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1、电针对脑缺血再灌注大鼠缺血区皮质神经细胞凋亡和NF.freeliaareaofcerebralischemia-reperfusionratsandtheneuronapoptosisincortexbyEAonshuigouandneiguan(left)point,andstudytheprotectiveeffectanditsmechanismofEAonthecerebralischemia.MethodCerebralischemiareperfusionmodeliddlecerebralarteryfo
2、r30minandthenremoval,thenEAshuigouandneiguanleftpointsofexperimentalrats.Neuronalapoptosisincortexinaldeoxynucleotidyltransferase-mediateddUTP-biotinnickendlabeling(TUNEL),NF-κBproteinintheischemiacortexmunohistochemistry.ResultTheneuronalapoptosisandtheexpressi
3、onofNF-κBproteinintheischemiacortexiasideofEAtreatmentgroupsodelgroup.ConclusionEAcanlightentheneuronsinjuryaftercerebralischemia-reperfusionbydecreasingtheexpressionofNF-κBproteinandtheneuronalapoptosisintheischemiacortex.Keyia-reperfusion；electroacupuncture；NF
4、-κB；ratNF-κB(nuclearfactor-kappaB)是一种核转录因子,具有传递细胞核内外信息的功能,.freelm,30min后,抽取栓线再灌注,在手术结束麻醉清醒后,观察神经症状,按照Bedcrson神经缺损体征评分标准4,选择符合一级以上者为实验观察对象。1.3针刺治疗及模型处理空白对照组：不作任何处理,直接取标本。模型组：造模成功后按要求喂养。电针组：于造模麻醉清醒后电针治疗1次,其中12h组于取材前再电针治疗1次,24、72h组每12h电针治疗1次。按照文献5方法取水沟、内关,水沟与左侧内关接上
5、海产G6805治疗仪,连续波,频率2Hz,强度约为1.5mA,右侧内关留针,时间持续30min。假手术组：除不插入线栓外,其余手术步骤同模型组。于造模完毕后12、24、72h分别取材。1.4标本的采集和制备各组大鼠按照上述造模方法进行相应处理后以0.9%水合氯醛足量麻醉,先后以30℃生理盐水和4%多聚甲醛灌注后,断头取脑,在视交叉前后约2mm将脑冠状切开,留取中间部分,置于4℃4%多聚甲醛固定液(不超过24h)；将固定后的脑组织石蜡包埋,石蜡切片机连续冠状切片,片厚4μm,每隔10张切1张,在温水中充分展开,贴片。每分
6、组织取6张备用。1.5原位细胞凋亡检测①切片脱蜡至水。②将波片置入抗原修复盒内,加0.1mol/LpH为7的枸橼酸缓冲液,使用750CAO)3h后,通过免疫组化和SA检测到NF-κB结合活性升高。高氏等1运用原位杂交法检测大鼠脑缺血再灌注后皮质及纹状体NF-κB-P65mRNA的表达于缺血再灌注后2h～3d明显升高。本研究显示,脑缺血再灌注12h组可见较多的神经凋亡细胞,24、72h后缺血侧大鼠皮质中均可见大量凋亡细胞,而NF-κB蛋白表达与神经凋亡细胞时间变化规律基本相同,说明了脑缺血再灌注损伤后的神经细胞凋亡与NF
7、-κB-P65蛋白表达有密切关系。本研究结果显示,模型组大鼠缺血后脑组织皮层神经元NF-κB-P65核反应阳性细胞表达较正常组及假手术组明显增加,在12h组NF-κB核反应阳性细胞的表达即增加,在24h核反应阳性细胞数明显升高,72h亦保持较高的水平。电针治疗后各时段大鼠缺血侧皮质区也见较多NF-κB核反应阳性细胞表达,与模型组相比,NF-κB核反应阳性细胞表达的量明显减少；同时电针治疗后大脑皮质缺血区神经细胞凋亡率也明显下降。提示电针抗缺血性脑损伤的机制之一可能是通过减少NF-κB核反应的激活,抑制NF-κB-P65
8、的活性,来减少缺血区皮质神经元凋亡的。【
