丝裂霉素对人胃癌细胞谷胱甘肽转移酶表达的影响

丝裂霉素对人胃癌细胞谷胱甘肽转移酶表达的影响

ID:23527907

大小:53.00 KB

页数:6页

时间:2018-11-08

丝裂霉素对人胃癌细胞谷胱甘肽转移酶表达的影响_第1页
丝裂霉素对人胃癌细胞谷胱甘肽转移酶表达的影响_第2页
丝裂霉素对人胃癌细胞谷胱甘肽转移酶表达的影响_第3页
丝裂霉素对人胃癌细胞谷胱甘肽转移酶表达的影响_第4页
丝裂霉素对人胃癌细胞谷胱甘肽转移酶表达的影响_第5页
资源描述:

《丝裂霉素对人胃癌细胞谷胱甘肽转移酶表达的影响》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库

1、丝裂霉素对人胃癌细胞谷胱甘肽转移酶表达的影响  【关键词】丝裂霉素;胃癌;谷胱甘肽转移酶;免疫组织化学  【ABSTRACT】Objective:TostudythekillingfunctionofmitomycinongastriccancercellsandtheexpressionofGSTπ.Methods:Ashumangastriccancercellsitomycinicroscopeandtransmissionelectronmicroscopeafterstainingmunohistochemicalmethod

2、.Results:Themorphologyofgastriccancercellembraneandnuclear.Conclusion:Mitomyclinhasakillingfuctiontogastriccancercells,oneofmannersycin;Gastriccancer;GSTπ;Immunohistochemicalmethod化学治疗是对恶性肿瘤综合性治疗的一部分,丝裂霉素是临床常用的抗癌药之一,其作用效果临床已有报告,而对其作用途径,尤其是它对重要酶系的影响,尚未见报告。本实验采用细胞培养技术和免疫组织

3、化学技术,观察丝裂霉素(Mitomycin,MMC)对胃癌细胞谷胱甘肽转移酶(胎盘型,简称GSTπ)的影响,为探讨丝裂霉素的抗癌机制提供科学依据。  1材料和方法  11材料丝裂霉素注射液(Mitomycinforinjection)由浙江省海正药业股份有限公司生产(批号040901)。BGC823胃癌细胞株由北京肿瘤研究所提供;二氧化碳培养箱和RPMI1640培养液由实验中心提供。兔抗人GSTπ抗血清及SP试剂盒由北京中山生物技术公司提供。  12方法将5×104浓度的BCG823细胞接种于无菌96孔板和6孔板中,培养24h。在6孔板

4、中加入无菌盖玻片,使癌细胞附壁生长(爬片)。对照组不加入药物,实验5h组,即加入MMC15μl(00075mg),培养5h后收获,实验10h组则加药后培养10h。然后将培养液中细胞离心,25%戊二醛前固定。将附壁爬片的癌细胞培养液中分别加药5h、10h后取出盖片,用4%多聚甲醛固定,常规洗涤和SP免疫组织化学染色。其操作程序按试剂盒说明书进行。阴性对照PBS代替Ⅰ抗,阳性对照为已知人胃癌组织切片。  13统计学处理利用彩色图象分析仪软件进行图象分析。每组随机计数100个癌细胞,以灰度表示着色深浅(深者灰度值低,浅者灰度值高)。借助SPS

5、S软件进行方差分析,然后进行独立样本t检验。  2结果  免疫组化染色,GSTπ阳性物质呈棕黄色或黄色,分布在癌细胞质或少数细胞的核与质中,用药5h组胞核与胞质阳性物质均减少(见表1),其灰度升高(表示着色浅),并与对照组有显著性差异(P<001)。10h组生存细胞减少,只有生命力强代谢旺盛的部分细胞仍存活,所以这些细胞仍含GSTπ,但是与对照组相比含量减少。  表1丝裂霉素对胃癌细胞GSTπ表达灰度的影响(略)  注:△与对照组比较有显著性差异(P<001)  3讨论  丝裂霉素(Mitomycin或Mutamycin,M

6、MC)是抗癌抗生素类药物,是由轮生链霉菌培养液中提取的有效成分,其分子为C15H18N4O5[1]。临床上用于胃癌、肺癌、乳腺癌、肝癌和肠癌等化学治疗。为细胞周期非特异性药物,对G1晚期和S早期细胞更为敏感。本药进入体内在还原酶的作用下或体外其它途径作用下发生活化,活化后MMC才能够和DNA交叉联结或断链反应,改变DNA分子中的信息密码,从而抑制DNA复制,同时对RNA和蛋白质合成也有一定抑制作用[2,3]。本实验观察MMC对GSTπ基因表达的干扰作用主要是因为GST是一种具有多种生理功能的蛋白质,具有过氧化物酶和异物酶特性[3,4],

7、其主要功能:①它能够催化机体内有害物特性化合物与谷胱甘肽相结合;②它可以由非酶结合方式将体内各种潜在毒性化合物、致癌剂及亲脂性化合物从体内排除,从而达到解毒功能;③参与机体抗氧化和保护细胞内许多物质合成、存储和运转过程,如:对某些激素和胆红素转运和结合等。④抑制丝原活化蛋白激酶和细胞外信号调节激酶活性,从而阻断细胞凋亡途径[5]。机体受到外源性刺激诱导细胞癌变的过程中,GST也是呈高表达现象,如过去我们曾检测胃、肠癌,食道癌和乳腺癌时发现[6~8],正常胃肠、食道和乳腺组织GST是低表达状态,癌变后GST在癌组织中是呈高表达现象,GST

8、在上述癌组织中阳性率分别为:大肠癌684%、乳腺癌6170%、胃癌625%。本实验表明BGC823胃癌细胞中GSTπ也呈阳性表达,对照组细胞质着色深度略低于细胞核着色深度(见表1,色浅者数值大),丝裂霉素作

当前文档最多预览五页,下载文档查看全文

此文档下载收益归作者所有

当前文档最多预览五页,下载文档查看全文
温馨提示:
1. 部分包含数学公式或PPT动画的文件,查看预览时可能会显示错乱或异常,文件下载后无此问题,请放心下载。
2. 本文档由用户上传,版权归属用户,天天文库负责整理代发布。如果您对本文档版权有争议请及时联系客服。
3. 下载前请仔细阅读文档内容,确认文档内容符合您的需求后进行下载,若出现内容与标题不符可向本站投诉处理。
4. 下载文档时可能由于网络波动等原因无法下载或下载错误,付费完成后未能成功下载的用户请联系客服处理。