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时间:2018-11-11
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1、HBV感染的免疫学诊断HBV表面抗原(HBsAg)及HBV表面抗体(anti-HBs):HBsAg是病毒外膜的主要组成蛋白,一直是HBV感染最重要的血清学检测指标,也是最直接的病原学证椐之一。HBsAg阳性通常意味着HBV现症感染的存在,如持续阳性吋间〉6个月,则提示进展为慢性HBV感染。血清HBsAg检测历经反向血凝试验(RPHA)、酶免疫法(enzymeimmuneoassay,EIA)、方夂射免疫法(radioimmunoassay,RIA)、荧光酶免疫法(fluorescenceenzy
2、meimmunoassay,CLIA)等方法。目前多采用ELISA法、微粒子酶免疫法(microparticleenzymeimmuneoassay,MEIA)和化学发光法等。HBsAgELISA分析灵敏度在0.2〜0.5U/L左右,MEIA或化学发光法的分析可达0.05〜0.10U/L。最近,推出的HBsAg定量分析技术,采用WHO的IU单位(可溯源至标准品WHOInternationalStandard00/588)。HBsAg定量可能对于抗病毒疗效监测有价值,但可能由于缺乏早期应答变化,□
3、前应用不多。上述HBsAg方法均属于筛查试验(screeningtest),还需做确认试验。但我国长期以来,因为HBsAg阳性率很高,人群多,且血清HBsAg浓度很高,很少有实验室做确认试验。今后随着我国HBsAg阳性率的降低,逐渐成为HBV低感染区,确认试验会成为常规检测。确认试验原理是采用抗原抗体中和反应对筛査HBsAg阳性的标本采用anti-HBs中和HBsAg,如果能中和(如出现阴性反应或吸光度值显著下降),则判断为HBsAg确认阳性。值得注意的是,HBsAg确认试验有局限性,尤其是HB
4、sAg呈低浓度时,由于受灵敏度影响,试验可能无法得出结果。Anti-HBs是HBV感染恢复期或疫苗免疫后产生的保护性抗体。Anti-HBs的定量检测,对于评价个体对HBV的免疫应答能力,特别是评价疫苗应答效果、肝移植后使用乙型肝炎免疫球蛋白抑制HBV再感染疗效评价等有重要意义。Anti-HBs阳性(WHO推荐〉10IU/L)一般认为具有对HBV的保护能力。肝移植后,维持低水平的anti-HBs即具有预防HBV再感染的作用。在HBV感染自然恢复的早期,HBsAg浓度逐渐降低,anti-HBs滴度逐
5、渐增高,可能出现抗原抗体同时存在的现象,尤其在使用较高灵敏度的试剂进行检测吋,HBsAg/anti-HBs同吋阳性的情况也会出现,对这种少见的血清学模式常需要随访确证。如患者在一段时间转变为HBsAg阴性/anti-HBs阳性,则可确定患者处于恢复期,如抗原抗体长期同时存在,则可能为不同型病毒或变异型病毒的再感染,进行HBVDNA检测结合基因序列分析进行确认。乙肝病毒e抗原(HBeAg)及乙肝病毒e抗体(anti-HBe):HBV的C基因从两个不同的起始密码子起始转录,分别产生pC-mRNA(前
6、C信使RNA)及pg-C/PmRNA(前基因组-C/P信使RNA),前者产生pC蛋白p25,经过一'系列处理最终成为HBeAg,后者合成p21的核壳蛋白HBcAg,二者又合称乙型肝炎病毒核心相关抗原(HBcrAghHBeAg是血清分泌性蛋白,在急性感染期,可于接触病毒后的6〜12周检出,阳性则提示患者肝脏中病毒复制活跃并具有高度的传染性。急性HBV感染屮HBeAg可在HBsAg消失之前消失,若持续扪性3个刀以上常意味着病程的慢性化。HBeAg存在于Dane颗粒内和患者的肝细胞内,是HBV复制的査
7、接指标。目前多采用ELISA法、MEIA和化学发光等定性分析HBeAg,或者以信号川伤界值比(S/CO)的形式半定量分析HBeAg,实质都是定性试验。血清HBeAg是临床指导抗病毒治疗以及观察闻道的常用指标,需要检测系统有很高的灵敏度和稳定性。在抗病毒治疗过程中,根据HBeAg的S/CO值或者有的系统采用的PEI单位的水平改变进行随访监测,对于抗病毒疗效判断有重要价值并以常规应用。有相当一部分经反病毒治疗后的忠者血清中HBeAg的S/CO值可降至很低的水平,但未完全转阴,因此提高HBeAg检测灵
8、敏度对于促进抗病毒疗效有重要意义。anti-HBe也是HBV感染与病毒复制的指标之一。anti-HBe检测目前主要采用两种技术:屮和抑制法和竞争抑制法。屮和抑制法试剂包括捕获抗体anti-HBe、酶标抗体anti-HBe及重组e抗原(rHBeAg),若标本中不含anti-HBe,则上述3种试剂会形成夹心从而给出阳性读值。竞争抑制法,即直接包被rHBeAg,使酶标anti-HBe与标本中的anti-HBe竞争性结合包被的rHBeAg。HBV核心抗原(HBeAg)及HBV核心抗体(anti-HBe)
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