462例肺结核病患结核菌mlva基因分型研究

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1、462例肺结核病患结核菌MLVA基因分型研究第1章绪论1.1结核病流行特征1.1.1全球结核病流行现状结核病是一种古老的传染病，公元前460年结核病正式表述为消耗病或痨病，这是结核病最早的描述，危害人类健康已有数千年历史，曾在全世界广泛流行。由于其疫情猖狂，病死率高，在当时被称为白色瘟疫。1921年法国医学家Calmette与兽医学家Guerin发明了结核菌减毒活疫苗（卡介苗BCG），各地开始接种卡介苗预防结核病，20世纪50年代，有效的抗结核化学药物相继被发现，随着人类卫生状况的改善和生活水平的提高，结核病的流行得到了一定的控制。但是自80年代末90年代初，结核病的发病率开始呈

2、现回升趋势，这主要有以下几个原因：（1）HIV与AIDS的蔓延和流行。HIV和结核的合并感染，促进了AIDS和结核病的进行性加重。HIV可以削弱机体免疫系统，使结核分枝杆菌有机可乘。而结核病又造成全球15％～30％AIDS患者死亡。据LVA分型实验若想获得较为精确的分子量大小，电泳这一步是至关重要的，因此琼脂糖凝胶的配制质量直接影响着扩增的结果大小。此类实验一般均采用2％的琼脂糖凝胶，为了提高其分辨度本实验采用3％的凝胶。用电子天平称量6g琼脂糖，加入200mL1xTAE缓冲液。微波炉加热1min，取出摇晃均匀后，继续加热5min取出，若还未完全溶解则继续加热直至完全溶解。稍微冷

3、却后加入4μlEB染色，充分混匀后倒入准备好的制胶板中，插入1排34孔梳子，室温放置45min，待凝胶完全冷却成透明白色胶状固体时，放入加好1xTAE缓冲液的电泳槽中备用。第3章结果.....183.1病例的一般状况.........183.2分离菌株的鉴定........183.3VNTR位点检测.....203.4菌株的MLVA基因分型.........273.5基因型成簇性的分布特征.....353.6优势菌株基因型的分布特征.......373.7Spoligotyping基因分型的分布特征........39第4章讨论.....414.112个VNTR位点的多态性

4、.....414.2MLVA基因分型研究.........424.2.1LVA基因分型研究........424.2.2最近邻法MLVA基因分型研究....434.3基因型成簇性分析.....444.4优势菌株基因型分析......444.5Spoligotyping基因分型分析........45第5章结论.......47结论北京家族基因型的地区分布结果可以看出除延边市外，其他各地区的主要流行菌型均为北京家族基因型，与我国流行趋势相一致。延边市患者非北京家族基因型占66.7％，该市的主要流行菌型不是北京家族基因型，与整体流行趋势不符。可能是由于延边地区的患者只有三人，不能准确

5、判断其主要流行菌型。另外两例患者的基因型分别是LAM家族基因型及T家族基因型，两个非北京家族基因型的菌型类型并不一致，不能得出该地区的流行菌型。将北京家族基因型菌株与非北京家族基因型菌株对年龄，性别，初诊和复诊，临床诊断及是否合并疾病等流行病学资料进行统计学分析，结果显示年龄，初诊和复诊，是否合并疾病、临床类型差异均无统计学意义（P>0.05）；而性别在北京家族基因型菌株与非北京家族基因型菌株差异有统计学意义（P<0.05），北京家族基因型中女性患者所占比例高于非北京家族基因型女性患者所占比例，可能是吉林省地区女性患者对北京家族基因型菌株易感程度高于非北京家族基因型，

6、也可能由于研究样本中女性患者较少，不能准确得出女性患者对于北京家族基因型及非北京家族基因型的感染情况。北京家族基因型为本研究菌株的主要流行菌型，也是我国的主要流行菌型，吉林省女性患者可能对该型易感，应重点监测该基因型的菌株，对该基因型的研究将是我国结核病防治工作很重要的一部分。