雌激素对正常人精子运动参数及胞内钙离子的影响

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1、雌激素对正常人精子运动参数及胞内钙离子的影响【摘要】目的研究雌激素在体外对正常人精子运动参数和胞内钙离子的影响。方法用不同浓度的雌激素类物质17β雌二醇（E2）作用于人精子，以计算机辅助精子分析系统(CASA)观察人精子体外运动参数的变化；用腺苷酸环化酶抑制剂预处理人精子，通过流式细胞术检测E2、非透膜性大分子物质雌二醇牛血清白蛋白复合物（E2BSA）对精子胞内Ca2+浓度的影响。结果0.1μmol/L的E2可显著提高精子前向运动百分率、平均曲线运动速度、平均直线运动速度和平均路径速度(P<

2、;0.05)，10μmol/L的E2明显降低精子的前向运动百分率、平均曲线运动速度和平均路径速度（P<0.05），0.01μmol/L的E2对精子的各项运动参数无显著影响；E2（0.1μmol/L）、E2BSA（5μmol/L）作用后，精子胞内Ca2+浓度均显著升高(P<0.05)；腺苷酸环化酶抑制剂可明显抑制E2或E2BSA引起的精子胞内Ca2+浓度的升高（P<0.05）。结论雌激素在体外可增强正常人精子的运动力，该效应可能是通过雌激素与人精子膜上雌激素受体结合后，升高精子胞内

3、Ca2+的浓度以及激活腺苷酸环化酶而实现的。【关键词】雌激素；精子运动力；钙离子；信号转导途径【Abtract】ObjectiveTostudytheeffectsofestrogenonspermmovementparametersandintracellularcalciumconcentrations(［Ca2+］i)infertilemeninvitro.MethodsSpermmovementparametersinedbyputerassistedspermanalysis(CASA)in

4、thepresenceofdifferentconcentrationsofE2.EffectsofadenylylcyclaseinhibitorandconjugatedE2(E2BSA)onintracellularcalciumconcentrations(［Ca2+］i)inspermseasuredbyfloetry.ResultsE2atconcentrationof0.1μmol/Lcouldsignificantlyimprovethespermprogressivemotilit

5、y,VSL,VCLandVAP(P<0.05).E2atconcentrationof10μmol/Levidentlyreducedtheprogressivemotility,VSL,VCLandVAP(P<0.05).AndE2atconcentrationof0.01μmol/Lhadnoeffectonspermmovementparameters.BothE2（0.1μmol/L）andE2BSA（5μmol/L）significantlyincreasedthe［Ca2+］

6、iinsperms.Theadenylylcyclaseinhibitorcouldinhibittheincreaseof［Ca2+］iinducedbyE2orE2BSA(P<0.05).ConclusionsEstrogencanpromotethespermmotilityinfertilemen.Themechanismmaybeexplainedbythe［Ca2+］iincreaseandactivationofadenylylcyclasecausedbytheintegrat

7、ionofestrogenembranereceptoronhumansperm.【Keymotility；Ca2+；signaltransductionpatha公司；Ca2+荧光探针Fluo3/AM，购自MolecularProbeInc公司；人血清白蛋白(HSA)，购自成都蓉生药业有限公司；计算机辅助精子分析系统(CASA)为杭州麦迪公司产品，流式细胞仪(型号EPICSELITEESP)为美国Coulter公司产品。1.1.2精液来源与处理实验所用27例精液标本来自年龄25～40岁，身体健康有

8、正常生育史的成年男性志愿者，其近期精液常规各项指标符合（终浓度3μmol/L），5％CO2孵箱避光负载45min，500×g离心5min除去上清液，用无Ca2+、Mg2+的B，重悬精子至1×106/ml，采用流式细胞术检测精子内的荧光强度值以反映精子胞内Ca2+浓度的变化。1.3统计学分析实验数据均以x±s表示，用SPSS11.5统计学软件进行单因素方差分析及t检验评价组间差异，P<0.05为有统计学意义。2结果2.1E2对人精子运动参数的影响不同