，外标法定量。　　2.2溶液的制备　　2.2.1对照品溶液的制备精密称取盐酸小檗碱对照品适量，用甲醇配制成浓度为200μg·mL-1的溶液，再用流动相稀释10倍

5、（1→10），配制成浓度为20μg·mL-1的溶液。　　2.2.2供试品溶液的制备精密量取本品2mL，置10mL量瓶中，加入流动相至刻度，摇匀，0.45μm微孔滤膜滤过，即得。　　3方法学考察　　3.1.1专属性按处方制备不含黄连的阴性样品，按拟定的方法处理样品并测定，在小檗碱出峰区未见干扰峰（见图1—A）。　　3.1.2线性关系及范围用甲醇准确配制每mL含盐酸小檗碱212μg的对照品溶液，再用流动稀释10倍（1→10），配制成浓度为21.2μg·mL-1的溶液，依次准确进样5、10、15、20、25μL，按上述色谱条件测定峰面积

6、,以峰面积对进样量（μg）作回归处理,得回归方程和相关系数：　　Y=2.1×103+2.955×106Xr=0.99999　　结果表明盐酸小檗碱在0.106～0.530μg范围内呈良好线性关系。　　3.1.3重复性试验取同批样品（批号041102）6份，分别依法处理、进样5μL测定，盐酸小檗碱峰面积的RSD为0.7%，示方法重复性良好。　　3.1.4仪器精密度及样品溶液的稳定性　　按上述色谱条件，精密吸取样品含量测定下对照品溶液10μL，重复进样5次，记录对照品峰面积积分值，RSD为0.3%。同时按拟定的方法，取样品（041102

7、）一份，于10小时内，每间隔2小时测定一次，峰面积×105依次为：5.72、5.78、5.79、5.72、5.79，平均值为5.76，RSD为0.6％，溶液稳定。　　3.1.5回收率试验　　采用加样回收。精密量取已测含量的供试品（041102）1mL于10mL量瓶中，加对照品溶液（0.212mg/mL）600μL，用流动相稀释至刻度，摇匀。共制取6份，依法测定，结果见表1。　　表1回收率测定结果（略）　　4样品测定结果　　按所拟定的方法测定了四个批号(041102、041219、041222、041225)的样品，平行取样2份，测

8、定，结果（mg/100mL）分别为：19.11、18.81、18.83、18.92，平均为18.9mg/100mL。对照和样品的HPLC图见图1—B和图1—C。　　图1阴性样品（A），对照品（B）与样品（C）HPLC图（略）　　1.盐酸小檗碱（be