百合花提取物对ache活性及抗氧化活性影响研究

百合花提取物对ache活性及抗氧化活性影响研究

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时间:2018-11-15

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1、百合花提取物对AChE活性及抗氧化活性影响研究李 潇武汉大学药学院湖北省武汉市430072【摘 要】目的:观察百合花提取物对AChE活性及抗氧化活性的影响;方法:利用抗AChE活性试验和DPPH清除试验观察百合花提取物对AChE活性及抗氧化活性影响;结果:三种百合花提取物均有一定的抗AChE作用和抗氧化作用;结论:百合花提取物的抗AChE作用及抗氧化作用可为抗老年痴呆提供新线索。.jyqkg/ml和100mg/ml百合花醇提物;50mg/ml和100mg/ml百合花水提物50mg/ml和100mg/ml百合花石油醚提取物;0.01mg/ml阳性对照加兰他敏;0.2、0.4

2、、0.8mg/ml阳性对照还原性VC。1.2方法1.2.1抗AChE活性试验(1)根据下表对1.5mlEP管进行编号。做1-12号受试物1-蒸馏水(空白对照)2-无水乙醇3、50mg/ml百合花水提物4-100mg/ml百合花水提物5、50mg/ml百合花醇提物6、100mg/ml百合花醇提物7、50mg/ml百合花石油醚提取物8-100mg/ml百合花石油醚提取物9、0.2mg/ml还原性VC(阳性)10、0.4mg/ml还原性VC11、0.8mg/ml还原性VC12、0.01mg/ml加兰他敏(阳性)1.2.2按下列步骤加样、温浴、调零、测定、记录(1)将12支EP管

3、进行编号为1-12。(2)将200μlBufferB、400μlDTNB、200μlACTI分别加入到各个管中,再将不同编号EP管加入相应编号的受试药物200μl。(3)温浴20min。(4)调零。取温浴样品450μl,加BufferB100μl摇匀,在紫外分光光度计450nm处进行调零。(5)测定。取温浴样品450μl,加AChE100μl摇匀,在450nm处进行测定,记录0s、15s、30s、45s、60s的OD值(6)清洗,重复(4)(5)步。1.2.3计算(1)分别计算各样品的ΔOD值:ΔOD0-15s、ΔOD0-30s、ΔOD0-45s、ΔOD0-60s(2)取

4、在线性范围内的ΔOD值计算抑制率%1.3体外抗氧化试验——DPPH清除实验(1)关于DPPHDPPH是一种很稳定的氮中心的自由基,在517nm处有一强吸收,其醇溶液呈紫色的特性。当有氧自由基清除剂存在时,由于与其单电子配对而使其吸收逐渐消失,其褪色程度与其接受的电子数量成定量关系,因而可用分光光度计进行快速的定量分析。自由基清除能力的表示:清除率越大表明抗氧化能力越强。2步骤取96孔板,根据以下设定加样1-12号受试物,30min避光反应,517nm测定吸光度值。第一行1-12格样品:50μl受试物+150μlDPPH第二行1-12格空白:50μl受试物+150μl乙醇第

5、三行1-12格对照:50μl溶剂+150μlDPPH3结论(1)百合花提取物都对AChE具有抑制作用,其中百合花醇提物的抑制作用最强,石油醚提取物次之,水提物相对较弱,并且高浓度提取物均比低浓度提取物有更好的AChE抑制作用。(2)百合花水提物浓度与AChE抑制率成正比,醇提物高浓度比低浓度对AChE抑制率稍高,而石油醚提取物高浓度与低浓度的AChE抑制作用相差不大。且三种提取物对AChE的抑制率均比阳性药加兰他敏要高。(3)三种百合花提取物对DPPH均有一定的清除效果,清除率由高到低依次是醇提物、水提物、石油醚提取物;并且高浓度提取物均比低浓度有更高的清除率;我们还发现

6、,还原VC的清除率比较强,但是100mg/ml百合花醇提物的清除率甚至超过了0.8mg/ml的阳性药还原VC。4讨论百合花提取物不仅对AChE有抑制作用,而且抗氧化作用比还原性VC还强。百合花的醇提物比水提物和石油醚提取物抗氧化和抗AChE的效果都要好,可见不同的提取溶剂会对百合花的抗AChE与抗氧化作用产生影响。因此百合花的药理作用可为老年痴呆提供新的治疗线索。今后可以着重研究百合花醇提物中真正起作用的化学物质和其作用靶点以及药物构效关系,药代动力学和药理毒理学,判断百合花醇提物能否开发成新一代抗老年痴呆药物,从而为广大患者带来福音,减轻病人与家属的痛苦。(通讯:丁虹)

7、..

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