复方隔山消颗粒对慢性萎缩性胃炎大鼠p53及pcn

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1、复方隔山消颗粒对慢性萎缩性胃炎大鼠p53及PCN【摘要】目的观察复方隔山消颗粒对实验性慢性萎缩性胃炎大鼠p53基因及增生细胞核抗原(PA)表达的影响。方法采用热盐水灌胃方法制作慢性萎缩性胃炎动物模型,以不同剂量的复方隔山消颗粒进行治疗后,用免疫组化法检测大鼠胃黏膜p53及PA蛋白的表达。结果经过热盐水灌胃造模后,大鼠胃黏膜腺体萎缩。以复方隔山消颗粒治疗后,大鼠胃黏膜腺体萎缩明显减轻,胃黏膜细胞p53阳性表达率和PA标记指数显著降低。结论复方隔山消颗粒治疗慢性萎缩性胃炎的机制可能是通过抑制突变型p53基因及PA蛋白的表达,从而恢复细胞增殖与凋亡的平衡来实现的。【关键词】复方隔山消颗粒;慢性萎缩性

2、胃炎;p53;PAEffectsofpoundgeshanxiaogranulesonp53andPAexpressioninchronicatrophicgastritisofrats【Abstract】ObjectiveToobservetheeffectsofpoundGeshanxiaoGranulesonp53geneandproliferatingcellnuclearantigen(PA)expressioninexperimentalchronicatrophicgastritisofrats.Methodsethodtoproduceratexperimentalchroni

3、catrophicgastritismodel,aftertreatmentucousmembranep53andPAmunohistochemistrymethod.ResultsAftertheinstillationofhotSalinetheglandofratgastricmucousmembraneentofpoundGeshanxiaoGranulesatrophydecreaseclearly,therateofp53positiveexpressionandPAlabelingindexingastricmucousmembranecelldecreasesignifican

4、tly.ConclusionThemechanismsofthetherapyofpoundGeshanxiaoGranulesonchronicatrophicgastritismayinvolveinhibitingtheexpressionofmutantp53geneandPAprotein.【Keyl,共12w。实验开始,先处死5只正常对照组大鼠,并留取胃大体标本作为对照,以后各组每2w处死2只大鼠,取胃标本进行病理检查,以观察胃黏膜萎缩情况,判断造模是否成功。从第13w开始灌服药物治疗,至第24w末结束。其中隔山消高、中、低剂量组分别予复方隔山消颗粒相当于原生药5g/(kg.d)、

5、2.5g/(kg.d)和1.25g/(kg.d)灌胃,正常对照组和模型对照组予等量蒸馏水灌胃。1.4检测指标及方法各组实验结束将大鼠断头处死后剖腹取全胃,沿大弯剖开,生理盐水漂洗摊平作大体观察,沿胃小弯条状取材。胃黏膜标本经10%甲醛液固定,石蜡包埋切片。免疫组化采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶连接法(S-P),按试剂盒内说明书操作。阳性对照为已知阳性组织切片在同一条件下反应,阴性对照以正常兔血清代替第一抗体。结果判断标准较注:与模型对照组比较,1)P<0.05,2)P<0.013讨论  正常胃黏膜细胞的增生与凋亡维持着细胞总数的平衡,这种平衡的失调在CAG到胃癌的发展过程中起重要作用。细胞凋

6、亡受众多基因调控,其中p53基因是与人类肿瘤发生相关性最高的突变基因,位于17号染色体短臂上,对细胞的生长有重要的调节作用。野生型p53基因在细胞损伤修复过程中,监视着基因组DNA的完整性。当细胞受到射线或某些药物作用而发生DNA损伤时,p53基因所编码的蛋白能使细胞分裂停止在G1期,待细胞充分修复DNA的损伤后,再进入细胞周期。倘若损伤不能修复,野生型p53基因就启动细胞的凋亡过程而引导细胞的程序性死亡,阻止具有癌变倾向的突变细胞出现。但野生型p53基因很容易发生突变,转变成突变型p53基因。当p53基因发生突变时就会丧失其调节功能,导致p53介导的细胞周期调节失控,DNA分子程序紊乱,发生

7、遗传不稳定性及多倍体,导致细胞恶性增生[4]。野生型p53基因表达的蛋白半衰期甚短,一般检测方法难以检出,而当基因发生突变时,其表达的蛋白质构型发生改变,半衰期延长,因此免疫组化测得的p53蛋白为突变型蛋白[5]。正常胃黏膜细胞中无突变型p53表达,但在慢性萎缩性胃炎向肠上皮化生过程中,及在异型增生阶段内其阳性表达率增至60%[6]。PA又称周期素,是真核细胞DNA合成所必需的一种核蛋白,其合成与

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