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时间:2018-11-12
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1、中药熏蒸疗法对II型胶原诱导型关节炎大鼠血清IL1β、ILra含量及IL吴名波沈鹰孙维峰,黄清春古正涛于水莲【摘要】目的研究中药熏蒸疗法对II型胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠血清中炎性细胞因子IL-1β和IL-lra水平及IL-lra/IL-1β比值的影响。方法建立II型胶原诱导的大鼠模型,ELISA法检测大鼠血清中IL-1β和IL-ra的含量,计算IL-ra/IL-1β比值。结果中药熏蒸能明显降低CIA血清中IL-β含量及升高ILra及IL-ra/IL-1β比值。结论中药熏蒸疗法具有抑制CIA大鼠关节炎症的
2、作用,其机制可能与调节体内炎性细胞因子IL-1β及抗炎性细胞因子IL-ra的水平有关。【关键词】中药熏蒸疗法;CIA;IL-1β;IL-ra;IL-ra/IL-1β;抗炎机理Abstract:ObjectiveTostudytheeffectsoftheChineseherbfumigationandsteamingtherapyonthecontentsofIL-1β、IL-raandIL-ra/IL-1βinserumofratsodel,andmeasurethecontentsofIL-1β,IL-rain
3、serum,calculatetheratioofIL-ra/IL-1β.ResultsTheChineseherbfumigationandsteamingtherapycouldloofratsigationandsteamingtherapyhastheeffectsofanti-inflammationonratsechanismmayberelatedtoregulatingthelevelsofIL-1βandIL-lra.Keyigationandsteamingtherapy;CIA;IL-1β;I
4、L-ra;IL-ra/IL-1β;Anti-inflammatorymechanism类风湿性关节炎(Rheumatoidarthritis,RA)是一种以关节滑膜慢性炎症病变为主要特征的自身免疫性疾病。其主要病变发生在滑膜,累及关节软骨、韧带、肌腱及全身组织,引起关节肿痛,继而软骨破坏,关节间隙变窄,晚期关节畸形,功能活动障碍,最终导致不同程度的残疾。我们临床上使用中药熏蒸疗法治疗类风湿性关节炎疗效显著,而且曾运用中药熏蒸疗法治疗AA模型大鼠,观察相关指标.freel公司产品;大鼠IL-1β、IL-lra的ELI
5、SA检测试剂盒。2方法2.1CIA大鼠模型复制和分组治疗将40只大鼠随机留取8只作为正常组,其余32只待造模,适应性喂养3d。取10mg小牛源II型胶原溶于配制好的0.1mol/L乙酸5ml,然后放置4℃冰箱内过夜,次日按2mg/ml比例与弗氏不完全佐剂1∶1混合,用注射器反复抽吸,直至混合物完全、充分乳化,以乳化物滴入水中不松散为度(在冰浴中操作);取乳化后大鼠CIA造模剂,于大鼠尾根部及左足底皮内按0.5ml/只注射,并轻微压迫注射部位30s,以使乳化物吸收完全。注射后第1天,部分造模组大鼠注射区局部皮肤发红、
6、轻度肿胀、皮温升高,活动欠灵活;第2日部分造模大鼠左后足肿胀继续加重,并于3~7d开始逐渐消退;至第8日按以上同样的方法再次注射0.3ml/只,注意需避开上次注射部位;第14天大部分造模大鼠左后足和部分右后足关节出现肿胀、皮肤发亮、充血及关节活动受限;第21天大部分双后足关节及部分前足关节肿胀达到高峰,部分大鼠出现皮肤溃疡。多发性关节炎的出现表明大鼠CIA模型建立成功。造模后第21天,32只模型大鼠随机分成4组,模型组、水熏组、低熏组、高熏组各8只。正常组和模型组常规喂养,不做熏蒸处理;水熏组给予(57±1)℃蒸馏
7、水熏蒸,蒸气温度为(39±1)℃;低熏组给予相同温度3.33%的中药液熏蒸;高熏组给予相同温度6.67%的中药液熏蒸。将大鼠放入自制动物熏蒸装置,开启电子恒温水槽,待蒸气温度达到熏蒸要求时,开始熏蒸并计时,熏蒸20min/次,连续20d。2.2大鼠血清的获取及IL-1β、IL-1ra含量的测定造模后第41天,以自配麻醉剂(5%盐酸氯胺酮注射液20ml,2.5%盐酸异丙嗪注射液20ml,0.05%硫酸阿托品注射液10ml混匀),于每只大鼠腹腔注射0.6~0.8ml,迅速麻醉,麻醉后心腔取血,采用ELISA法测定IL-
8、1β,IL-1ra,并计算IL-ra/IL-1β比值,以上操作需严格按检验试剂盒说明书步骤执行。2.3统计学处理采用SPSS11.5统计软件,运用单因素方差分析进行多组间两两比较,统计结果以±s形式表示,P0.05表示差异具有统计学意义。3结果3.1中药熏蒸疗法对CIA大鼠血清IL-1β含量影响表1显示,各造模组的IL-1β含量均显著升高,与正常组比较有非常
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