视瞻昏渺发病机理与vegf、bfgf、pedf表

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1、视瞻昏渺发病机理与VEGF、bFGF、PEDF表【摘要】目的：观察脉络膜新生血管（V）动物模型视网膜色素上皮至脉络膜之间细胞因子VEGF、bFGF、PEDF表达的变化。方法：用半导体激光光凝建立V动物模型，于造模后1entepithelium-derivedfactor，PEDF）等密切相关。因此,我们从基础实验研究着手，建立相关动物模型,对VEGF、bFGF、PEDF进行研究,以期探索本病的发病机理，为寻求有效的治疗方案奠定实验基础。1材料与方法1.1实验材料成年青紫蓝兔12只（约6月~7月龄），普通级，体重（2500±20）g。1.2实验方法1.2.1造模方法12只青

2、紫蓝兔随机分为正常对照组和模型组两组，每组6只。模型组以0.5%美多丽P滴眼液双眼散瞳，0.4%倍诺喜行眼表麻醉后,在全视网膜镜下用半导体激光（波长532nm）于视乳头下方作视网膜光凝。照射部位位于视乳头及髓线下方，以光凝后有气泡产生为击破Bruch膜的标志［1］。激光参数：功率625m，点数40点。1.2.2观察指标与检查方法于造模后1ias-2000型图象分析系统测定VEGF、bFGF及PEDF阳性表达。1.3统计学方法采用SPSS12.0统计软件，组间比较采用t检验。2结果2.1HE、VEGF、bFGF与PEDF染色结果结果见图1。由图1可以看出，HE染色正常对照组

3、可见视网膜、脉络膜的各层结构整齐，细胞结构正常。视网膜各层细胞着染正常，未见坏死、出血等结构改变。视网膜神经纤维层排列完整，细胞排列致密，内核层无碎裂及细胞核减少，椎杆体细胞排列整齐，色素上皮细胞排列紧密；脉络膜结构完整，各层细胞着染正常。模型组可见视网膜神经节细胞不同程度减少，内颗粒层和外颗粒层结构不清，激光斑处色素上皮层基本消失，视网膜、脉络膜黏附在一起，激光斑下可见成纤维细胞，其中可见V，其血管管径较小，血管壁内皮细胞核肿胀，较圆。正常对照组视网膜色素上皮至脉络膜之间VEGF、bFGF、PEDF阳性表达较少，呈颗粒状；模型组阳性表达较多，呈密集的颗粒状及条带状，激光

4、斑两侧视网膜脉络膜VEGF、bFGF、PEDF阳性表达较集中。视网膜色素上皮至脉络膜之间有棕黄色的颗粒，为bFGF阳性表达。正常对照组bFGF阳性表达较少，呈颗粒状；模型组阳性表达较多，呈密集的颗粒状及条带状，激光斑两侧视网膜脉络膜bFGF、bFGF、PEDF阳性表达较集中。2.2VEGF、bFGF及PEDF阳性表达与VEGF/PEDF结果比较结果见表1。由表1可见，造模后8w与正常对照组比较，模型组VEGF、bFGF上调（P<0.01），PEDF值轻度上调，VEGF/PEDF值升高（P<0.01）。3讨论早在《诸病源候论》中已有“目暗不明候”和“目茫茫候”的

5、记载。《证治准绳》在论述视瞻昏渺时曰：“若人年五十以外而昏者，虽治不复光明，其时犹月之过望，天真日衰，自然目光渐谢”；《证治准绳·七窍门》中亦有云：“谓目内外别无证候，但自视昏渺，蒙昧不清也。”目前本病尚无专门的动物模型，V是渗出型年龄相关性黄斑变性的主要临床表现和致盲因素，因此可将V动物模型作为视瞻昏渺实验研究的基础。有学者提出V的发生首先是蛋白酶被激活，蛋白酶溶解了血管基底膜和周细胞外质的蛋白，使之水解，微血管内皮细胞通过血管基底膜浸润、迁移进入临近细胞外间质形成新生血管芽，这些新生血管芽穿过破裂的Bruch膜向色素上皮下生长，进一步侵犯神经上皮层，久之形成网状结构的

6、新生血管膜。本实验HE染色结果显示，激光斑处的色素上皮层断裂，为V的发生创造了前提条件，激光斑处可见管径狭窄、内皮细胞核圆的新生血管。脉络膜新生血管的发生机制尚未十分明了，一般认为是多种因素共同作用的结果。其病理基础是视网膜脉络膜局部的缺血缺氧，造成脉络膜微循环障碍及视网膜色素上皮功能异常，同时激发了各种因子的活性，打破了多种因子间的平衡。在血管新生的调控机制上，受到血管新生促进因子和抑制因子的调控，正常情况下，血管新生的诱导与抑制处于平衡状态，两种因子的平衡使血管处于正常的生长状态，一旦此平衡打破，就会激活血管系统发芽长出新生血管［2］。VEGF和bFGF是血管新生的主

7、要诱导因子，二者有协同作用。目前普遍认为视网膜内VEGF过度表达是引起视网膜内及视网膜下新生血管形成的重要因素。本实验用高能量、短曝光时间、小光斑的半导体激光诱发V模型，造成光凝部位局部的炎症和缺血缺氧，而VEGF、bFGF免疫组化染色亦显示模型组阳性表达高于正常对照组。据此推断，半导体激光诱发V动物模型是通过VEGF、bFGF的上调实现的，bFGF的表达与VEGF的表达走势一致，二者起协同性作用促进血管新生。PEDF属于丝氨酸蛋白酶抑制超家族成员。PEDF最初是作为一种神经营养因子被发现和认识的，进一步研究发现PEDF除具有