改良聚凝胺法检测孕妇igg抗a(b)效价

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1、改良聚凝胺法检测孕妇IgG抗A(B)效价【关键词】改良聚凝胺法；孕妇；免疫球蛋白抗A(B)；新生儿溶血病　　新生儿溶血病(HDA)是一种由于母体内存在着与其胎儿红细胞不配合的IgG血型抗体而引起的同种被动性疾病，在已知的血型抗原中发生HDA，以ABO系统最为常见［1］。因此，准确测定孕妇IgG抗A(B)效价，可为产前诊断和预防ABOHDN提供依据。笔者以传统的抗球蛋白法为标准，应用改良聚凝胺法检测孕妇IgG抗A(B)效价，并进行了初步探讨，现将结果报告如下。　　1材料与方法　　1.1观察对象2006年3月至2006年9月在本院门诊做产前检

2、查妊娠16周岁～36周岁的O型Rh(D)阳性孕妇(丈夫血型均为非O型Rh(D)阳性)，共126名；平均年龄26．6岁；留取不抗凝血样5ml待检。　　1.2试剂抗人球蛋白试剂、改良聚凝胺试剂盒(上海血液生物医药有限公司提供)；0．2mol／L2Me应用液自配(2琉基乙醇，购自成都科龙化工试剂厂)；2％、5％A型／B型红细胞悬液自配，其中2％A型／B型红细胞悬液用试剂盒中低离子介质(LIM)配制。　　1.3方法传统抗球蛋白法严格按文献［2］方法操作。改良聚凝胺法操作步骤：等量的0．2mol／L2Me应用液和各血清混合，将血清中的IgM破坏

3、，然后用LIM溶液倍比稀释，其余步骤按照试剂盒说明书上进行。结果判定均以肉眼凝集为“1+”的最高稀释度的倍数为其抗体效价。　　1.4统计学处理采用两分类的配对计数资料χ2检验和比较配对诊断试验k系数法［3］。　　2结果　　2.1改良聚凝胺法和抗球蛋白法测定孕妇IgG抗A效价结果见表1。两法经χ2检验，P＞0．05，差异无显著性；k系数为0．89，两法高度一致；其中改良聚凝胺法的灵敏度为97％、特异性为91％、准确性为94％。　　表1两法检测lgG抗A效价比较（略）　　注：*χ2＝0．57，P＞0．05，k系数为0．89。　　2.2改良聚凝胺

4、法和抗球蛋白法测定孕妇IgG抗B效价结果见表2。两法经χ2检验，P＞0．05，差异无显著性；k系数为0．82，两法高度一致；其中改良聚凝胺法的灵敏度为95％、特异性为89％、准确性为91％。　　表2两法检测lgG抗B效价比较（略）　　注：*χ2＝1．45，P＞0．05，k系数为0．82。　　2.3两法检测IgG抗A效价≥256均为11例，IgG抗B效价≥256均为8例，符合率为100％。　　3讨论　　孕妇产前IgG抗A(B)水平检查对预防ABOHDN具有重要意义，当ABO抗体效价≥64时，建议复查；≥256时，怀疑HDN；≥512时，高度

5、怀疑HDN［4］。因此，应用准确的方法检测孕妇血清IgG抗A(B)效价是预防HDN的重要措施。目前国内大多数单位以传统的抗球蛋白法为首选，但该法繁琐、费时(需孵育1h，三洗红细胞)，不便于常规检查，也有少数单位以微柱凝胶法(卡式法)代替，但因其价格昂贵而未被广泛应用。低离子聚凝胺技术具有简便、快速的优点，虽然对kell系统抗体的敏感度低于抗球蛋白法，而在黄种人中kell系统非常罕见，因此该法目前被广泛应用于临床配血和抗体筛检。改良聚凝胺法则是利用LIM直接配制红细胞，从而能快速、简便、准确、稳定地检测红细胞不规则抗体［5］。本文结果显示，改

6、良聚凝胺法和抗球蛋白法检测孕妇IgG抗A(B)效价具有较高的一致性，且改良聚凝胺法的灵敏度、特异性、准确性均可靠。但在实验中应注意以下几个问题：由聚凝胺引起的红细胞非特异性凝集一般在1min内完全散开，若是由免疫抗体引起的凝集反应则不会完全散开，同时弱凝集可能在30min内明显减弱或消失，因此结果应以立刻看结果为准，特别是在检测大量标本时，应逐个观察并严格控制判读时间；聚凝胺法在低温下(＜15℃)会加强冷凝集强度，需以盐水试验作对照，并在37℃下判读结果，阴性结果需要作抗球蛋白法以防漏检；用LIM配制红细胞悬液时应排除红细胞自身凝集。总之，

7、改良聚凝胺法具有操作简单、试验时间短(平均节约1h)、成本低等优点，只要克服上述几个影响因素，值得在基层单位推广。【参考文献】　　［1］张钦辉．临床输血学［M］．上海：上海科学技术出版社，2000：98.　　［2］叶应妩，王毓三．全国临床检验操作规程［M］.第2版.南京：东南出版社，101.　　［3］杨春荣，姜明．实用临床检验统计学［M］．乌鲁木齐：新疆科技卫生出版社，1995：131136.　　［4］曹琼，兰炯采．新生儿溶血病的产前诊断方法研究进展［J］．中国输血杂志，2003，16(1)：68.　　［5］刘达庄．免疫血液学［M］．上海

8、：上海科学技术出版社，2002：207.