果蔬维生素c含量测定及其分析

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1、实验果蔬维生素C含量测定及其分析【课前预习】1．为了测得准确的维生素C含量，实验过程中都应注意哪些操作步骤？为什么？2．试简述维生素C的生理意义。【目的要求】 要求学生在已掌握生物化学基础知识、基本理论和基本实验技能的基础上，在教师指导下，根据实验室条件，完成选题、设计实验、实验准备、实施实验和实验论文撰写等全过程。培养动手能力，分析解决问题的能力和创新思维。【基本原理】维生素C是人类营养中最重要的维生素之一，缺少它时会产生坏血病，因此又称为抗坏血酸（ascorbicacid）。它对物质代谢的调节具有重要的作用。近年来，

2、发现它还有增强机体对肿瘤的抵抗力，并具有化学致癌物的阻断作用。维生素C主要存在于新鲜水果及蔬菜中。水果中以猕猴桃含量最多，在柠檬、桔子和橙子中含量也非常丰富；蔬菜以辣椒中的含量最丰富，在番茄、甘蓝、萝卜、青菜中含量也十分丰富，野生植物以刺梨中的含量最丰富，每100克中含2800毫克，有“维生素C王”之称。维生素C为无色晶体，味酸，溶于水及乙醇，不耐热，在碱性溶液中极不稳定，日光照射后易被氧化破坏，有微量铜、铁等重金属离子存在时更易氧化分解，干燥条件下较为稳定。故维生素C制剂应放在干燥、低温和避光处保存；在烹调蔬菜时，不宜

3、烧煮过度并应避免接触碱和铜器。维生素C具有很强的还原性。它可分为还原性和脱氢型。还原型抗坏血酸能还原染料2,6-二氯酚靛酚（DCPIP），本身则氧化为脱氢型。在酸性溶液中，2,6-二氯酚靛酚呈红色，还原后变为无色。因此，当用此染料滴定含有维生素C的酸性溶液时，维生素C尚未全部被氧化前，则滴下的染料立即被还原成无色。一旦溶液中的维生素C已全部被氧化时，则滴下的染料立即使溶液变成粉红色。所以，当溶液从无色变成微红色时即表示溶液中的维生素C刚刚全部被氧化，此时即为滴定终点。如无其它杂质干扰，样品提取液所还原的标准染料量与样品中

4、所含还原型抗坏血酸量成正比。【实验用品】 1.试剂2%草酸溶液:草酸2g溶于100mL蒸馏水中。1%草酸溶液:草酸1g溶于100mL蒸馏水中。标准抗坏血酸溶液（1mg/mL）:准确称取100mg纯抗坏血酸（应为洁白色，如变为黄色则不能用）溶于1%草酸溶液中，并稀释至100mL，贮于棕色瓶中，冷藏。最好临用前配制。0.1%2,6-二氯酚靛酚溶液:250mg2,6-二氯酚靛酚溶于150mL含有52mgNaHCO3的热水中，冷却后加水稀释至250mL，贮于棕色瓶中冷藏（4℃）约可保存一周。每次临用时，以标准抗坏血酸溶液标定。标

5、准液滴定:准确吸取标准抗坏血酸溶液1mL置100mL锥形瓶中，加9mL1%草酸，用微量滴定管以0.1%2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至淡红色，并保持15s不褪色，即达终点。由所用染料的体积计算出1mL染料相当于多少毫克抗坏血酸（取10mL1%草酸作空白对照，按以上方法滴定）。2.材料材料自选。3.器材锥形瓶100mL(2);吸量管10mL(1);容量瓶100mL(1)，250mL(1);微量滴定管5mL(1)；研钵；漏斗；纱布。【方法步骤】1.提取水洗干净整株新鲜蔬菜或整个新鲜水果，用纱布或吸水纸吸干表面水分。然后称取20g

6、，加入20mL2%草酸，用研钵研磨，四层纱布过滤，滤液备用。纱布可用少量2%草酸洗几次，合并滤液，滤液总体积定容至50mL。2.样品滴定准确吸取滤液两份，每份10mL,分别放入2个锥形瓶内，滴定方法同前。另取10mL1%草酸作空白对照滴定。【实验结果】式中：VA为滴定样品所耗用的染料的平均毫升数；VB为滴定空白对照所耗用的染料的平均毫升数；C为样品提取液的总毫升数；D为滴定时所取的样品提取液毫升数；T为1mL染料能氧化抗坏血酸毫克数（由操作二计算出）；W为待测样品的重量（g）。【注意事项】(1)某些水果、蔬菜（如橘子、西

7、红柿等）浆状物泡沫太多，可加数滴丁醇或辛醇。(2)整个操作过程要迅速，防止还原型抗坏血酸被氧化。滴定过程一般不超过2min。滴定所用的染料不应小于1mL或多于4mL，如果样品含维生素C太高或太低时，可酌情增减样液用量或改变提取液稀释度。(3)提取的浆状物如不易过滤，亦可离心，留取上清液进行滴定。【实验报告】总结实验结果，分析评价实验结果。