绿茶多糖的制备及其含量测定

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1、绿茶多糖的制备及其含量测定【摘要】目的建立一种稳定、简便的绿茶多糖含量测定方法。方法采用精制绿茶多糖测得绿茶多糖对葡萄糖的换算因子后,样品经除杂处理后,用苯酚－硫酸法测定绿茶中多糖的含量。结果用此方法测定多糖的标准曲线,其相关系数为0.9997,平均回收率为99.62%,相对标准偏差为1.94%。结论该方法所需仪器简单，操作方便,显色稳定，重现性好，适合于绿茶及其制品的多糖含量的常规检测。【关键词】绿茶多糖提取苯酚－硫酸法　　PreparationandDeterminationofPolysaccharide

2、fromGreenTea　　Abstract:ObjectiveTodevelopastableandsimplemethodtomeasurethepolysaccharideinGreenTea.MethodsAftertheconversioncoefficientofpolysaccharidefromGreenTeatoglucoseeasuredbyphenol-sulfuricacidmethod.ResultsThecorrelationcoefficientofstandardcurveeth

3、odisconvenient,stableandaccurate,inationofpolysaccharidefromGreenTeaasethod绿茶是历史最早的茶类，又称不发酵茶，以适宜茶树新梢为原料，经杀青、揉捻、干燥等典型工艺过程制成。其干茶色泽和冲泡后的茶汤、叶底以绿色为主调，绿茶也因此得名。最新科学研究结果表明，绿茶中主要化学组成为咖啡因、茶多酚、茶多糖等，咖啡因是一种兴奋剂,具有较好的镇痛作用，咖啡因也是一种和缓的利尿剂,药用上的咖啡因是头痛镇痛的一个组分,它可与麦角胺的酒石酸盐结合起来治疗偏头

4、痛［1］；茶多酚是一种新型的天然食品抗氧化剂,与抗坏血酸配合时,其抗氧化性能优良，茶多酚也具有高效的抗癌、抗衰老、降血脂等一系列的药理功能［2］；茶多糖具有降血糖、降血脂、降血压及减慢心率、耐缺氧的作用，同时茶多糖在抗凝血、防血栓形成、保护血象和增强人体非特异性免疫功能方面均有明显效果［3］，因此从绿茶中提取的多糖成分在开发降糖新药和功能性食品方面有着广阔的前景。绿茶多糖的含量测定对于提取原料的选择及提取工艺的评价具有重要意义。本研究用精制绿茶多糖测得绿茶多糖对葡萄糖的换算因子，然后将经95％乙醇浸泡处理后的绿

5、茶用水提取多糖，采用苯酚－硫酸法测定其含量。现报道如下。　　1材料与方法　　1.1材料核酸蛋白分析仪（DU-640），Beckman公司；电热恒温水槽（DK-8D型），上海森信实验仪器有限公司；台式冷冻离心机（D-78532Tuttlingen,universal132R）德国；Alphal-2型真空冻干机，德国christ公司；自动收样器，美国g,置于1000ml量瓶中加水至刻度，配成1mg/ml的葡萄糖母体溶液，然后稀释20倍，得到要用的50μg/ml的葡萄糖标准溶液。　　1.2.4吸收波长选择精密量取50

6、μg/ml标准葡萄糖溶液1ml,置20ml具塞试管中,依次加入6%苯酚溶液1.0ml，浓硫酸5.0ml,静置10min后摇匀,室温放置20min,以蒸馏水同法操作为空白对照，在波长400～600nm之间进行扫描,确定最大吸收波长487nm。　　1.2.5标准曲线制备［5］分别精密吸取50μg/ml标准葡萄糖溶液0.4，0.6，0.8，1.0，1.2，1.4，1.6，1.8ml置具塞的试管中，各以水补至2.0ml,依次加入6%苯酚溶液1.0ml，浓硫酸5.0ml,静置10min后摇匀,室温放置20min,以2.0

7、ml蒸馏水同法操作为空白对照,在487nm波长处测定吸光度，以多糖浓度为横坐标（μg/ml），光密度为纵坐标，绘制曲线，得回归方程为：Y=0.0154X+0.0038,r=0.9997。　　1.2.6换算因素确定精密称取干燥至恒重的精制绿茶多糖约5mg，置25ml容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，制得绿茶多糖储备液。精密吸取该溶液2ml，按“1.2.5”项下的方法测定吸光度，以2.0ml蒸馏水同法操作为空白对照。由回归方程求出此绿茶多糖储备液中葡萄糖浓度，并计算其中葡萄糖含量。按下式计算换算因子：f=l），

8、D为精制绿茶多糖的稀释倍数〕。　　1.2.7绿茶样品中多糖含量测定样品溶液制备：取样品绿茶1g，精密称定，粉碎，过50目筛，用95％乙醇浸泡1d后，残渣晒干，热水浸提3次，过滤，合并滤液，待冷后转移于1000ml容量瓶，加蒸馏水稀释至刻度作供试品溶液。样品中绿茶多糖含量测定：精密吸取所得样品溶液2.0ml于具塞试管中，按“1.2.5”项下的方法测定吸光度，由回归方程计算供试液中葡萄糖含