喉癌pcna和survivin的表达与肿瘤化疗敏

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1、喉癌PCNA和survivin的表达与肿瘤化疗敏【摘要】目的观察喉癌组织PA和survivin的表达水平与肿瘤化疗敏感性的关系。方法随机选取36例喉癌，给予顺铂、5氟尿嘧啶和平阳霉素为方案联合化疗，取各例在治疗前的喉癌活检组织的石蜡标本，用免疫组化检测PA和survivin的表达情况，分析其表达水平与肿瘤化疗敏感性的关系。结果喉癌组织中PA表达阳性者对化疗的敏感性明显高于PA阴性表达者(90.0%vs37.5%，P<0.01);survivin表达阳性的喉癌组织与表达阴性的喉癌组织对化疗的敏感性则差异

2、无统计学意义(65.2%vs69.2%，P>0.05)。结论PA的表达可能增强喉癌对化疗的敏感性，而survivin的表达对喉癌化疗敏感性可能无影响。【关键词】喉癌;化学治疗;PA;survivin;化疗敏感性　　Abstract:ObjectiveToobservetherelationshipsbetosensitivityinlaryngealcarcinoma.MethodsThirtysixpatientsareceivedchemotherapyenofcisplatin,52fluoro

3、uracilandbleomycin,andtheirbiopsyspecimensmunohistochemicalmethod.ResultsThechemosensitivityosensitivitybetosensitivityoflaryngealcarcinoma.　　Keya;chemotherapy;PA;surviving　　喉癌以手术治疗为主，并配合术前或术后放、化疗来缩小切除范围，以保全患病器官的功能和扩大手术的可行性[1]，然而喉癌对化疗的敏感性有所不同。要实现依据患者及癌肿对化疗敏

4、感性的不同而制定不同的个体化治疗方案，首先必须找出一种快速、准确、灵敏的指标预测不同个体喉癌患者对化疗的敏感性，才能以此为依据制定相应的个体治疗方案。本研究拟随机选取喉癌病例，给予顺铂、5氟尿嘧啶和平阳霉素联合化疗，并取各例在治疗前的喉癌活检组织的石蜡标本，用免疫组化检测PA和survivin的表达情况，从而探讨PA和survivin的表达对喉癌化疗敏感性的影响。　　1资料和方法　　1.1观察对象　　随机选取初诊为喉癌的患者36例，组织病理学证实均为鳞状上皮癌，其中高分化2例，低分化29例;男30例，女6例

5、，平均年龄(60.0±8.1)岁。取活检前全部病例均未接受任何治疗。按照国际抗癌协会TNM分期的方案，36例中Ⅰ期6例，Ⅱ期15例，Ⅲ期9例，Ⅳ期6例。　　1.2免疫组化染色　　取喉部肿瘤活检标本，分为2份，其中1份送组织病理学检查证实喉癌的诊断，另1份作免疫组织化学检测(下称免疫组化)。采用肾癌组织为阳性对照标本。将组织作厚度为5μm的切片，经脱蜡等常规处理后，其中1张切片做HE染色，另1张做免疫组化用。简单的免疫组化的操作步骤如下：对切片加入1%H2O2甲醇溶液，抑制内源性过氧化物酶;在磷酸缓冲液(PB

6、S)中洗5min，共3次;滴加3%的非免疫马血清，在37℃保温20min，阻断非特异性免疫结合反应;在PBS中洗涤，方法同前;滴加抗PA或survivin单克隆抗体(SantaCruz产品)，稀释度为1∶50溶液，37℃温育60min后放在4℃冰箱中过夜;次日按前法用PBS洗涤，再滴加生物素化羊抗鼠IgG单克隆抗体(北京中山生物技术有限公司产品，1∶50稀释)，在37℃中保温40min;按前法PBS洗涤后滴加ABC复合物(北京中山生物技术有限公司产品，1∶50稀释)，37℃保温40min;按前法用PBS洗涤，

7、滴加新鲜配制的酶底物二氨基联苯二胺盐酸盐显色，最后用苏木素轻度复染。阳性对照标本，按上述步骤染色。阴性对照标本除以PBS代替第一抗体外，其它步骤与被测标本相同。　　结果判断：光镜下观察到细胞核或胞浆内出现红棕色颗粒为阳性(PA在胞核，survivin在胞浆和胞核)，不染色为阴性。在切片四角和中央各选一高倍视野，各计数200个细胞。阳性细胞数≥10%者界定为阳性病例，阳性细胞数<10%者为界定阴性病例。　　1.3化学治疗　　顺铂20～25mg/m2，静脉滴注，每天1次，共3d;甲酰四氢叶酸钙100mg，静

8、脉滴注，每天1次，共5d;5氟尿嘧啶500～750mg/m2，静脉滴注，每天1次，共5d;平阳霉素8mg溶于20mL生理盐水内，静脉推注，每天1次，共4d。每月循环1次，共3个月。　　患者的化疗疗效按RECIST[2]评价标准。完全缓解(CR)：所有目标病灶消失，无新病灶出现，肿瘤标记下降至正常，并维持4周;部分缓解(PR)：所有(一个或多个)基线目标病灶最长径总和减少≥30%，并维持4周;疾病稳