二氮嗪停搏液对缺血再灌注心肌线粒体的保护作用

《二氮嗪停搏液对缺血再灌注心肌线粒体的保护作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、二氮嗪停搏液对缺血再灌注心肌线粒体的保护作用作者：李寒,张载高,范士志,陈建明,蒋耀光【摘要】目的观察线粒体三磷酸腺苷(ATP)敏感钾离子通道开放剂二氮嗪加入停搏液内对缺血再灌注大鼠心肌线粒体保护作用。方法50只大鼠随机分为5组，每组10只，取离体心脏，A组取正常心肌，其余四组置于Langendorff模型。B组停灌30min,复灌60min；其余各组分别灌注不同的停搏液：C组灌注停搏液；D组灌注含二氮嗪的停搏液；E组灌注含二氮嗪停搏液之前10min给予格列苯脲。各组复灌60min取标本，电镜下观察线粒体结构改变；提取线粒体，激光共聚焦显

2、微镜扫描检测线粒体膜电位变化；测定线粒体呼吸功能；高效液相法测定心肌ATP含量及能荷(EC)变化。结果缺血再灌注心肌线粒体结构损伤和功能降低(P<0.05)；而二氮嗪处理组相应指标显著改善(P<0.01)。结论含二氮嗪停搏液能够改善缺血再灌注心肌线粒体结构和功能。【关键词】心肌缺血再灌注损伤;线粒体;线粒体呼吸控制率;二氮嗪　　ProtectiveEffectofCardioplegiaicandReperfusioninIsolatedETHODSFiftyratsly.Langendorffmodelinuteischem

3、iaand60minutereperfusion.GroupCandDasⅡcardioplegiaanddiazoxide+St.ThomasⅡcardioplegiabeforeischemiarespectively.AndgroupEideat10minbeforeDiazoxide+st.ThomasⅡcardioplegia.Attheend,mitochondrialchangesissionelectronmicroscope(TEM),therespirationfunctionofmitochondrionined,A

4、TP,ADP,AMPcontentofmyocardiuminedandenergycharge(EC)icandreperfusioninjuryinducedthestructuredamagedandfunctiondecreaseofmyocardialmitochondrial.itochondrial;Respirationfunction;Diazoxide　　缺血再灌注损伤是心脏直视手术后出现心功能不全等并发症的重要原因之一。近年来研究证明,心肌线粒体三磷酸腺苷敏感性钾通道(MitoKATP)是心肌缺血再灌注损伤的重要治疗

5、靶点。二氮嗪（diazoxide，DZ）是MitoKATP开放剂,具有对缺血再灌注心肌的保护作用。本研究采用体外大鼠心肌缺血再灌注损伤模型，观察了DZ对线粒体结构、膜电位、线粒体呼吸功能、ATP等的影响，探讨其心肌保护作用及机制。　　1材料与方法　　1.1实验动物健康成年大鼠50只，雌雄不限，由大坪医院实验动物中心提供。　　1.2药品与试剂DZ、格列苯脲购自Sigma公司。　　1.3分组及模型制备50只大鼠随机分为5组，每组10只，A组取正常心肌，其余四组置于Langendorff模型。B组停灌30min,复灌60min；其余各组分别灌注

6、不同的停搏液：C组灌注停搏液；D组灌注含二氮嗪的停搏液；E组灌注含二氮嗪停搏液之前10min给予格列苯脲，各组复灌60min。　　1.4标本收集与检测标本分为两部分：部分心肌电镜下观察线粒体结构改变；部分心肌提取线粒体，激光共聚焦显微镜扫描检测线粒体膜电位变化。测定反应呼吸功能的呼吸控制率（RCR）；高效液相法测定心肌ATP含量及能荷（EC）变化。　　1.5统计学处理应用SPSS10.0统计软件处理。所有数据均采用均数±标准差(±s)表示。P<0.05为有显著性差异。　　2结果　　2.1各组心肌线粒体结构损伤电镜下可见A组心肌线粒体

7、数量多，膜完整，嵴及其上附着之基粒结构清晰，无断裂。B组可见线粒体数目明显减少，膜结构不清晰，肿胀，部分线粒体出现空泡，嵴减少，结构不清，断裂，部分消失。经停搏液保护C组线粒体损伤较B组明显减轻，线粒体数目基本正常，稍显肿胀，未见明显空泡，膜结构欠清晰，嵴减少，结构不清，无断裂。而经DZ处理后D组线粒体结构损伤进一步减轻，基本接近正常，线粒体数量较多，部分肿胀，膜完整，未见空泡，嵴及其上附着之基粒结构比较清晰，无断裂。E组线粒体结构与C组接近。见图1、2、3。　　图1B组心肌线粒体结构（电镜）（略）　　图2C组心肌线粒体结构（电镜）（略）

8、　　图3D组心肌线粒体结构（电镜）（略）　　2.2各组线粒体膜电位变化B组线粒体膜电位较A组显著降低（P<0.01），C组线粒体膜电位与B组相比有明显升高，差异有统计学意义（P<0