不同预后尖锐湿疣组织中ifnγ和il4蛋白的表达

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1、不同预后尖锐湿疣组织中IFNγ和IL4蛋白的表达【摘要】目的：研究CA组织中干扰素γ（IFNγ）和白介素4(IL4)蛋白的表达情况并探讨其与尖锐湿疣复发和消退的关系.方法：以12周内皮损有无复发作为标准分为复发组(22例)和未复发组（14例），以免疫组化SP法检测CA患者皮损中IFNγ和IL4蛋白的表达.并比较两组IFNγ和IL4蛋白的表达情况.结果：复发组中IL4蛋白阳性率（81.2%）高于未复发组中IL4蛋白的表达（50%）（P<0.05)；未复发组中IFNγ蛋白的阳性率（50.0%）高于复发

2、组中IFNγ蛋白的阳性率（31.8%）（P<0.01）.复发组IL4蛋白表达程度积分(2.32±1.13)虽高于未复发组(1.57±1.45)，但其差别无统计学意义（P＞0.05）；而在未复发组中IFNγ蛋白表达程度积分（2.86±1.10）高于复发组中的表达（0.96±1.05）（P<0.01）.结论：CA皮损局部不同IL4蛋白表达差异对其预后无明显影响,IFNγ表达增高可能有利于CA的消退.【关键词】尖锐湿疣；干扰素γ；白介素40引言尖锐湿疣（CA）是一种常见的性传播疾病，20~24岁人群中年发病率

3、达1.2％［1-2］，治疗后复发率较高，而临床上也能将看到部分患者皮损可自行消退［3］，提示机体不同的免疫状态对CA的发生和复发有一定的影响.因此研究CA的复发和消退机制对其临床治疗具有重要意义.有关HPV的免疫学研究发现，细胞免疫对于病毒的清除起主要作用.国内外多项研究也发现CA患者外周血中Th2细胞因子表达明显升高，Th1型细胞因子表达下降［4-5］，而对CA皮损局部免疫状态研究较少.我们用SP免疫组化法研究IFNγ和IL4蛋白在不同预后CA患者皮损局部的表达情况，以探讨其与CA复发和消退的关系.1对象和方法1.1对

4、象选择200301/03在我科首次就诊的CA患者36（男21，女15）例：年龄21~41（28.2±4.5）岁.二氧化碳激光治疗前用手术刀切取CA患者的皮损保存，根据其治疗后随访12厚切片，贴附于经多聚赖氨酸处理过的载玻片上备用.免疫组化SP试剂盒购自迈新生物技术公司；小鼠抗人IFNγ,IL4单克隆抗体购自SANTACRUZ公司.病理切片常规脱蜡至水，滴1滴30mL/L过氧化氢溶液，室温下阻断10min，蒸馏水冲洗2min×3次，微波炉内92~98℃保持10min进行抗原修复，PBS冲洗5min×3次，非免疫动物血清室

5、温下封闭15min，滴加IFNγ或IL4单克隆抗体，室温孵育60min或4℃过夜，PBS冲洗5min×3次，加生物素标记的二抗，室温下孵育40~60min，PBS冲洗5min×3次,加链霉素抗生物素蛋白过氧化物酶溶液，室温下孵育30~60min,PBS冲洗5min×3次,DAB显色液显色.阴性对照以双蒸水代替一抗作为质控标准.1.3结果判定标准根据Shimizu法改良而成，DAB染色阳性细胞染成棕黄色.着色范围以百分率记分：≤1%为0，2%～20%为1，21%～50%为2，≥51%为3；着色强度依据深浅记分：无着色为0

6、，浅着为1，深着色为2.上述两项相加为着色程度积分：≤1.9为阴性(-)，2～2.9为弱阳性(+)，3～3.9为阳性().≥4为强阳性().统计学处理：组间表达阳性率比较采用精确概率法（FishersExactTest）进行检验；表达程度积分值比较采用t检验.P<0.05为有统计学意义.2结果健康对照皮肤中IFNγ和IL4蛋白呈阴性表达；CA患者皮损可见IFNγ和IL4蛋白表达，主要表达于真皮浅层淋巴样细胞周围.复发组中有18/22（81.2%）例表达IL4蛋白，未复发组中有7/14（50.0%）例表达

7、IL4蛋白，复发组IL4蛋白表达率高于未复发组（P<0.05,图1)；复发组IL4蛋白表达程度积分(2.32±1.13)也高于未复发组(1.57±1.45),但其差别无统计学意义（P>0.05）；复发组中有7/22（31.8%）例表达IFNγ蛋白，未复发组中有7/14（50.0%）例表达IFNγ蛋白，未复发组IFNγ蛋白的表达率高于复发组（P<0.01,图2），未复发组IFNγ蛋白表达程度积分（2.86±1.10）也高于复发组（0.96±1.05）（P<0.01）.3讨论研究发现，CA在

8、治疗后3mo有25％到67％可能复发［1］，多数有安慰剂对照的研究表明，有少量的CA却在发病后数月即使未经治疗也可自行消退［3］，两种现象形成鲜明的对照提示不同患者免疫状态的个体差异可能影响了CA的预后.目前对CA患者全身性免疫功能的研究较多，发现CA患者外周血的IL2,IL12,IF