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1、电针对脑缺血再灌注大鼠缺血区皮质神经细胞凋亡和NF-κB表达的影响作者：丁德光,李昊,孙国杰,王亚文,宋爱群【摘要】目的通过观察电针对脑缺血再灌注大鼠缺血区皮质神经细胞凋亡和NF-κB蛋白表达的影响,研究电针对缺血性脑损伤的保护机制。方法采用大脑中动脉线栓法制作模型,电针大鼠的水沟、内关,运用TUNEL法观察各组大鼠皮质神经细胞凋亡,免疫组化法观察各组大鼠缺血区皮质NF-κB蛋白表达。结果电针组缺血皮质中神经细胞凋亡和NF-κB蛋白表达与模型组相比均降低。结论电针通过抑制NF-κB蛋白表达减少神经细胞凋亡来对抗缺血
2、再灌注脑组织神经损伤。【关键词】脑缺血再灌注；电针；NF-κB；大鼠 Abstract：ObjectiveToobservetheeffectofelectroacupuncture(EA)ontheexpressionofNF-κBincerebralischemiaareaofcerebralischemia-reperfusionratsandtheneuronapoptosisincortexbyEAonshuigouandneiguan(left)point,andstudytheprotectivee
3、ffectanditsmechanismofEAonthecerebralischemia.MethodCerebralischemiareperfusionmodelwasestablishedbyocclusionofthemiddlecerebralarteryfor30minandthenremoval,thenEAshuigouandneiguanleft9pointsofexperimentalrats.Neuronalapoptosisincortexwasobservedbytheterminald
4、eoxynucleotidyltransferase-mediateddUTP-biotinnickendlabeling(TUNEL),NF-κBproteinintheischemiacortexwasdetectedbyimmunohistochemistry.ResultTheneuronalapoptosisandtheexpressionofNF-κBproteinintheischemiacortexwasdetededofischemiasideofEAtreatmentgroupswerelowe
5、rcomparingwithmodelgroup.ConclusionEAcanlightentheneuronsinjuryaftercerebralischemia-reperfusionbydecreasingtheexpressionofNF-κBproteinandtheneuronalapoptosisintheischemiacortex. Keywords：cerebralischemia-reperfusion；electroacupuncture；NF-κB；rat NF-κB(nuclea
6、rfactor-kappaB)是一种核转录因子,具有传递细胞核内外信息的功能,在免疫应激反应、炎症和细胞凋亡等方面具有重要的作用,中枢神经系统发生某些病理改变时,可表现特异的活化。既往的研究证实,NF-κB参与了脑缺血再灌注损伤的过程[1],并在缺血性损伤导致的神经细胞凋亡中起着重要的作用[2]。本实验即是通过观察模型组及治疗组大鼠神经细胞凋亡和皮质神经细胞NF-κB核反应阳性细胞数的变化,来研究电针抗脑缺血再灌注大鼠脑组织损伤的机制。9 1材料和方法 1.1主要试剂及仪器原位细胞凋亡检测TUNEL试剂盒、兔抗
7、大鼠NF-κB-P65单克隆抗体、羊抗兔SABC试剂盒、DAB显色试剂,北京中山生物科技有限公司产品；4%多聚甲醛,武汉天源生物科技有限公司产品。HPIAS-1000计算机高清晰彩色图像分析仪,华中科技大学同济医学院千屏影像公司生产；石蜡切片机,LeicaRM2015,德国产；恒温培养仪(PYX-DHS-40,上海跃进医疗器械厂)。 1.2动物分组及模型制备 健康成年清洁级SD大鼠,雌雄各半,共84只(华中科技大学同济医学院实验动物中心提供),体重180～220g。随机分为空白对照组6只,假手术组、模型组、电针
8、组各18只(每组分为手术后12、24、72h共3时段,每时段6只),另24只备用。模型采用Zea-longa方法并稍加改进[3],栓线插入途径：颈外动脉→颈总动脉→颈内动脉→大脑中动脉(均为右侧),深度约17mm,30min后,抽取栓线再灌注,在手术结束麻醉清醒后,观察神经症状,按照Bedcrson神经缺损体征评分标准[4],选择符合一级以上者为实验观察对象
