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《vegf 936c-t基因多态性与进展性卒中相关》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、VEGF936C/T基因多态性与进展性卒中相关【摘要】目的探讨VEGF936C/T多态性与进展性卒中的相关性。方法经临床确诊的脑梗死患者200例，分成普通脑梗死组134例和进展性卒中组66例，另选年龄、性别相匹配的健康对照组100例。应用RFLP方法对所有受检者的VEGF基因型进行鉴定；分析VEGF936C/T基因多态性与进展性卒中的相关性。结果进展性卒中组936T等位基因的携带频率高于健康对照组，VEGF936T与进展性卒中有相关性（OR：1.882；95%可信区间1.269～2.789）；而普通脑梗死组936T等位基因的携带频率与健康对照组差异无统计学意义。结论携带936
2、T等位基因可增加患者脑梗死进展的风险性，而936CC可降低脑梗死进展的风险性。【关键词】进展性卒中VEGF936C/T单核苷酸多态性Correlativestudyon936C/Tgenepolymorphismofvascularendothelialgroorphismofvascularendothelialgroethodofrestrictivefragmentlengthpolymorphism（RFLP）,theVEGFgenotypesof66strokeinprogressionpatients,134pletedstrokepatientsand100he
3、althycontrolsubjectsorphismandstrokeinprogressionilarorphisms进展性卒中（strokeinprogression,SIP）是指卒中发病后神经功能缺失症状在48h内逐渐进展或呈阶梯式加重。其发病率为卒中患者的30%，致残率和致死率较一般卒中高，是影响病人预后的重要原因之一，也是脑血管病治疗中的难点。目前，已经发现的危险因素有高血压病、糖尿病、感染、人疱疹病毒感染和脑血管狭窄等。尽管我们对以上危险因素进行了积极的防治，仍有一部分患者会进展。说明进展性卒中的病因仍没有完全阐明。遗传、多基因、多态性这三个方面是进展性卒中研究
4、的热点。应用单核苷酸多态性进行遗传性相关性研究，可以为脑卒中进展的危险性提供预示作用。血管内皮生长因子（vascularendothelialgroarker购自Takara公司；NIaⅢ限制性内切酶购自NEB；VEGF引物合成由美国ABI公司完成。1.3方法用RFLP法鉴定VEGF的基因型。抽取每位受检者空腹静脉血3ml,按照常规方法从白细胞中提取基因组DNA，4℃保存。PCR引物参照文献［2］设计并合成，正向引物：5’-AAGGAAGAGGAGACTCTGCGC-3’，反向引物：5’-TATGTGGGTGGGTGTGTCTACAG-3’。PCR反应体系50μl,包括正向反
5、向引物各1μl、dNTP4μl、模板DNA8μl、Taq酶1μl、ddH2O30μl、loddingbuffer5μl。PCR反应条件：95℃预变性4min、95℃变性30s、60℃退火45s、72℃延伸45s、30个循环后、72℃再延伸5min。产物用2%琼脂糖凝胶电泳鉴定，为198bp。PCR产物用限制性内切酶NIaⅢ（NewEnglandBiolabs）5u于37℃消化3h后，再经4%琼脂糖凝胶电泳鉴定VEGF基因型。1.4统计学方法所有数据应用windowsSPSS13.0统计软件进行分析。Hardy-Weinberg平衡和计数资料用χ2检验；通过Logistic回归
6、筛选进展性卒中的危险因素，优势比（oddsratio,OR）用来衡量卒中进展的风险性。P＜0.05表示差异有统计学意义。2结果用RFLP法鉴定VEGF的基因型，其电泳结果见图1。VEGF936C不被分解（198bp）,而VEGF936T被分解为两段（分别为114bp和84bp）。糖尿病、高血压病、感染、脑血管狭窄和VEGF936T携带者均是进展性卒中的危险因素。病例组和对照组的基因频率分布均符合Hardy-S,FerraraN,OciL,etal.Vascularendothelialgrominogenactivatorsandplasminogenactivatorinh
7、ibitor-1inmicrovascularendothelialcells.BiochemBiophysResmun,1991,181（2）:902-906.6YangZJ,BaoH,etal.Roleofvascularendothelialgroageandrepairinratbrainfolloia.JNeurosciRev,2002,70（2）:140-149.7AlonT,HemoI,ItinA,etal.Vascularendothelialgroedretinalvasselsand
