应用响应曲面法优化紫茎泽兰中黄酮的提取工艺

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1、应用响应曲面法优化紫茎泽兰中黄酮的提取工艺：杨郭颜杰马燮唐楷杨强强【摘要】目的利用响应曲面法研究从紫茎泽兰中提取黄酮的最佳工艺条件。方法使用单因素实验方法考察乙醇浓度，提取温度，料液比以及提取时间对黄酮得率的影响，使用响应曲面法优化提取工艺。结果最优的工艺条件为：固液比为1∶30(g∶ml)，提取时间为2.6h，乙醇浓度为50%，提取温度为64℃。结论使用响应曲面法能合理的优化紫茎泽兰中黄酮的提取工艺，为紫茎泽兰的综合利用提供参考。【关键词】紫茎泽兰;黄酮;响应曲面法　　Abstract：ObjectiveToopt

2、imizetheextractionconditionforEupatoriumadenophorumSprengbyresponsesurfacemethodology.Methodsentalmethodtostudytheinfluenceofmassconcentrationofethanol,extractiontemperature,solid-liquidratioandextractiontime,andusedtheresponsesurfacemethodologytooptimizetheext

3、ractiontechnique.ResultsTheoptimalconditionl),theextractiontimeasscontractionofethanolperatureentalmethodcanoptimizethetechniqueadenophorumspreng.　　KeyadenophorumSpreng;Flavonoids;Responsesurfacemethodology　　紫茎泽兰EupatoriumadenophorumSpreng是20世纪50年代左右从东南亚传入我国的有害

4、杂草，广泛分布于云南、贵州、四川、广西、西藏等地。现在紫茎泽兰已成为我国危害最为严重的外来入侵物种之一，因此各地在加强控制紫茎泽兰蔓延措施的同时，也展开对其各方面的研究，力图变害为宝[1，2]。　　据文献报道，紫茎泽兰的茎枝、叶和花中富含黄酮类物质。黄酮物质具有抗氧化、抗病毒、抗炎等生理功能[3]。因此研究从紫茎泽兰中提取黄酮类化合物对紫茎泽兰的综合利用具有一定的参考价值。本实验旨在探索从紫茎泽兰中提取黄酮类化合物的优化条件，通过二次回归正交旋转组合设计对其优化，为工业生产及科学研究等工艺操作提供参考。　　1仪器与药

5、品　　1.1仪器101A-1E型电热鼓风干燥箱，上海安亭科学仪器有限公司产品;SHZ-D(Ⅲ)型循环水式真空泵，巩义市英峪予华仪器厂产品;WFZVV-2000型紫外可见分光光度计，尤尼柯(上海)仪器有限公司产品;AR1140电子分析天平，梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司产品;80-2离心机，常州国华电器有限公司产品。W-0系列恒温水(油)浴锅，上海申顺生物科技仪器有限公司产品。　　1.2药品原料采于自贡双溪水库经鉴定为紫茎泽兰，粉碎后备用;无水乙醇，亚硝酸钠，硝酸铝，氢氧化钠，石油醚均为分析纯;芦丁(对照品)，国药

6、集团化学试剂有限公司。　　2方法　　2.1黄酮的检测方法以芦丁为标准品用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH显色法测定总黄酮的含量[4]。得回归方程：Y=-0.00211+11.05606X，r=0.999。　　2.2单因素实验分别考察乙醇浓度为40%，50%，60%，70%，80%，提取温度为50℃，60℃，70℃，80℃，料液比为1∶5，1∶10，1∶20，1∶30，提取时间为0.5，1，2，3，4h对紫茎泽兰中总黄酮含量的影响。　　2.3回归正交组合设计根据考察的因素数和零水平的试验次数确定星号臂值r为1.4

7、71。因素水平编码表见表1。　表1回归正交设计因素水平编码　　2.4提取方法称取一定量的紫茎泽兰粉末于圆底烧瓶中，按照实验预先安排的因素和水平用一定浓度和体积的乙醇溶液提取，将提取液趁热过滤后，转入分液漏斗中用石油醚萃取3次，将下层清液转入容量瓶中，并用60%的乙醇溶液定容至刻度线作为待测液，取一定量待测液用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH显色法在560nm处测定吸光度并计算出提取率。　　3结果　　3.1单因素实验结果　　3.1.1料液比对提取率的影响见图1。从图1可以看出，料液比越小提取率越高，当料液比为1∶

8、30(g∶ml)时提取率最高。有此可见，在实验范围内，增加溶剂用量能显著提高提取率，但提取率的增幅越来越小，因此没有继续提高溶剂用量。　　图1料液比对提取率的影响　　3.1.2提取时间对提取率的影响见图2。从图2可以看出，提取时间为3h提取率最高，当提取时间再增加，提取率明显下降。　　图2提取时间对提取率的影响　　3.1.3乙醇浓度对提取率的影