复方当归注射液中羟基红花黄色素a和阿魏酸的含量测

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1、复方当归注射液中羟基红花黄色素A和阿魏酸的含量测【摘要】目的运用高效液相色谱法测定复方当归注射液中的羟基红花黄色素A和阿魏酸的含量。方法色谱柱为依利特HypersicODS2（4.6mm×200mm，5μm），测定阿魏酸的流动相为甲醇-0.4%醋酸水（30∶70），其检测波长322nm；测定羟基红花黄色素A所用流动相为甲醇-0.6%醋酸水（15∶85），其检测波长403nm。柱温25℃，流速1ml/min。结果阿魏酸在4.44～266.4μg/ml之间与峰面积呈线性关系;羟基红花黄色素A在4.508～360.64μg/ml之间与峰面积呈线性关系;测得阿魏酸平均回收率为104.34%，RSD

2、为2.77%；羟基红花黄色素A平均回收率为99.26%，RSD为2.20%。结论该方法简便快捷，重复性好，可用于复方当归注射液中羟基红花黄色素A和阿魏酸的含量测定。【关键词】复方当归注射液；羟基红花黄色素A；阿魏酸；高效液相色谱法　　Abstract：ObjectiveTomakethedeterminationofpoundangelicainjectioninthequalitystandardmoreperfectly.MethodsUsingHPLCn，themobilephaseofferulicixtureofmethanol-entAixtureofmethanol-l/mi

3、n，theUVdetectionand403nm，andthetempetatureentAsholand4.508～360.64μg/mlrespectively.Theaveragerecoveryethodissimple，convinentandrepeatable，andcanbeappliedtothequalificationcontroloftheoxhydryl-saffloentAandFerulic.　　KeyentA；Ferulic　　复方当归注射液系以当归、川芎、红花3味中药为原料。临床上主要用于治疗痛经、经闭、跌扑损伤等。《中国药典》2005版规定采用高效液相色

4、谱法测定阿魏酸的含量，本文通过高效液相法不仅对《中国药典》规定成分阿魏酸进行了含量测定，同时还对红花当中的羟基红花黄色素A也进行了定量研究和方法学考察，便于更全面地控制复方当归注射液的质量。现报道如下。　　1仪器与材料Agilent1200色谱系统(DAD检测器)，阿魏酸对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110773-200611），羟基红花黄色素A(中国药品生物制品检定所，批号：111637－200503)，复方当归注射液（桔都制药厂），甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。　　2方法与结果［1～3］　　2.1色谱条件的选择　　2.1.1流动相的选择分别考察了甲醇-水、乙腈-水和甲醇-醋

5、酸水几种系统，发现阿魏酸和羟基红花黄色素A未加酸梯度洗脱时，分离效果都不理想，峰形拖尾严重，无法达到基线分离；使用甲醇-醋酸水体系梯度洗脱，可使各色谱峰达到较好的分离，峰形较好。　　2.1.2检测波长的选择结合相关文献及DAD图谱，选择322nm为阿魏酸，403nm为羟基红花黄色素A的检测波长。　　2.1.3色谱条件的确定阿魏酸选定的色谱条件：色谱柱为依利特HypersicODS2（4.6mm×200mm，5μm），流动相为甲醇-0.4%醋酸水（30∶70），检测波长322nm，柱温25℃，流速1ml/min，进样量10μl。羟基红花黄色素A选定的色谱条件：色谱柱为依利特HypersicO

6、DS2（4.6mm×200mm，5μm），流动相为甲醇-0.6%醋酸水（15∶85），检测波长403nm，柱温25℃，流速1ml/min，进样量10μl。　　2.2溶液的制备　　2.2.1对照品溶液的配制称取阿魏酸对照品适量，精密称定，用甲醇制成每毫升含栀子苷44μg的溶液，得阿魏酸对照品溶液，同样条件下制成每毫升含羟基红花黄色素A45μg的溶液，得羟基红花黄色素A对照品溶液。　　2.2.2供试品溶液的制备取复方当归注射液，过0.45μm微孔滤膜后，即得。　　2.3方法学考察　　2.3.1线性关系分别精密吸取上述对照品储备液适量，加甲醇适量，配制成不同浓度的对照品溶液。阿魏酸：0.0044

7、4，0.0222，0.0444，0.0888，0.17776，0.2664mg/ml，羟基红花黄色素A：0.004508，0.02254，0.09016，0.18032，0.027048，0.36064mg/ml。结果表明，阿魏酸在4.44～266.4μg/ml之间与峰面积线形关系良好，回归方程为：A=54715C+17.739，r2=0.9999；羟基红花黄色素A在4.508～360.64μg/ml之间与峰面积线形关系