茄根酸性组分对脂多糖诱导的小鼠腹腔巨噬细胞核因子kb表达的影响

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1、茄根酸性组分对脂多糖诱导的小鼠腹腔巨噬细胞核因子kB表达的影响汪植，沈映君，叶红，宋利琼【关键词】茄根　　摘要:目的:探讨茄根酸性组分的抗炎机理。方法:以淀粉诱导小鼠腹腔巨噬细胞，用LPS为刺激剂，诱导NF-kB的表达，再用NF-kBP65的抗体与其结合，用流式细胞术测定巨噬细胞表面NF-kBP65亚单位表达的荧光强度，反映NF-kB活化程度。结果:LPS刺激12h后，NF-kBP65的表达明显增加，茄根酸性组分能显著抑制NF-kB的表达（P0.01）。结论:抑制NF-kB的活化，可能是茄根酸性组分发挥抗炎作用的主要机理之一。　　关键词:茄根;酸性组分;抗

2、炎;核因子kB;机理　　TheInfluenceoftheAcidicponentsofAubergineroottotheMurinePeritonealMacrophagesNF┐kBActivatedbyLipopolysaccharideAbstract:Objective:Researchontheanti-inflammatorymechanismoftheacidicponentsofaubergineroot.Methods:Inducedthemurineperitonealmacrophagesbythedissolubiltystar

3、ch，activatethemurineperitonealmacrophagesensuratethefluorescenceintensityetry.Results:After12hoursactivatedbyLipopolysaccharide，thodel，theacidicponentsofauberginerootsignificantlyreducecontentofthePGE2.Conclusion:TheacidicponentsofauberginerootsignificantlyinhibittheCOX2activities

4、.TheeffectofinhibittheCOX2，maybeamainanti-inflammatorymechanismfoftheacidicomponentsofaubergineroot.　　KeymatoryNuclearfacfor-kBMechanism　　茄根为土家族常用药物，具有祛风利湿、清热止血、散瘀消肿等功效。临床用于治疗牙痛、风湿痹痛、冻疮等〔1〕。酸性组分是茄根抗炎的主要有效部位，对多种炎症，如关节炎、牙周炎等具有良好的治疗效果。为探讨茄根酸性组分的抗炎机理，我们就茄根酸性组分对核因子kB（NF-kB）表达的影响进行了研究。　

5、　1实验材料　　药品:实验用茄根采自湖北省长阳土家族自治县蔬菜基地，待收获完茄子后采挖茄根，除去地上部分，洗净，切成厚片晒干备用。茄根经三峡大学植物学教研室陈芳清教授鉴定为茄科植物SolamummelongenaL。的根。碱提酸沉法制备酸性组分备用。DMEM培养基（BIBCO），新生小牛血清（BIBCO），脂多糖（LPS）（Sigma），花生四烯酸（Sigma），可溶淀粉（浙江湖州市菱湖食品化工厂）。动物:C57BL/6小鼠，全雄，体重20～25g;由华中科技大学实验动物中心提供，合格证号:TJLA-2003-41。　　仪器:BeckMancoulterE

6、PICSXL-4型流式细胞仪（美国贝克曼仪器公司），SanyoMc0175型CO　　2培养箱（日本三洋公司），BCM-1000型超净工作台（苏州净水仪器设备厂），石英SZ-93型自动双重纯水蒸馏器（上海亚荣生化仪器厂），电子天平MA200（上海第二天平仪器厂），YXQ-SG41.280型电热手提式压力蒸汽灭菌器（上海医用核子仪器厂），KQ-500B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），细胞培养板，0.22μm过滤器（华美生物工程公司）。　　2实验方法及结果　　2.1含药血清的制备〔2〕　　in，0.22μm滤膜除菌，加入DMEM培养基，配成20%含药血

7、清培养液，-20℃保存备用。　　2.2腹腔巨噬细胞的培养　　C57BL/6小鼠腹腔注射1%的可溶性淀粉，每只lml。3天后断头处死。腹腔注射Hank's液8ml/只，无菌条件下洗出腹腔细胞1000r/min离心8min，细胞用Hank's液洗1次，作细胞计数，用含10%新生小牛血清的DMEM培养基调整细胞浓度至106cell/m1。将细胞接种于4孔培养板中，每孔3ml，37℃，5%CO2。培养箱内培养6h。　　2.3NF-kB的测定〔3〕　　用Hank's液洗去末贴壁细胞，加入不含新生小牛血清的培养基，饥饿12h。换液，于培养板中加入3ml含药血清培养基，

8、分组如下:阴性对照组、模型对照组加入含正常动物血清的培养基，阳性对