枸杞对d半乳糖致衰老小鼠学习记忆影响

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1、枸杞对D半乳糖致衰老小鼠学习记忆影响【摘要】目的观察枸杞对D-半乳糖所致衰老小鼠学习记忆的影响。方法建立D-半乳糖致衰老小鼠模型，跳台实验检测其学习记忆能力，同时测定其大脑乙酰胆碱酯酶(AchE)活性，用黄嘌呤氧化酶法测定大脑超氧化物歧化酶(SOD)活性，硫代巴比妥法测定大脑丙二醛(MDA)含量，观察小鼠服用枸杞汁后上述指标变化。结果与D-半乳糖模型组比较，各实验组均可提高小鼠的学习记忆能力(P＜0.05或P＜0.01)，显著增加D-半乳糖所致衰老小鼠大脑SOD活性、降低MDA含量(P＜0.05或P＜0.01)，可显著升高大脑AchE活性(P＜0

2、.05，或P＜0.01)。结论枸杞能改善D-半乳糖所致衰老小鼠的学习记忆功能，其机制可能与枸杞的抗氧化自由基作用有关。【关键词】枸杞　　阿尔茨海默病(AD)是一种渐进性神经退行性疾病，其发病有增加的趋势〔1〕。枸杞(Fructuslycii)是我国传统的药材，它含有丰富的营养成分和药理活性成分。现代医学已证实，枸杞可调节免疫、延缓衰老和清除自由基等功能。本实验采用D半乳糖所致衰老小鼠模型，研究AD小鼠学习记忆能力、脑组织乙酰胆碱酯酶(AchE)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量的变化及枸杞对这些指标的影响，并分析其作用机制，

3、为临床应用提供理论依据。　　1材料与方法　　11试验动物及分组昆明小鼠雄性75只，体重(24g±2)g(包头医学院动物室)。随机分为5组，每组15只，即对照组，D-半乳糖模型组，低、中、高3个枸杞汁剂量组。饲养过程中对照组和模型组各死亡3只，枸杞汁剂量组各死亡2只。　　12药物与仪器枸杞(包头市奇力康医药公司)。D-半乳糖(上海源聚生物科技有限公司，批号030406)。AchE试剂盒、SOD试剂盒、MDA试剂盒(南京建成生物工程研究所)。752C紫外-可见分光光度计、721型分光光度计(上海第三分析仪器厂)。STT-2型跳台仪(中国医科院药研所

4、)；德国来卡2135型切片机、加样器(上海伟业有限公司)。离心机(北京医用离心机厂)；混匀器(上海伟业有限公司)。　　13D-半乳糖模型及给药方法除对照组给予生理盐水外，其他组每日均腹腔注射012g/(kgbl/(kgbl)、中剂量(075g/ml)、低剂量(0375g/ml)，对照组和模型组灌胃给予等容积的生理盐水，连续6周。枸杞汁制备：以枸杞子总体积的5倍量自来水冷浸3h，微沸1h×2次，合并滤液，文火浓缩制成，无菌条件下装瓶，置4℃冰箱备用。　　14方法　　141跳台实验造模后灌胃至4周后1h开始跳台实验〔2〕。　　14

5、2AchE、SOD、MDA的测定小鼠脑组织AchE活性用试剂盒方法；SOD活力采用黄嘌呤氧化酶法；MDA含量采用(TBA)法；脑组织蛋白质定量采用考马斯亮蓝(CBB-SDS)法。　　15统计分析采用SPSS100软件进行t检验。　　2结果　　21枸杞对小鼠跳台成绩的影响(表1)D半乳糖所致模型组，无论学习成绩和记忆成绩，与对照组比较，模型组小鼠的错误次数明显增多(P＜001)，学习成绩的反应期明显延长(P＜001)，记忆成绩的潜伏期明显缩短(P＜001)；与模型组比较各给药组小鼠学习记忆障碍有明显的改善(P＜005或P＜001)；

6、各用药组间比较以枸杞汁中剂量作用最为明显，但枸杞汁低、中、高剂量组间差异无统计学意义(P＞005)。　　22枸杞对小鼠大脑AchE、SOD、MDA各项指标的影响(表2)对实验组D半乳糖致小鼠脑组织AchE活性测定结果表明，模型组小鼠大脑中AchE减少，与对照组比较，差异有统计学意义(P＜001)，表明D半乳糖所致模型组，可以损伤胆碱能神经元，引起小鼠学习记忆障碍。与模型组比较，各给药组可显著升高D半乳糖所致的AchE活性下降(P＜005或P＜001)并基本达到对照组水平；模型组小鼠大脑中SOD活力明显降低，MDA含量明显增多，给予枸

7、杞汁后可明显提高SOD活性、降低MDA含量。　　表1枸杞对小鼠学习记忆的影响（略）　　注：与对照组比较，aP＜001；与模型组比较，bP＜005,cP＜001　　表2枸杞对小鼠脑组织AchE、SOD、MDA的影响（略）　　注：与对照组比较,aP＜001；与模型组比较,bP＜005,cP＜001　　3讨论　　胆碱能系统是正常认知功能中最为重要的神经递质系统，引起AD的生理生化机制目前还不清楚，与衰老致痴呆相关的因素很多〔3〕，AchE的异常可能是引起AD的一个重要因素。D半乳糖致小鼠脑组织AchE活性明显下降〔4〕，单胺氧化酶活性明显升

8、高。AD患者大脑皮层内胆碱乙酰基转移酶、AchE活性均下降〔5，6〕。已知胆碱能系统与学习记忆关系密切，Ach为促学习记忆