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1、三种检测孕妇红细胞血型IgG抗A(B)效价方法的比较【关键词】红细胞血型,,微柱凝胶,,抗球蛋白实验,,凝聚胺【摘要】目的比较微柱凝胶法与抗球蛋白法、凝聚胺法在检测O型孕妇红细胞血型IgG抗A(B)效价差异及方法的灵敏度。方法微柱凝胶法与抗球蛋白法、凝聚胺法检测102例O型孕妇血清IgG抗A(B)效价，经配对t检验和χ2检验，比较微柱凝胶法与其他两种方法检测结果的差异。结果微柱凝胶法、抗球蛋白法、凝聚胺法检测102例O型孕妇IgG抗A(B)抗体效价均值分别是85.7、37.6、43.4，前者比后两者分别高2.28和1.9
2、7倍；检出IgG抗A(B)阳性百分率分别为76.5%、37.2%、44.6%,前者阳性率明显高于后两者，分别经配对t检验和χ2检验,有显著性差异(P均<0.001)。但微柱凝胶法与抗球蛋白法、凝聚胺法检测结果有相关性（r分别为0.9035和0.8901，P均<0.001）。另外，以经典抗球蛋白法IgG抗A(B)效价64为临床意义决定值，根据回归方程计算，理论上微柱凝胶法临床意义决定值的效价为138。结论微柱凝胶法比抗球蛋白法、凝聚胺法具有更高的灵敏度，且实验操作简便、快速，更适合于实验室内的广泛应用；但因灵敏度过高，需对
3、其决定值进行界定。【关键词】红细胞血型微柱凝胶抗球蛋白实验凝聚胺血型系统母体高效价红细胞血型IgG抗A(B)抗体能引起新生儿溶血病（HDN），IgG抗A(B)抗体效价≥64时，其母婴血型不合胎儿有可能发生ABOHDN，发病率与母体IgG抗A(B)效价呈正相关［1］。目前,检测红细胞血型IgG抗A(B)抗体最常用的方法是传统的抗球蛋白试验,近年来又发明了凝聚胺法和微柱凝胶法。为了比较这三种方法的优缺点，我们进行了如下对比研究。1材料和方法1.1仪器与试剂微柱凝胶8孔卡，西班牙戴安娜全自动血型系统（WADIANACOMPAC
4、T），由北京斑珀斯技贸有限公司提供；抗球蛋白试剂、巯基乙醇、标准A、Ｂ红细胞血球均由上海输血技术有限公司提供；凝聚胺由珠海贝索生物技术有限公司提供。1.2标本来源102例标本血清均来自我院门诊和住院待产孕妇，孕妇为O型，丈夫为A或B型，年龄23~32岁,平均28岁，其中丈夫A型56例，B型46例。1.3方法1.3.1标本处理取受血者血清0.4ml加巯基乙醇(2-Me)应用液0.4ml，混和，将试管口用橡皮塞塞紧，置37℃水浴2h,吸经2-Me处理的血清0.2ml用生理盐水作1∶8、1∶16、1∶32、1∶64、1∶128
5、、1∶256∶1∶512倍比稀释。1.3.2方法1）微柱凝胶法法：吸取上述倍比稀释液由全自动血型系统完成，结果以自动判读“1＋”的最高稀释度为抗体效价。2）抗球蛋白法和凝聚胺法，均参照全国临床检验操作规程和试剂盒说明书进行操作。显微镜观察到“1＋”的最高稀释度为抗体效价。以临床上有意义的IgG抗A(B)效价≥64判为阳性例数，＜64判为阴性例数。1.4统计学处理抗体效价先作对数转换处理，微柱凝胶法分别与抗球蛋白法、凝聚胺法的效价比较采用配对t检验；阳性例数百分率比较采用χ2检验。2结果2.1三种方法测定102标本效价均数
6、比较微柱凝胶法、抗球蛋白法、凝聚胺法检测效价的几何均值分别为85.7、37.6、43.4,前者比后两者分别高2.28和1.97倍。微柱凝胶法测定102例标本效价均值明显高于抗球蛋白法和凝聚胺法,并有显著性差异，t值分别为21.08、19.53,P值均小于0.001,结果见表1。表1三种方法测定102例标本IgG抗A(B)效价分布方法（略）2.2微柱凝胶法与抗球蛋白法、凝聚胺法相关性分析微柱凝胶法与抗球蛋白法、凝聚胺法检测结果均有显著相关性, 相关系数(r)分别为0.9035和0.8901。回归方程式分别为Y=0.5095
7、+0.9039X、Ｙ＝0.3074+0.9931X。以经典抗球蛋白法IgG抗A(B)效价64为临床意义决定值，根据回归方程计算，微柱凝胶法临床意义决定值的效价为138。2.3三种方法阳性检出率比较以临床上有意义的IgG抗A(B)效价≥64判为阳性例数，微柱凝胶法、抗球蛋白法、凝聚胺法，检出IgG抗A(B)阳性例数及百分率分别为78(76.5%)、38(37.3%)、45(44.1%)。微柱凝胶法检测IgG抗A(B)阳性率明显高于比抗球蛋白法和凝聚胺法，有显著性差异，χ2分别为31.97和22.29，P＜0.001。说明微
8、柱凝胶法此种方法经过我们病理科的运行，证明这是一种简便可行的方法，既可以节省资金又增加了报告管理的灵活性，比较适用于中小医院病理科使用。检测IgG抗A(B)效价灵敏性较抗球蛋白法和凝聚胺法高。3讨论ABO系统引起的HDN是由于母亲体内存在着与胎儿不相配合的IgG性质血型抗体引起的同种被动免疫性疾病。一般认为只有当抗体
