mmp-9在胎盘早剥患者中的表达及其临床意义

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1、MMP-9在胎盘早剥患者中的表达及其临床意义哈尔滨市呼兰IX妇幼保健院150500摘要：目的探讨MMP-9（基质金属蛋白酶-9）在胎盘早剥患者中的表达及临床意义。方法选择胎盘早剥者82例作为观察组，根据胎盘早剥程度分为典型组（41例）和非典型组（41例），选择同期胎盘正常者40例作为对照组，用免疫组化法检测胎盘组织中MMP-9表达部位，采用蛋白免疫印迹法检测MMP-9水平。结果阳性染色细胞在所有产妇胎盘组织中均呈现，在胎盘合体滋养细胞的细胞质及细胞核中为主要表达，观察组阳性程度弱于对照组；对照组MMP-9水

2、平显著高于其他两组，同时不典型组MMP-9水平显著高于典型组，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论MMP-9通过对滋养细胞的侵袭力产生影响，参与胎盘早剥的发牛.、发展，可以作为胎盘早剥的临床预测指标。关键词：MMP-9；胎盘早剥；临床意义所谓胎盘早剥，即妊娠中晚期最常见的阴道出血原因，该病起病急，进展迅速，诊断及治疗不及时，引起的孕期并发症较严重。由于该病无法预料,及早发现孕妇胎盘早剥是产科一直以来面临的难题[1],笔者通过对该院收治的82例胎盘早剥者的胎盘组织进行MMP-9（基质金属蛋白酶）检测

3、，并与同期健康胎盘进行比较分析，以期为临床早期诊断胎盘早剥提供可靠依据。1资料与方法1.1一般资料选择我院2013年1月至2013年12月经阴道分娩及剖宫产术后确诊为胎盘早剥者82例，作为观察组，年龄23-34岁，平均年龄29.3±2.1；平均孕龄38.6±1.2周;根据胎盘早剥程度，分为非典型组（不典型胎盘早剥）和典型组（典型胎盘早剥），每组41例；同时选择我院同期经阴道或剖宫产术分娩的正常胎盘者40例作为对照组，年龄22-35岁，平均年龄28.9±2.2岁；平均

4、孕龄38.3±l.l周;所有产妇均为初产妇，无原发性心脏病、高血压、胎盘早剥、糖尿病史；3组在年龄、孕龄等一般资料比较，差异均无统计学意义，(P>；0.05)o1.2方法1.2.1标本采集所奋受试者均于胎盘娩出30min内，于远离脐带附着部位，避开坏死及钙化区域，取胎盘母体组织2块；1块PBS漂洗并固定；另1块放入火酶冻存管后快速置入液氮中，过夜后，放入冰箱保存(-80°C)o1.2.2MMP-9表达部位检测运用免疫组化(SP)法检测，试剂盒由北京中杉金桥公司提供，严格按照说明书操作；阳性

5、判断：胎盘组织细胞的细胞质和(或)细胞核呈现棕褐色。1.2.3MMP-9表达水平检测运用蛋白免疫印迹法检测：取胎盘组织适量于液氮中研末，加入细胞裂解液ImL离心后取上清液。MMP-9浓度采用二辛可宁酸法检测，上清液煮沸后置于-80°C冰箱。5%浓缩胶电泳，40ug总蛋白上样量并转移至聚偏二氟乙烯膜上，放入5%脱脂牛奶枸橼酸盐缓冲液中，37°C密封1.5h，加入羊抗人MMP-9抗体、兔抗人β-actin单克隆抗体，4°C孵育并过夜，TBST洗膜3次；加入兔抗羊免疫球蛋白G二抗并37°C孵育60min

6、,TBST洗膜3次，加入显色液，暗室显影3次;运用发光成像仪检测蛋白印迹条带灰度，MMP-9水平以MMP-9与β-actin灰度值的比值为参考。1.3统计学处理应用SPSS19.0统计软件分析，计数资料的比较采用x2检验，计量资料采用x±s表示，组间比较采用t检验，(P<0.05)为差异有统计学意义。2结果2.1MMP-9表达部位阳性染色细胞在所奋产妇胎盘组织均呈现，在胎盘合体滋养细胞的细胞质及细胞核中为主要表达，少量间质细胞及胎盘血管内皮细胞的细胞核内也可表达；观察组阳性程度

7、弱于对照组。2.2MMP-9表达水平如下表所示，对照组MMP-9表达水平为(0.93±0.06)，显著高于其他两组，差异有统计学意义(P<0.05);冋时不典型组为(0.69±0.03)显著高于典型组(0.33±0.05),差异有统计学意义(P<0.05)o3讨论胎盘早剥治疗不及时对母婴生命带来严重威胁，而处理不及吋的原因是没有早期诊断造成的，由此可见早期诊断胎盘早剥的意义重大。0前临床上往往依靠B超进行诊断，漏诊误治较高，特别是胎盘附着于子宫后壁，早期

8、症状不明显，处理的最好时机容易被错过，对母婴的伤害不可估量［2】。基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在着床及胎盘的发育中，起着非常关键的作用［3］。巨噬细胞、恶性肿瘤细胞、毛细血管内皮细胞、中性粒细胞、滋养层细胞、正常细胞均可分泌MMP-9。子宫内膜受到滋养细胞侵袭吋，必须穿透母体的细胞基底膜(BM)并对细胞外基质(ECM)发生降解。妊娠吋母体的绒毛组织通过分泌MMP-9对子宫内膜BM进行分解，达到植入胚泡、形成胎