金钠多对体外缺氧致人大动脉内皮细胞分泌内皮素的影响

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1、金钠多对体外缺氧致人大动脉内皮细胞分泌内皮素的影响李鸣皋，马贵喜，韩磊，刘玉，李靖，蒙果，刘昕【关键词】；内皮缩血管肽类EffectsofGinatononhypoxiainducedendothelinsecretionfromhumanaorticendothelialcells　　【Abstract】　AIM:ToexploretheeffectsofGinatonatdifferentconcentrationsonthehypoxiainducedendothelin(ET)secretionfromculturedvascularendothe

2、lialcells(VECs).METHODS:CulturedVECsplehypoxiagroup,highconcentrationGinatongroup,moderateconcentrationGinatongroup,andloberattheheightof5000mfor30min.TheETcontentsinsupernatantofVECsbeforehypoxiaand0.5hafterhypoxia,6hafterhypoxiaaseasuredmunoassay.RESULTS:①SimplehypoxiapromotedVE

3、CssecretionofETandETcontentincreasedsignificantlyat0.5hafterhypoxiaandreachedthepeakat6h(P＜0.01).②GinatoninhibitedVECssecretionofETinducedbyhypoxia.Atthetimeof0.5hafterhypoxia,highconcentrationGinatonoreeffectivethanmoderateconcentrationandloeof6hand24hafterhypoxia,moderateconcent

4、rationGinatonoresignificantlyeffectivethanhighconcentrationandloculturedVECsandtheeffectsofmoderateconcentrationGinatonaremoreobviouspared高度、停留30min，对培养的血管内皮细胞进行缺氧.用放射免疫法测定缺氧前和缺氧后0.5,6,24h各组细胞培养液中内皮素含量.结果：①急性缺氧可显著促进血管内皮细胞分泌内皮素，缺氧后0.5h内皮素含量即显著升高，于缺氧后6h分泌内皮素含量最高.②金钠多能明显抑制缺氧促血管内皮细胞分泌

5、内皮素的作用，在缺氧后0.5h表现出高浓度金钠多强于中浓度和低浓度金钠多组，在缺氧后6和24h则中浓度金钠多的作用要强于高浓度和低浓度组.结论：金钠多能显著抑制缺氧促血管内皮细胞分泌内皮素的作用，且中浓度金钠多较高浓度和低浓度金钠多作用更明显.　　【关键词】　内皮，血管/细胞学；内皮缩血管肽类；金钠多；缺氧　　0引言　　缺氧是多种疾病和损伤发生发展过程中的中心环节之一.缺氧对血管内皮细胞（vascularendothelialcells,VEC）的结构和功能有着复杂和明显的影响，缺氧可刺激血管内皮细胞生成和释放内皮素（endothelin,ET）增加，血浆

6、ET含量明显增高.有关药物如内皮素受体拮抗剂、内皮素转化酶抑制剂及中药对血管内皮细胞分泌ET的影响有不少报道〔1〕，但是金钠多对缺氧所致血管内皮细胞分泌ET的影响尚未见报道.我们采用培养的人大动脉血管内皮细胞，通过低压舱模拟缺氧，分别观察缺氧对血管内皮细胞分泌ET的影响及不同浓度金钠多的保护作用.　　1材料和方法　　1.1材料　　低压舱（由本院高压氧治疗中心提供），内皮细胞采用由CBI公司提供的人大动脉血管内皮细胞体系，培养液及内皮细胞生长因子由CBI公司配套提供，金钠多(德国威玛舒培博士药厂)、内皮素放免试剂盒（由华英所提供）.细胞取回后按照常规方法进行

7、细胞复苏，调整细胞合适浓度，接种于75cm2细胞培养瓶中，放置于细胞培养箱中进行培养，待细胞长满瓶底后，用胰酶消化、传代.当细胞传至第3代时，将细胞接种于24孔细胞培养板中（接种密度为5000cell/cm2）,继续培养，待细胞生长满融合后，准备进行干预实验.　　1.2方法　　将培养的内皮细胞按每组8例样本分为5组：对照组、单纯缺氧组、缺氧加高、中、低浓度金钠多组.①对照组：为细胞培养液不加特殊试剂，也不受缺氧因素影响，但于缺氧组缺氧前后相对应的时间点取上清液100μL，待测定ET浓度；②单纯缺氧组：将单纯缺氧组置于低压舱内，上升至5000m高度，停留30

8、min，以造成细胞缺氧，缺氧后将细胞放回培养箱中继续培养，分别于缺