大鼠肾小囊上皮细胞发生发育的变化

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1、大鼠肾小囊上皮细胞发生发育的变化【摘要】目的探讨胚胎及生后大鼠肾小囊上皮细胞发生发育的变化规律。方法采用光镜连续切片技术，电镜制作技术，并结合体视学分析方法，对不同发育阶段大鼠肾小囊上皮细胞发育的变化进行形态学观察和体视学测量。结果上皮细胞在发育过程中，细胞排列从紧密到分散，胞质从少到多，胞体从柱状到扁平，细胞突起从无到有，从少到多。结论随着发育过程中形态的变化，上皮细胞逐渐参与了肾小体滤过屏障的组成。【关键词】上皮细胞；肾小囊；发生发育；大鼠ThechangeoftheoriginanddevelopmentoftheepithelialcellAbstract

2、:ObjectiveToexplorethechangeoftheoriginanddevelopmentinratrenalcapsulesepithelialcellatembryonicandpostnatalday.MethodsLightparaffinseriessectiontechnologyandelectronmicroscopebinedethodseasurethedevelopmentoftheratrenalcapsulesepithelialcellatdifferentdevelopmentalstages.ResultsInt

3、hedevelopmentoftheepithelialcell,thecellthicknesstodispersion，theamountofcytoplasmsmallquantityoflargequantity.Thecellbodycolumntothinandflatform,cellgibbositygresmallquantitytolargequantity,theextracellualrspaceexpandedfromsmalltolarge.Conclusionorphologicalvariationinitsdevelopment,

4、theepithelialcellationofglomerularfiltrationbarrier.Keyent;rat肾小囊为肾小管起始端膨大并凹陷而成的双层盲囊，由内外两层上皮细胞构成，两层上皮细胞之间的腔隙为肾小囊腔。肾小囊壁层为单层扁平上皮，称肾小囊上皮，肾小囊脏层由足细胞构成，又称血管球上皮。目前，对大鼠肾小体发生发育的研究已有许多报道，但对肾小囊上皮细胞发生发育的变化规律至今仍无系统的报道［1～3］。本实验采用光镜、电镜技术并结合体视学分析方法，系统的研究了不同发育阶段大鼠肾小囊上皮细胞发生发育的变化规律，为进一步探讨肾小体发育的结构与功能的关系提

5、供了形态学依据。　　1材料和方法　　1.1实验动物的培养与取材选用成年健康SD大白鼠，雌、雄同窝饲养，以观察到阴道栓脱落的最早时间计为胚龄0天，并以观察到仔鼠出生的最早时间计为生后0天。选取胚龄16、18、20天的胎鼠和生后1、3、5、7、14、21、40天的仔鼠，每组取8只，每只母鼠取2只胎鼠或仔鼠。将孕鼠用乙醚麻醉后剖腹取出胎鼠，各龄胎（仔）鼠剖腹取出左右肾脏，采用Fractionator方法［4］（份额取样法），以间距为0.825mm的排刀横向截切全肾呈片状，左侧入2.5%戊二醛固定液,作电镜标本，右侧入4%多聚甲醛固定液，作光镜标本。1.2光镜及电镜标本的

6、制作胚胎和右肾固定后,常规脱水透明，石蜡定向包埋。各包埋块做7μm厚度的连续切片，等间隔选取两张连续完整的切片，HE染色，光镜下观察。将左肾固定48h后，取经肾门横断的薄片，皮质修块,常规电镜标本制备，定向树脂包埋，半薄切片，甲苯胺兰染色，光镜下观察并定位肾小体发生发育的各个阶段，超薄切片制作，醋酸铀、柠檬酸铅双染色，1200EX型透射电镜观察。1.3体视学的测定在10×10倍和10×40倍光镜下应用目镜方格测试系统，点计数法，根据公式VV=PxPC［5］测出各龄大鼠肾小体、血管球和肾小囊的体密度，然后根据公式V=VV·V肾计算出各部分体积。V肾为肾脏体积，由

7、Cavalieri点计数法测得［6］，具体公式为V肾=A·h，A=P肾·a2。1.4统计学处理用SPSS统计软件对测量数据进行回归分析，回归出肾小体、血管球和肾小囊的体积在95％可信区间内的生长曲线。2结果　　2.1肾小囊上皮细胞超微结构的变化规律在肾小囊发育的早期，肾小囊由内外两层细胞组成，外层细胞为肾小囊壁层上皮细胞，内层细胞为肾小囊脏层上皮细胞（即足细胞）。在原始肾小囊形成的同时，脏层上皮细胞已经开始分化。原始的脏层上皮细胞呈单层柱状，细胞排列紧密,细胞间隙小（图A）；在S小体期，细胞间隙增大,足细胞近顶点处出现紧密连接，胞核较大,规整（图B）。肾小囊

8、壁层上皮细