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《参芪补肺汤对肺气虚证慢性阻塞性肺疾病大鼠气道重构中mmp》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、参芪补肺汤对肺气虚证慢性阻塞性肺疾病大鼠气道重构中MMP.freelonarydisease；lung-Qideficiencysyndrome；airodeling；metalloproteinase；rat慢性阻塞性肺疾病(chronicobstructivepulmonarydisease,COPD)是以不完全可逆性气流阻塞、气道慢性炎症和气道重构为特征的疾病。基质金属蛋白酶(MMPs)及其组织型金属蛋白酶抑制物(TIMPs)与气道炎症修复重构密切相关。中医认为肺气虚是COPD发生的首要条件,且贯穿疾病始终。参芪补肺
2、汤从《永类钤方》中的补肺汤化裁而来,.freelL的药液。吸入用布地奈德混悬液,AstraZeneca公司产品,批号300229,购自贵阳医学院附属医院；木瓜蛋白酶,Sigma公司产品；兔抗MMP-9及TIMP-1多抗、即用型SABC免疫组化染色试剂盒均为武汉博士德公司产品；DAB显色试剂盒,北京中山公司产品。1.3主要仪器超声雾化器,德国白瑞公司；自制透明塑料箱40cm×40cm×40cm；RM2016型轮转式石蜡切片机,上海徕卡仪器有限公司；BX51显微镜,日本Olympus。2实验方法2.1造模采用《中医实验动物学》
3、之“肺气虚证动物模型”复制法1,并复合木瓜蛋白酶雾化吸入法2复制“肺气虚证”稳定期COPD模型大鼠。用刨花、锯末、烟叶各30～50g,另加二氧化硫粉10g,点燃烟熏,模型大鼠暴露于烟雾浓度300ppm的烟室中,每日2次,每次1h,并于造模开始后第30、32、34、36日将超声波雾化器与40cm×40cm×40cm透明塑料箱相连,通过雾化管向箱中模型大鼠喷入浓度为0.3%的木瓜蛋白酶,每5只大鼠2mL。造模期60d。2.2分组与给药MP-9、TIMP-1的阳性表达为胞浆内呈棕黄色颗粒样改变。在图像分析系统上,每张切片选取小支
4、气管2根,3个不包含支气管、血管结构的视野,固定光镜倍数观察,应用图像分析软件对MMP-9和TIMP-1的表达进行图像分析,表达强度用平均光密度值(MOD)表示。2.4统计学方法数据用x±s表示,多组间数差异显著性检验采用方差分析,多组间两两比较采用LSD法。数据统计采用SPSS15.0软件处理。3结果3.1一般情况正常组活泼好动,皮毛光亮,体形肥胖,强壮,呼吸平稳。模型组逐渐活动量减少,不活泼,拱背蜷卧,毛发稀疏,竖毛,无光泽,食量减少,行动迟缓,撮毛,体弱瘦小,从第20日起开始咳嗽、喷嚏频作,后期呼吸加深、急促,符合肺
5、气虚证的表现4。给药组介于空白组、模型组之间。3.2支气管形态学测量(见表1)表1各组大鼠支气管形态学测量结果比较(略)注：与正常组比较,*P≤0.01；与模型组比较,△P0.05；与补高组比较,▲P0.05(下同)3.3支气管肺组织中基质金属蛋白酶及其组织型金属蛋白酶抑制物的蛋白表达(见表2)表2各组大鼠支气管、肺组织中MMP-9和TIMP-1的蛋白表达比较(略)注：与补高组比较,★P0.054讨论气道重构是COPD气流受限的主要原因。肺细胞外基质(ECM)过度沉积是气道重构的显著特点之一,MMPs及TIMPs是调节EC
6、M降解合成的主要酶类。MMPs是目前所知唯一能使胶原纤维变性降解的酶,其增多可促使肺泡壁基底膜降解及肺气肿形成,TIMPs是内源性抑制MMPs活性的一组多功能因子家族,TIMPs抑制MMPs的活化,促进ECM沉积和抑制其降解,可促使平滑肌细胞、表皮细胞增殖5。正常情况下,MMPs与TIMPs处于平衡状态,在炎症状态下,炎性细胞和结构细胞表达MMPs明显增强,随着病程的进展,炎性细胞减少,成纤维细胞增多,成纤维细胞也产生MMPs和TIMPs,且分泌MMPs弱的细胞亚群占优势,并分泌TIMPs增强,加上其它细胞的综合作用,最终
7、导致MMPs/TIMPs比例下降。Vignola等6在COPD患者痰中发现,MMP-9/TIMP-1比值低于健康人,这一比值与第1秒钟用力呼气容积呈正相关,表明MMPs/TIMPs失衡与ECM重构及气流阻塞密切相关。研究表明,COPD的发生发展与MMP-9/TIMP-1的不平衡有关7。本实验显示,模型组MMP-9、TIMP-1蛋白表达较正常组增高,同时其小支气管管壁和平滑肌厚度也增厚,提示肺气虚证COPD气道重构与MMP-9、TIMP-1的表达增加有关。MMP-9/TIMP-1失衡推进了气道炎症损伤和修复重构。肺虚卫气不足
8、,卫外不固,呼吸道防御机能和免疫调节能力下降,则易受邪侵而发病。随病情的发展,又常累及他脏,肺病及脾,肺虚及肾,三脏相互作用,其功能失调导致痰瘀的产生。COPD形成并持续发展会进一步加重肺气虚。因此,重视COPD肺气虚证的治疗尤为重要。参芪补肺汤由黄芪、党参、补骨脂、丹参、百部、桑白皮组成。诸药合用,共
