寡聚精氨酸修饰人内皮抑素的表达和纯化研究毕业论文

《寡聚精氨酸修饰人内皮抑素的表达和纯化研究毕业论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、本科生毕业论文药学院生物制药专业i年级学号学生姓名实习单位南京大学华子春教授研究室论文题目寡聚精氨酸修饰人内皮抑素的表达和纯化研究指导教师起止时间20木木.01.04一20木木.06.0320**年6月2日学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用或参考的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品或成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标注。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名：日期：年_

2、月日学位论文版权协议书本人完全了解关于收集、保存、使用学位论文的规定，即：本校学生在学习期间所完成的学位论文的知识产权归所拥有。有权保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的纸本复印件和电子文档拷贝，允许论文被查阅和借阅。可以公布学位论文的全部或部分内容，可以将本学位论文的全部或部分内容提交至各类数据库进行发布和检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。论文作者签名：导师签名：曰期：年月日日期：年月日寡聚精氨酸修饰人内皮抑素的表达和纯化研究摘要目的：探索寡聚精氛酸修饰人内皮抑素融合蛋白的表达与纯化条件。方法

3、：将人内皮抑素基因克隆至pBV220载体同时在N端加寡聚精氛酸修饰形成新融合蛋白，于培养基中培养。在摇床中经温度诱导培养后，取样进行SDS—PAGE分析，判断是否表达成功。用Ni柱亲和纯化该表达蛋白，样品洗脱液进行SDS—PAGE分析，判断是否纯化成功。结果与结论：经过SDS—PAGE分析，寡聚精氨酸修饰人内皮抑素的融合蛋白能够很好的表达与纯化，为下一步进行的活性研究奠定基础。关键词人内皮抑素；寡聚精氛酸；融合蛋白；表达；纯化TostudytheexpressionandpurificationconditionsofOli

4、goargininemodifyinghumanendostatinJuHongxiaoAbstractObjective:ToexploretheexpressionandpurificationconditionsofOligoargininemodifyinghumanendostatinfusionprotein.Methods:TheHumanendostatingenewhichwasclonedintopBV220carrierandaddingarginineoligomertoNterminaltoform

5、newfiisionproteinwascultivatedintheculturemedium.AftertemperatureinductionculturingintheShakingtable,analyzingsamplesbySDS-PAGEtodeterminewhetherexpressingsucccssfully.ThcnthewayofaffinitypurificationofexpressionproteinisusingNiaffinitycolumn.Inthesameway,analyzeth

6、esesampleswhetherpurifyingsuccessfully.Resultsandconclusion:AccordingtotheSDS-PAGEanalysis，provedthatarginineoligomermodifiedhumanendostatinfusionproteincanbeexpressedandpurifiedwell.Thisstudylaidthefoundationforthenextstepsoftheactivitystudy.Keywords：Humanendostat

7、in,；Arginineoligomer，；Fusionprotein，；Expression；Purification在生活条件越来越好的现在，肿瘤成为一个困扰人们的重大问题，威胁着人类生命健康，于是其诊断和治疗方法成为医学和生命科学的研宄热点。R前，对于肿瘤的治疗，主要以手术、化学药物治疗和放射性治疗为主，但从肿瘤生长方而考虑，还可以抑制肿瘤血管来遏制肿瘤达到治疗FI的。内皮抑素就是一种抑制肿瘤血管生成的抗血管生成因子之一，所以本文研宂人内皮抑素的表达和纯化，而经过寡聚精氨酸修饰后的人内皮抑素增加了细胞通透性，更具有研宂

8、性。1.实验材料1.1实验试剂质粒pBV220/RhEndostatin-9R由本实验室保存，Ni-NTAHisBind树脂购买于Novagen公司。LB培养蕪成分：胰蛋白胨(Tryptonc),酵母提取物(Yeastextract),氯化钠(NaCl),去离子水，氨节青霉素(Amp)分离