针刺对变应性鼻炎模型大鼠血清il-4、il-12、

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1、实验研究针刺对变应性鼻炎模型大鼠血清IL-4、IL-12、GATA-3mRNA水平的影响郭清华王旭刘玉（南京市中西医结合医院，江苏南京210014）摘要目的：研究针刺疗法对变应性鼻炎模型大鼠血清白介素-4（IL-4）、IL-12、GATA-3mRNA水平的影响。方法：wistar大鼠用卵清蛋白制作成变应性鼻炎模型，造模成功的大鼠随机分为模型组、针刺组、西药组，每组10只，另取10只正常大鼠为空白组。针刺组针刺肺俞（双）、肾俞（双）、大椎，每日1次；西药组予氯雷他定糖浆，每日灌胃1次；模型组予生理盐水，每日灌胃1次。各组均连续干预14d，空白组不予任何干预。干预结束后，采用症状评分法评价大鼠过

2、敏症状，显微镜下观察大鼠鼻黏膜改变，酶联免疫吸附试验（ELASA）检测各组大鼠血清IL-4、IL-12水平，逆转录PCR（RT-PCR）法检测大鼠鼻黏膜GATA-3mRNA水平。结果：针刺组大鼠症状积分明显低于模型组（P<0.05）。模型组鼻黏膜组织水肿，血管扩张，大量嗜酸性粒细胞浸润；针刺组及空白组则无上述改变。针刺组大鼠血清IL-4明显低于模型组（P<0.05），血清IL-12明显高于模型组（P<0.05），鼻黏膜GATA-3水平明显低于模型组（P<0.05）。针刺对上述指标的改善效果与氯雷他定相当（P>0.05）。结论：针刺疗法可明显改善变应性鼻炎模型大鼠的症状，减少嗜酸性粒细胞在鼻黏

3、膜的汇集，同时可升高血清IL-12水平，降低血清IL-4和GATA-3水平，可能是其治疗变应性鼻炎的作用机制。关键词针刺疗法变应性鼻炎IL-4IL-12GATA-3大鼠实验研究中图分类号R765.210.5文献标志码A文章编号1672-397X（2018）10-0075-03基金项目江苏省中医药局科技项目（YB2015070）变应性鼻炎（AllergicRhinitis，AR）是机体暴1.2主要试剂与药物IL-12试剂盒、IL-4试剂盒，露于变应原后由IgE介导的鼻黏膜非感染性慢性炎上海酶联生物科技有限公司；氢氧化铝干粉，上海凌性疾病，典型症状为阵发性喷嚏、清水样涕、鼻痒峰化学试剂有限公司；

4、卵白蛋白，sigma公司；氯雷他[1]和鼻塞。目前，变应性鼻炎流行率有全球逐年增定糖浆，MSDBelgiumBVBA/SPRL（比利时）；一次性加的趋势。2015年，美国变应性鼻炎临床指南首针灸针，环球牌，0.18mm×13mm；氯仿（三氯甲烷）、[2]次将针刺疗法作为可选择的方案之一进行推荐。异丙醇、无水乙醇，分析纯，南京化学试剂股份有限公针刺治疗变应性鼻炎不但能取得较好的疗效，而司；焦碳酸二乙酯（DEPC），Sigma公司；Trizol、M-MLV且有副作用小、复发率低、成本较低等优点。孙氏反转录酶等逆转录试剂、DNAmarker、TaqDNA聚合[3]等通过分析近10年的临床报道发现针

5、刺治疗过酶反应体系，TaKaRa公司；引物：生工生物工程（上敏性鼻炎疗效可靠，操作简单，同时也提出应加强海）股份有限公司合成。内参引物序列见表1。针刺治疗过敏性鼻炎的实验和作用机理研究，尤其1.3主要仪器全自动荧光PCR分析仪，美国是从免疫学角度。本研究制作变应性鼻炎大鼠模Branchburg公司；台式高速离心机，上海安亭科学仪型，观察针刺疗法对AR模型大鼠的疗效及其对大器厂；核酸蛋白检测仪，Thermo公司。鼠血清白介素-4（IL-4）、IL-12、GATA-3mRNA表1内参引物序列水平的影响。基因引物名称碱基组成1实验材料上游引物5’-TCGGCCATTCGTACATGGAA-3’GA

6、TA-31.1实验动物健康wistar大鼠，雌雄各半，清洁级，下游引物5’-GAGAGCCGTGGTGGATGGAC-3’体重（200±20）g，由扬州大学比较医学中心提供，上游引物5’-TCGACAGTCAGCCGCATCTTCTT-3’GAPDH动物合格证号：SCXK2012-004，适应性喂养1周。下游引物5’-GCGCCCAATACGACCAAATCC-3’2018年总第50卷第10期75实验研究2实验方法2.4指标检测2.1造模与分组将wistar大鼠适应性喂养1周后，2.4.1症状比较根据症状评分法用叠加量化记分[4]按照安云芳等报道的方法造模。（1）基础致敏：每法记分比较各组大

7、鼠用药前后症状积分。只大鼠予用卵清蛋白（OVA）0.3mg+氢氧化铝30mg+2.4.2鼻黏膜观察将10%甲醛溶液中固定的大生理盐水1mL制成的混悬液，腹腔注射，隔日1次，共鼠鼻黏膜，经组织脱水、石腊包埋、切片、脱腊、苏木7次。（2）激发阶段：腹腔注射OVA结束后第2天即精-伊红染色、脱水、透明、封固等操作后，在显微镜开始激发，每只大鼠予5%OVA50µL滴鼻，每日1次，下观测实验大鼠鼻黏膜组织学改变及嗜酸性