二阶导数光谱法测定银黄清口服液中总绿原酸含量

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1、二阶导数光谱法测定银黄清口服液中总绿原酸含量【关键词】银黄清口服液；,,总绿原酸；,,二阶导数光谱法　　摘要：目的建立二阶导数光谱法测定银黄清口服液中总绿原酸含量的方法。方法用二阶导数光谱法直接测定银黄清口服液中总绿原酸含量，于357.9nm波长处测定振幅D值。结果绿原酸在4.67~23.35μg・ml1范围呈良好线性关系；其回归方程D=0.7495×104C-0.1×10-4（r=0.9972）；平均回收率97.88%，RSD=2.43%(n=5)。结论该方法操作简单、准确，可用于测定银黄清口服液中总绿原酸含量。　　关键

2、词：银黄清口服液；总绿原酸；二阶导数光谱法　　DeterminationofTotalChlorogenicAcidinYinhuangqingOralLiquidbySecondOrderDerivativeSpectrophotometry　　Abstract：ObjectiveTodeterminethecontentoftotalchlorogenicacidinYinhuangqingoralliquid.MethodsSecondorderderivativespectrophotometryplitudein

3、ed.ResultsThechlorogenicacidshol1,theregressionequationethodissimpleandaccurate,andcanbeusedfordeterminationoftotalchlorogenicacidinYinhuangqingOralLiquid.　　Keyetry　　银黄清口服液是我院在传统验方基础上研制的新制剂，处方由黄芩、金银花、连翘、板蓝根、甘草等中药材组成，主治外感风热引起的发热、咳嗽、咽痛等疾病。金银花中富含绿原酸及其异构体（异绿原酸、新绿原酸、隐绿

4、原酸等），它们的理化性质与药理作用相似〔1〕。本品工艺提取方法能够将该类有机酸有效地提取出来，因此对银黄清口服液中总绿原酸进行质量控制研究是非常必要的。张蕙等〔2〕已证实金银花水提液中除了总绿原酸外，其余成分在352nm以上紫外吸收几乎没有。由于本品为中药复方制剂，不能直接用普通紫外分光光度法测定总绿原酸的含量。笔者经过实验后发现，采用二阶导数紫外分光光度法可不经分离直接测定银黄清口服液中总绿原酸（以绿原酸计）含量。　　1仪器与试药　　仪器UV1201型双光束紫外可见分光光度计（北京瑞利分析仪器公司），BP211D型电子天

5、平（德国SARTORIUS）；绿原酸对照品（中国药品生物制品检定提供）；银黄清口服液、阴性对照液（缺金银花）及蒸馏水均由本院制剂室提供。　　2方法与结果　　2.1测定条件及吸收光谱的选择　　2.1.1紫外扫描光谱及波长的选择分别称取绿原酸对照品、银黄清口服液及阴性对照液（缺金银花）、银黄清口服液适量，用蒸馏水溶解，稀释成适宜浓度，制成绿原酸对照液（缺金银花）、银黄清口服液适量，用蒸馏水溶解，稀释成适宜浓度，制成绿原酸对照液为（b液）、银黄清对照液（a液）、银黄清阴性对照液（缺金银花）（c液）在200~400nm范围内扫描。

6、扫描条件：光度模式为Abs，扫描模式为单一，扫描速度为快速，光谱带宽为2nm，采样间隔为0.1nm。结果见图1。由图1可见，c液对a液的干扰很大，无法直接通过紫外分光光度法测定总绿原酸的含量。　　2.1.2二阶导数光谱取上述A，B，C溶液，在200~400nm波长范围内进行扫描，完毕后直接进行数学变换，分别得到3种试液的二阶导数光谱。扫描条件同“2.1.1”，微分波长差为8；标尺因子为1。结果见图2。　　图1紫外扫描光谱图（略）　　图2二阶导数光谱图（略）　　由图2可见银黄清阴性对照液（缺金银花）在350.0~380.5n

7、m波长之间的振幅与零线基本重合，而银黄清口服液（a液）在二阶导数图谱357.9nm波长处有最大振幅，与绿原酸对照液（b液）相一致。因此，可选择357.9nm为测定波长，利用银黄清口服液在357.9nm处的（峰值-零）振幅值D对总绿原酸进行定量测定（以绿原酸计）。　　2.2精密称取于105℃干燥至恒重的绿原酸对照品23.35mg于100ml容量瓶中，加入蒸馏水溶解，并稀释至刻度，摇匀，使之成为绿原酸标准储备液。分别精密吸取该储备液2.0，4.0，6.0，8.0，10.0ml分别置于100ml容量瓶中，加入蒸馏水定容，制成浓度

8、（C）为4.67~23.35μg/ml的系列工作液，以蒸馏水为空白，分别在357.9nm波长处测定其二阶导数光谱的峰值-零振幅值D，以浓度C对D进行线性回归，得回归方程：D=0.7495×104C-0.1×104(r=0.9972)。表明绿原酸在4.67~23.35μg/ml浓度范围内，其二阶导数振幅值