高效液相色谱法同时测定益津降糖口服液中人参皂苷r

《高效液相色谱法同时测定益津降糖口服液中人参皂苷r》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、高效液相色谱法同时测定益津降糖口服液中人参皂苷R【摘要】　　目的测定了益津降糖口服液中人参皂苷Rg1及Re的含量。方法用高效液相色谱法，以ODSC18柱（150mm×4.6mm，5μm）为固定相，乙腈-0.05%磷酸溶液（99∶400）为流动相，检测波长为203nm，流速为1.0ml·min-1。结果人参皂苷Rg1在0.16～6.4μg范围内，人参皂苷Re在1.225～4.9μg范围内呈现良好线性关系，相关系数Rg1：r=0.9999；r=0.9996。平均加样回收率Rg1=96.63%；Re=95.20

2、%，Rg1的RSD为1.34%（n=6）；Re的RSD为1.14%（n=6）。结论方法简便、准确、重复性好。【关键词】益津降糖人参皂苷Rg1人参皂苷Re高效液相色谱法含量测定　　益津降糖口服液是吉林敖东药业集团延吉股份有限公司生产，处方由人参、白术、茯苓、仙人掌、甘草与几种辅料组成。具有健脾益气，生津止渴。用于气阴两虚引起的消渴病等症。方中人参含有多种皂苷类，生物碱类化合物，其中人参皂苷为该制剂的主要活性成分,参照2005年版《中国药典》（Ⅰ部）“人参叶”项下条件［1］及相关文献［2］。采用高效液相色谱法

3、，以乙腈、磷酸为流动相，测定其含量，该法简便、准确、精密度高、重现性好，为控制质量标准提供了可靠的依据。　　1器材　　1.1仪器　　日本岛津LC10Avp系列高效液相色谱仪,包括DAD检测器，ChemStation色谱工作站(美国Agilent公司)；AE163型十万分之一电子分析天平（瑞士Mettler公司）。　　1.2试药　　益津降糖口服液由吉林敖东药业集团延吉股份有限公司提供（批号060601，060602，060603，061201，061202，061203，070501，070502，070

4、503，070504），对照品，人参皂苷Re（0754200216），人参皂苷Rg1（0703－200322）均由中国药品生物制品检定所提供；甲醇，乙腈为色谱纯，水为纯净水，其它试剂均为分析纯。　　2方法与结果　　2.1色谱条件　　色谱柱：KromasilC18柱（150mm×4.6mm，5μm）；流动相：乙腈0.05%磷酸溶液（99∶400）；检测波长203nm；柱温40℃；流速1.0ml/min；灵敏度0.08AUFS。　　检测波长的选择：用UV2401PC型紫外分光光度仪，对人参皂苷Re对照品

5、，在200～400nm波长下进行紫外扫描，结果在203nm波长处有最大吸收，因此选择203nm为检测波长。理论塔板数按人参皂苷Rg1，人参皂苷Re峰计算均不低于2000。　　2.2对照品溶液的制备　　精密称取经110℃干燥至恒重人参皂苷Rg1及Re对照品各10.1mg，加甲醇溶解，并稀释至刻度，制成每毫升中各含0.3mg的人参皂苷Rg1及Re混合溶液，即得。　　2.3供试品溶液的制备　　精密量取供试品5ml，加水15ml摇匀，加氯仿萃取2次，20ml/次，弃去氯仿层，水层用水饱和正丁醇萃取4次，20ml/

6、次，合并正丁醇液，正丁醇层用氨试液洗涤2次，20ml/次，洗涤液层再用水饱和正丁醇20ml振摇提取1次，合并前后两次正丁醇液，蒸干，残渣用甲醇溶解并移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用0.45μm微孔滤膜过滤，即得。　　2.4阴性供试品溶液的制备　　按处方比例制备不含人参皂苷的阴性样品，按“2.3”项下方法制备成阴性供试品溶液。　　2.5系统适应性实验　　分别精密吸取“2.2”，“2.3”，“2.4”项下溶液各10μl，按“2.1”项下色谱条件进样。结果，阴性供试品溶液摘在与人参皂苷Rg1及人参皂苷R

7、e对照品相同保留时间处未见明显色谱峰，故认为辅料等对主药的测定无干扰。色谱见图1。　　2.6线性范围的考察　　精密量取人参皂苷Rg1（0.320mg/ml），人参皂苷Re（0.245mg/ml）对照品混合溶液5，7.5，10，15，20μl注入高效液相色谱仪中。测定其峰面积，人参Rg1峰面积分别为590523，888502，1189789，1815921，2400446。并以峰面积值（A）对进样量（C）进行回归，得标准曲线方程，以峰面积值（A）对进样量（C）作图，得一直线，A=121258.0931C-1

8、7431.871，r=0.9999。人参Re峰面积分别为472305，700232，938757，1418136，1835231。以峰面积值（A）对进样量（C）作图，得一直线，A=91613.41034C-19379.18103，r=0.9996。以上结果表明，在0.16～6.4μg范围内，人参Rg1峰面积值与进样量有良好的线性关系；在1.225～4.9μg范围内，人参Re峰面积值与进样量有良好的线性关系。　　2.7精密度实验