rna干扰bcl2基因表达对人胆囊癌细胞株gb

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1、RNA干扰Bcl2基因表达对人胆囊癌细胞株GB【摘要】目的探讨RNA干扰Bcl2基因表达对人胆囊癌细胞GBCSD裸鼠体内成瘤能力和移植瘤生长的影响。方法本课题分为成瘤能力和治疗两个方面。成瘤能力：用针对Bcl2基因小干扰RNA(siRNA)真核表达载体稳定转染的人胆囊癌细胞GBCSD和人胆囊癌细胞GBCSD分别制作裸鼠模型，观察移植瘤的生长情况，计算肿瘤成瘤率、生长体积、生长率。治疗实验：制作人胆囊癌细胞GBCSD移植瘤模型，随机分为pSilencerTMEGFPsh515组(实验组)、pSilencerTMEGFPshCon组(空载体阴性对照组)和正常对照组。

2、实验组用Bcl2基因的siRNA真核表达载体多点注射于移植瘤周围，空载体阴性对照组用空载体多点注射于移植瘤周围，正常对照组不作处理，观察移植瘤的生长情况，计算肿瘤生长体积、生长率。6周后处死裸鼠，剥离瘤体组织进行称重，并采用免疫组化检测Bcl2蛋白的表达。结果①成功地建立裸鼠人胆囊癌GBCSD细胞的动物模型；②成瘤能力：人胆囊癌细胞GBCSD组和Bcl2siRNA稳定转染细胞组成瘤率分别为100%、60%，瘤体平均体积分别为(1914.6±125.0)mm3、(629.7±78.9)mm3，平均生长率分别为45.58%、14.99%，瘤体重量分别为(2.24±0.33)

3、g、(0.77±0.12)g，两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)；③治疗实验：实验组、空载体阴性对照组及正常对照组瘤体平均体积分别为(729.7±66.6)mm3、(1493.2±98.9)mm3、(1548.67±101.0)mm3，瘤体平均重量分别为(0.82±0.10)g、(1.68±0.21)g、(1.90±0.25)g，平均生长率分别为18.711%、38.286%、39.709%。实验组与空载体阴性对照组及正常对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)，而空载体阴性对照组与正常对照组比较无明显差异。结论针对Bcl2基因siRNA真核表达载体转染

4、人胆囊癌GBCSD细胞可以有效降低Bcl2基因的表达，该基因沉默后肿瘤细胞增殖受到抑制，体内成瘤能力下降，瘤体生长减慢。【关键词】胆囊癌；Bcl2基因；RNA干扰；移植瘤；基因治疗；裸鼠ABSTRACT:ObjectiveToinvestigateediatedBcl2genesilencecandecreasethegallbladdercarcinomaxenograftformationrateandinhibitgroice.MethodsInthexenograftformationabilitygroup,theBcl2siRNAsacell.Transf

5、ectedgallbladdercarcinomaandgallbladdercarcinomaicehypodermicallytoformagallbladdercarcinomatumor.TheformationrateandvolumeofthetumorseasuredandthetumorgroalmodelsofhumangallbladdercarcinomainnudemousebodyicelydividedintopSilencerTMEGFPsh515group,pSilencerTMEGFPshCongroup,andnormalcontrolgr

6、oup.Aftertheformationoftumorknot,siRNAexpressingplasmidspSilencerTMEGFPsh515andpSilencerTMEGFPshConorvolumeeasuredandtumorgroiceorsmunohistochemistry.ResultsThenudemousemodelofhumangallbladdercancerxenografttumorationability:ThexenograftformationrateofgallbladdercarcinomaandBcl2siRNAtransf

7、ectedgallbladdercarcinomaorvolumeingallbladdercarcinomagroupandtransfectedgallbladdercarcinomagroupm3and(629.7±78.9)mm3;thegroororvolume,agroupdecreasedsignificantlyorvolumeinpSilencerTMEGFPsh515group,pSilencerTMEGFPshCongroupandcontrolgrou