坐骨神经周围注射可乐定对cci大鼠促炎性细胞因子

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1、坐骨神经周围注射可乐定对CCI大鼠促炎性细胞因子【摘要】目的：观察损伤坐骨神经周围注射可乐定对慢性坐骨神经结扎模型(chronicconstrictioninjury，CCI)大鼠促炎性细胞因子表达的影响，探讨α2-肾上腺素受体激动剂是否对已经形成的神经病理性疼痛产生作用。方法：雄性SD大鼠32只，随机分为4组，每组8只。Sham组：只分离皮肤、肌肉，不结扎坐骨神经;Sal组：形成CCI后注射生理盐水组;Clo组：形成CCI后注射可乐定组;Clo+Yo组：形成CCI后注射可乐定和育亨宾组。在注射药物3d后急性处死动物，取患侧脊髓L4、L5、L6背根神经节采取全自动化学发光法检测TNF-

2、α和IL-6浓度。结果：术后从7d开始CCI大鼠脊髓背根神经节TNF-α和IL-6浓度有明显增高。损伤坐骨神经周围注射可乐定能明显抑制CCI引起的脊髓背根神经节TNF-α和IL-6的表达(P<0.01)。结论：损伤的坐骨神经周围注射可乐定可以降低促炎性细胞因子的表达。【关键词】可乐定;外周注射;CCI大鼠;神经病理性疼痛;TNF-α;IL-6　　Abstract　Objictive:ToassesstheeffectofperineuralclonidineontheexpressionofTNF-αandIL-6intheratsaleSDratslydividedintofo

3、urgroups(18foreach):shamgroup,Salgroup(CCI+saline),Clogroup(CCI+clonidine)andClo+Yogroup(CCI+clonidine+yohimbin).TheratsedicinementionedaboveandspinalcordDRGofL4,L5,L6iningtheconcentrationofTNF-αandIL-6ofDRGintheratsaticluminescenttechnique.Results:TheratsofCCIgroupdemonstratedsteadymechanicalan

4、dheathyperaglsiafromtheseventhdayaftertheoperation.TherearkableincreaseintheconcentrationofTNF-aandIL-6inDRGfromthe7thdayaftertheoperation.PerineuralinjectionofclonidinecouldsuppresstheexpressionofTNF-αandIL-6causedbyCCIintheDRGofCCIrats(P<0.01).Conclusion:Perineuralinjectionofclonidinemodula

5、tesproinflammatorycytokinesexpressioninCCIrats.　　Keya公司。　　1.2　方法　　1.2.1　动物分组　随机将32只大鼠分为4组,每组8只。Sham组：只分离皮肤、肌肉，不结扎坐骨神经;Sal组：坐骨神经结扎后7d注射生理盐水;Clo组：坐骨神经结扎后7d注射可乐定组;Clo+Yo组：坐骨神经结扎后7d注射可乐定和育亨宾组。　　1.2.2　CCI模型的建立　依照Ben方法，大鼠腹腔注射10%水合氯醛(50mg/kg)麻醉后，在一侧后肢剪毛消毒,在股骨外侧纵形切开皮肤,顺肌纹钝性分离肌肉,暴露坐骨神经,游离周围组织,用3.0丝线结扎坐骨神

6、经中段,使神经外膜轻度凹陷,但不阻断血供,缝合皮肤。假手术组只钝性分离肌肉,暴露坐骨神经,游离周围组织，不结扎坐骨神经。术后7d以ML生理盐水、1mL盐酸可乐定注射液(150μg/kg)和1mL盐酸可乐定注射液(150μg/kg)、盐酸育亨宾注射液(220μg/kg)和生理盐水混合液吸入1mL注射器。依照先前文献所示实验方法，在大鼠的大转子和坐骨结节间皮肤进针，然后向前内侧前进，沿坐骨神经走行扇形注射药液。在预试验中注射大鼠相同剂量的2%利多卡因会使95%受试大鼠产生短暂的单侧肢体麻木，证实药物注射在神经周围且发挥作用。　　1.2.4　TNF-α和IL-6的测定　32只动物在注射药物3

7、d后，完成最后行为学测试，使用10%水合氯醛麻醉动物，断头宰杀。收集4组每个动物患侧的L4、L5、L6的背根神经节(dorsalrootganglion，DRG)。所有样本都被收集到1.5mL的聚丙烯试管(无热源、经DNΑ酶和RNΑ酶处理)，称重后立即放入干冰，随后所有收集的组织都以-80℃温度保存以待分析。以每毫克组织10μL的比率加入正常细胞培养液和10%灭活的牛血清，在冰浴中以超声匀浆器匀浆。然后以1300×g速度离心，持续15min，温