正交试验优选柿蒂中齐墩果酸的提取工艺研究

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1、正交试验优选柿蒂中齐墩果酸的提取工艺研究莫元涛邓丽丽赵秋华（右江民族医学院广丙百色533000）【摘要】目的优选柿蒂中齐墩果酸的提取工艺。方法釆用L9（34＞正交试验，超声提取，以齐墩果酸含量为指标，紫外分光光度法进行检测，确定最佳提取工艺条件。结果优选出齐墩果酸的最佳提取工艺条件是：超声提取40min,90%乙醇溶液，料液比1:8。结论此工艺提取方法快速、简单。可作为进一步研究柿蒂提供参考。【关键词】柿蒂正交试验齐墩果酸【中图分类号】R96【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2014）17-

2、0261-01齐墩果酸主要具有护肝降酶、促进肝细胞再生、抗炎、强心、利尿、抗肿瘤等作用［3］，还具有降血糖、降血脂、镇静的作用，临床上用于治疗传染性急性黄疽型肝炎，A有明显的降低谷丙转氨酶及退黄效果，改善病毒性和慢性迁延性肝炎患者的症状、体征和肝功能，是开发治疗肝病和降血糖等药理作用［4］。木文釆用超声波提取法从柿蒂中提取齐墩果酸，优化柿蒂中齐墩果酸的提取工艺，旨在进一步研究和开发利用新的药用植物资源，进一步促进柿植物资源的开发利用，同时优化提取工艺为工业生产提供依据。1仪器与试药1.1仪器TU-1810

3、紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；台式连续投料粉碎机（温岭市林大机械有限公司）；DF-16型数显恒温水浴器（常州国华电器有限公司）；台式离心机（上海安亭科学仪器厂，TDL80—2B＞等。1.2试药柿蒂釆购于百色市右江区，经右江民族医学院民族医学门诊部覃道光副教授鉴定为柿蒂。齐墩果酸对照品(批号110709-201206),中国药品生物制品检定所提供,供含量测定用的的甲醇为色谱纯，乙醇、冰醋酸、甲酸、高氯酸等分析用试剂均为分析纯。2方法与结果2.1标准曲线的绘制2.1.1对照品溶液的配制取

4、齐墩果酸对照品，精密称取2.3mg置10ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，配成0.23mg/ml的对照品溶液，备用。2.1.2最大波长的选择用微量移液器吸取100μL的对照品液于具塞试管中，70°C水浴蒸干后，冷却，在试管中加入新配制的5%的香草醛-冰醋酸溶液0.2ml和高氯酸溶液0.8ml，摇匀盖塞，于70°C恒温水浴加热15min,立即冰水冷却2-3min，然后分别加入冰醋酸10ml,在200〜700nm范围内扫描，发现对照品溶液在545nm处有最大吸收峰，且空白对照无干扰，因此选择545n

5、m为检测波长。2.1.3标准曲线的绘制用微量进样器分别吸取齐墩果酸标准液0.1ml、0.15ml、0.2ml、0.25ml、0.3ml置于具塞试管中，按2.1.2法操作，随行溶剂作空白。结果表明齐墩果酸在0.05-0.45mg/ml浓度范围内线性关系良好。2.1.4样品溶液的制备及测定取lg柿蒂粗粉置于试管中，加入适量的的乙醇，超声提取一定时间。布氏漏斗抽滤后，取供试品10ml于离心管中，4000r/min离心，取上清液0.1ml,按2.1.2项方法处理，在545nm处测定吸光度值，计算齐墩果酸的含量。2

6、.2单因素实验选定提取吋间、乙醇浓度、料液比对超声提取率的影响进行单因素实验。在单因素的基础上，确定正交实验的因素和水平范围，以齐墩果酸的含量为指标。从单因素实验数据分析，以提取吋间(A)、乙醇浓度(B)、料液比(C)、空白(D＞为考察因素，每个因素各取3个水平，得到正交试验的因素水平表。如表1所示2.3正交试验及结果分析根据单因素实验的结果，设计正交试验的因素水平表，并按L9(34＞正交试验安排表进行实验。准确称取柿蒂药材粗粉lg9份，如表2设计，超声提取后按2.1.4项处理，记录吸光度值，计算齐墩果酸

7、的含量。结果见表2。由表2的直观分析可知，3个因素中乙醇浓度B的R值最大，也就是乙醇浓度对提取工艺的影响最人，各因素对超声提取影响人小的顺序是B>C>Ao较佳提取工艺条件是A2B3C1。各因素对提取均有一定影响，但差异不显著性。所以最佳提取工艺为A2B3C1，即提取时间40min、乙醇浓度90%、料液比1:8。3讨论本实验采用单因素结合正交设计优化柿蒂中齐墩果酸提取工艺，对提取吋间、乙醇浓度、料液比三个因素进行了考察，以齐墩果酸的含量为指标，筛选出最佳提取工艺条件为：提取吋间40min、乙醇浓

8、度90%、料液比1:8。该工艺条件简单，稳定可行。高效液相色谱法方便、准确度高，曾参考文献的齐墩果酸色谱条件进行摸索，但是由于齐墩果酸与熊果酸为同分异构体，性质相近，较难分离，色谱条件不易建立，进而采用紫外分光光度法进行测定。从实验结果表明，本法操作简便，测定结果快速。参考文献[1】国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].中国医药出版社,2010:233[2】《全国中草药汇编》编写组.全国中草药汇编:上下册[M].北