pcna、bcl2和bax在喉癌组织中的表达及其意义

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1、PCNA、Bcl2和Bax在喉癌组织中的表达及其意义：李正贤，刘庚勋，刘阳云，颜美荣【摘要】目的检测喉鳞状细胞癌组织中PA、Bcl2和Bax的表达水平，探讨PA、Bcl2和Bax在LSCC发病机制中的作用。方法采用免疫组化Elivision法检测30例喉鳞状细胞癌、10例声带非典型增生中PA、Bcl2和Bax的表达水平。结果30例喉鳞状细胞癌中PA、Bcl2和Bax的阳性表达率分别为96.6%(29/30)，93.3%(28/30)和60%(18/30)，声带非典型增生中PA、Bcl2和Bax的阳性表达率分别为60%(6/10)，30%(3/10)和

2、70%(7/10)。PA和Bcl2阳性表达两组间差异有统计学意义，P<0.05，而Bax阳性表达两组间差异无统计学意义，P>0.05。结论喉鳞状细胞癌的发生发展可能与PA的高表达和Bcl2与Bax表达失衡有关，可能是细胞异常增生和凋亡失衡的共同结果【关键词】PA；Bcl2；Bax;喉肿瘤;鳞状细胞癌；凋亡；免疫组织化学Abstract：ObjectiveTostudytheexpressionsofPA,Bcl2andBaxinlaryngealsquamouscellcarcinoma(LSCC)andtheirroles.MethodsI

3、mmunohistochemicalElivisionmethodinetheexpressionsofPA,Bcl2andBaxin30casesofLSCCand10casesofvocalcordsatypicalhyperplasia(VCAH).ResultsThepositiveratesofPA,Bcl2andBaxaybeapositivefactorinthepathogenesisofLSCC.ItissuggestedthatLSCCdevelopmentmayresultfromacooperationofabnormalproli

4、ferationandunbalancedapoptosis.Key;squamouscellcarcinoma;apoptosis;immunohistochemistry喉鳞状细胞癌（LaryngealsquamouscellCarcinoma，LSCC）的形成是一非常复杂的过程，与多个基因或多个分子水平变化密切相关。细胞失控性增殖与凋亡异常可能是肿瘤发生的原因之一。我们应用免疫组织化学Elivision法检测LSCC组织中凋亡相关基因Bcl2、Bax和表示细胞增殖指标的PA的表达,旨在探讨PCAN，Bcl2和Bax基因产物在LSCC发病机制中的作用。为

5、LSCC的基因治疗提供新依据。1资料与方法1.1一般资料选择本院1995—2005年门诊及住院的30例初发的进行期LSCC患者的手术标本。本组病例中男27例，女3例,平均年龄57.3岁，临床分型：声门上型3例，声门型25例，声门下型2例；临床分期按国际抗癌协会1997年修订的TNM分类及分期：T14例，T215例，T39例，T42例；N019例，N17例，N24例；Ⅰ期2例，Ⅱ期19例，Ⅲ期6例，Ⅳ期3例；组织学分级：高分化鳞癌18例，中分化鳞癌7例，低分化鳞癌5例。对照组为同期手术的10例声带非典型增生（vocalcordsatypicalhyperplasi

6、a，VCAH），平均年龄45.6岁。标本经10%甲醛固定,常规脱水、石蜡包埋。1.2方法标本经固定后，常规脱水石蜡包埋，作3μm连续切片，分别进行HE染色和免疫组织化学染色。切片脱蜡至水化，3％过氧化氢孵育10min，消除内源性过氧化物酶活性，蒸馏水冲洗，PBS浸泡3×2min，微波炉抗原修复（95～98℃），自然冷却至室温，加入即用型Bcl2、Bax和1：100PA单克隆抗体，37℃孵育30min，或4℃过夜，用普通小鼠IgG及PBS代替一抗作阴性及空白对照，PBS冲洗3×2min，滴加增强剂（A），37℃孵育30min，PBS冲洗3×2min，滴加生物素聚

7、合物（B），37℃孵育30min，PBS冲洗3×2min。二氨基联苯胺显色，苏木素复染，中性树胶封片，显微镜观察照相。1.3染色结果判断阳性细胞为呈棕黄色颗粒的阳性反应产物。每张切片在高倍显微镜下(200倍)随机选择5个视野，计算每个视野阳性细胞率，取平均值作为该标本的阳性细胞率。表达结果分为阴性（-）：无阳性细胞；弱阳性（+）：阳性细胞率<50%；强阳性（++）：切片中阳性细胞率>50%。1.4统计学方法结果应用χ2检验进行统计学分析。所有数据在SPSS11.0统计软件上进行，以P<0.05为差异有统计学意义。2结果2.1Bcl2、Bax在

8、LSCC及VCAH中的表