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《氨甲喋呤对映体诱导非小细胞肺癌a549耐药细胞株体外运动能力和vegf及其受体表达差异的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、thecabinwere(1224.33±76.37),(876.33±41.40),(785±76.05)vsD-(-)-MTX/A549,L-(+)-MTX/A549andparentcells,thenumbersofthreecellsthatinfiltratedandinvasionedthroughartificialbasementmembraneMatrigelwere(267±30.12),(106.33±16.50),(134.33±16.26).⑥Byrealtime-PCR
2、,theratioofCtbetweenVEGF,VEGFR-1,VEGFR-2andβ-Actinwere(1.668±0.127),(1.872±0.133),(1.919±0.107)inD-(-)-MTX/A549cells,thesethreeratioswere(2.035±0.185),(2.221±0.157),(2.255±0.140)inL-(+)-MTX/A549cells,thesewere(2.057±0.123),(2.291±0.138),(2.354±0.131)in
3、parentcells.Thelastthreedates(④⑤⑥)wereallsignificantbetweenD-(-)-MTX/A549cellsandL-(+)-MTX/A549orparentcells（P<0.05）,butnotsignificantbetweenL-(+)-MTX/A549andparentcells(P>0.05).Conclusion:Intumorcellsmovementability,invasion,angiogenesis,D-(-)-MTX-ind
4、ucedNSCLCA549cellshasgreatercapacitythanL-(+)-MTX,thusexplainthatMTXenantiomerhasdifferenceintumorinvasionandmetastasisafterresistant.Key:methotrexate;enantiomer;resistance;infiltrationandinvasion;tumorangiogensis4引言2001年诺贝尔化学奖授予手性对映体催化反应研究的三位科学家，它们的方法
5、在治疗帕金森L-Dopa和抗炎药左旋levofloxacin及半合成抗生素carbapenem类手性对映体药物中得到应用。手性对映体形式（D、L构型）是自然界的生命本质属性之一，生物体内生物大分子都是手性的。手性对映体两种分子与生物大分子的手性识别可以形象地用“手与手套”的关系来说明，左手能套进左手套，而右手与左手套就不匹配，具有高度的手性选择性。生物体内对映体识别效应的理论研究具有重大实践意义【1】。氨甲蝶呤（MTX）作为叶酸代谢途径抗肿瘤药物的基石，是许多叶酸途径抗肿瘤药物的前体，广泛应用于绒毛
6、膜癌、淋巴瘤、急性白血病和肺癌等多种肿瘤的治疗【2】。MTX被认为是成功用于肿瘤化疗药物之一，但是患者接受MTX治疗后肿瘤细胞变异引起转移复发，是目前MTX治疗失败的主要原因，因此，研究MTX引发肿瘤细胞耐药转移的机制具有重要的意义。MTX其化学结构中的谷氨酸存在L和D两种构型，所以自然界中的MTX也相应具有L和D两种构型，分别是L-(+)-MTX和D-(-)-MTX，就是我们通常所说的手性对映体结构。现在临床所使用的药物有这两种组分不同比例混合存在现象，其中L型MTX比例占总的60~99%不等【3
7、】，D型MTX一直被当成无意义的污染物而被忽视【4】。到目前国内外尚未有关于MTX对映体耐药细胞侵袭转移能力差异的研究。本文从MTX对映体的角度，以非小细胞肺癌A549细胞为研究对象，通过诱导A549细胞耐药建立MTX对映体耐药细胞株，分别检测对映体耐药细胞的体外运动和浸润侵袭能力力和肿瘤血管形成能力的差异，从而说明MTX对映体在肿瘤细胞耐药转移过程中的不同作用。5第一部分MTX对映体耐药细胞株的建立以及转移力相关指标的测定前言MTX作为常用的一种化疗药物，其在化学结构上是我们通常所说的对映体结构。
8、本实验室研究发现MTX对映体对癌细胞有不同的杀伤作用，该药物代谢过程中的关键酶DHFR（dihydrofolatereductase）对MTX两种对映体有立体选择性【5】。而在细胞诱导耐药的过程中，我们也发现MTX对映体对肿瘤细胞有着不同的杀伤作用。因此我们推测D型MTX在细胞内的作用方式可能与L型存在差别，在耐药的过程中也可能起着不同的作用。为研究对映体在肿瘤耐药后细胞转移力的不同，我们采用浓度递增结合低剂量持续诱导的方法，获得耐受15μmol/LMTX对映体两种耐
